乳酸左氧氟沙星注射液光學(xué)雜質(zhì)測定的不確定度評定

劉斐1，周維利1，王維劍1，杜亮2

(1.山東省食品藥品檢驗研究院，山東 濟(jì)南 250101；2.濟(jì)南軍區(qū)聯(lián)勤部疾病預(yù)防控制中心，山東 濟(jì)南 250014)

摘要：目的建立鹽酸左氧氟沙星注射液光學(xué)雜質(zhì)測定的不確定度評定方法。方法建立數(shù)學(xué)模型，對含量測定過程中各影響因素進(jìn)行分析評估。結(jié)果通過計算各變量的不確定度，合成不確定度，最終得出測定結(jié)果的擴(kuò)展不確定度。結(jié)論該評定方法適用于高效液相色譜法測定乳酸左氧氟沙星光學(xué)雜質(zhì)的不確定度評定。

關(guān)鍵詞：左氧氟沙星；光學(xué)雜質(zhì)；不確定度

基金項目：國家科技重大專項課題-重大新藥創(chuàng)制(No.2009ZX09313-023)

作者簡介：劉斐，女，副主任藥師，研究方向：藥物分析，E-mail:827170070@qq.com

通訊作者：杜亮，女，研究方向：藥學(xué)，Tel:0531-81216507，E-mail:michael19790623@hotmail.com

中圖分類號：R927.11文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

Evaluation of uncertainty for the optical impurity test of Levofloxacin Lactate Injection

LIUFei1，ZHOUWei-li1，WANGWei-jian1，DULiang2

(1.ShandongInstituteforFoodandDrugControl，Jinan250101，China；2.Center

forDiseasePreventionandControlofJinanMilitaryCommand，Jinan250014，China)

Abstract：ObjectiveTo establish a method of uncertainty evaluation for the optical impurity test of Levofloxacin Lactate Injection.MethodsThe uncertainty was evaluated by an established mathematical model and the analysis of various factors affecting sample detection.ResultsEach componet of uncertainty was calculated and then the combined uncertainty was finally obtained by synthesizing the uncertainties of various component variables.ConclusionThis method was appropriate to be used in the uncertainty evaluation for the optical impurity test of Levofloxacin Lactate Injection.

Key words:Levofloxacin;Optical impurity;Uncertainty

測量不確定度就是對測量結(jié)果質(zhì)量的定量表征，不確定度的大小反應(yīng)了測量結(jié)果的可信程度以及測量方法的合理性。近年來，不確定度評定已經(jīng)廣泛應(yīng)用于國際上各個行業(yè)的測量/校準(zhǔn)實驗室，國內(nèi)藥品檢驗行業(yè)的不確定度評定工作起步較晚，但目前已經(jīng)引起了行業(yè)內(nèi)部的足夠重視，尤其是進(jìn)行藥品檢測實驗室認(rèn)可時，檢測和校準(zhǔn)實驗室認(rèn)可準(zhǔn)則(ISO/IEC 17025-2005)要求檢測和校準(zhǔn)實驗室，都必須建立并實施測量不確定度的評估程序，以評價測試結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性[1]。

本文以乳酸左氧氟沙星(Levofloxacin)注射液為例，根據(jù)國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)發(fā)布的JJF1059—1999計量技術(shù)規(guī)范《測量不確定度評定與表示》[2]，并參考有關(guān)文獻(xiàn)[3~9]，建立其光學(xué)雜質(zhì)(光學(xué)異構(gòu)體)測定的不確定度評定方法，對實驗過程中各影響因素進(jìn)行分析評估，最終計算得出測定結(jié)果不確定度值。

1儀器與試藥

Agilent 1200高效液相色譜儀(檢定證書給出不確定度0.49%，K=3)；BP211D電子天平(d=0.01 mg/0.1 mg)。

乳酸左氧氟沙星注射液(魯抗辰欣制藥有限責(zé)任公司，批號：09051152011)；甲醇為色譜純，其他試劑為分析純；玻璃器皿均為A級。

2方法

2.1色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；硫酸銅D-苯丙氨酸溶液(取D-苯丙氨酸1.32 g與硫酸銅1 g，加水1 000 mL，加氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值3.5)-甲醇(82∶18)；檢測波長：293 nm；進(jìn)樣量：20 μL；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：40 ℃。

2.2供試品溶液的配制精密量取本品適量，加水稀釋制成1.0 mg·mL-1的溶液。

2.3對照溶液的配制精密量取供試品溶液5 mL，置500 mL量瓶中，加水溶解稀釋至刻度。

3結(jié)果

3.1數(shù)學(xué)模型

X：光學(xué)雜質(zhì)含量(%)

At：供試品中光學(xué)雜質(zhì)峰面積

As：對照峰面積

Vs：對照溶液稀釋倍數(shù)

由供試品溶液的制備過程可知Vs=500 mL/5 mL=100，實驗測得As=467.21,At=124.70,則靈敏系數(shù)為：

3.2不確定度分量來源的分析 (因果圖)見圖1。

圖1　不確定度的來源分析圖

3.3不確定度的量化分析(各不確定度分量的計算結(jié)果見表3)

u(Vs) =urel(Vs)×Vs=0.185

3.3.2對照峰面積引起的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(As)取對照溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，計算不確定度，峰面積結(jié)果見下表。

表1　對照品溶液測定結(jié)果

高校液相色譜儀引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：urel(A)=檢定證書給出的不確定度/K=0.49%/3=0.001 63(K=3)

u(As)=urel(As)×As=1.611 87

3.3.3供試品峰面積引起的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(At)取對照溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，計算不確定度，峰面積結(jié)果見表2。

表2　供試品溶液側(cè)定結(jié)果

高校液相色譜儀引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：urel(A)=檢定證書給出的不確定度/K=0.49%/3 =0.001 63(K=3)

u(At)=urel(At)×At=0.645 95

3.3.4合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度供試品溶液的峰面積、對照溶液的峰面積、對照溶液稀釋體積等的不確定度相互獨立，故將上述數(shù)據(jù)合成，得合成相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(X)為：

表3　相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度一覽表

3.4擴(kuò)展不確定度計算得鹽酸左氧氟沙星注射液中有關(guān)物質(zhì)的含量的測定結(jié)果X=0.27%，測量結(jié)果的合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(X)=0.001 74%。按慣例，若取包含因子K=2(95%的置信區(qū)間)，得測

量結(jié)果的擴(kuò)展不確定度：

U=K×u(X)=0.004%

3.5測量結(jié)果的表示供試品鹽酸左氧氟沙星注射液中有關(guān)物質(zhì)的含量可表示為：X=0.27%±0.004%，K=2(95%的置信區(qū)間) 。

4討論

靈敏系數(shù)反映了該輸入量標(biāo)準(zhǔn)不確定度對輸出量不確定度貢獻(xiàn)的靈敏程度，而且標(biāo)準(zhǔn)不確定度只有乘以該靈敏系數(shù)才能構(gòu)成一個不確定度分量，即和輸出量有相同的單位，因此在不確定度評定過程中靈敏系數(shù)不能被忽視。

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