孫茂春，康曉琳

(煙臺(tái)東方醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東 煙臺(tái)，264000)

?

HPV-DNA聯(lián)合TCT檢查對(duì)于診斷宮頸疾病的價(jià)值及其病理分型研究

孫茂春，康曉琳

(煙臺(tái)東方醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東 煙臺(tái)，264000)

[摘要]目的研究HPV-DNA聯(lián)合薄層液基細(xì)胞學(xué)(thin prep cytologic test，TCT)檢查對(duì)于診斷宮頸疾病的價(jià)值及其病理分型，為慢性宮頸炎的防治及宮頸癌的早期干預(yù)提供依據(jù)。方法選擇2012年9月至2015年12月在煙臺(tái)東方醫(yī)院婦科門診就診的女性患者761例為研究對(duì)象，采用HPV-DNA聯(lián)合TCT對(duì)患者進(jìn)行篩查，同時(shí)進(jìn)行宮頸組織病理活檢，比較不同篩查方法的價(jià)值。結(jié)果761例患者TCT檢查結(jié)果中正常或炎癥反應(yīng)565例(74.24%)，TCT檢查結(jié)果異常者196例(25.76%)，其中包括ASCUS者97例(49.49%)、LSIL者56例(28.57%)、HSIL者41例(21.43%)，SCC者2例(1.02%)。761例患者中HPV-DNA陽性者214例(28.12%)，其中高危型HPV-DNA陽性者149例(69.63%)，低危型HPV-DNA陽性者65例(30.37%)。761例患者中，TCT結(jié)果顯示細(xì)胞學(xué)陽性196例，陽性率為25.76%；HPV-DNA結(jié)果顯示HPV-DNA陽性214例，陽性率為28.12%，HPV-DNA檢測(cè)方法陽性率略高于TCT，但兩種檢測(cè)方法陽性率比較無顯著性差異(χ2=1.082，P>0.05)。對(duì)于TCT和HPV-DNA檢查任一陽性者共247例進(jìn)一步行陰道鏡和組織活檢病理檢查，病理學(xué)診斷結(jié)果提示HPV-DNA檢測(cè)敏感度及特異度均稍高于TCT檢測(cè)方法，兩種方法聯(lián)合檢測(cè)敏感度及特異度均最高。結(jié)論TCT和HPV-DNA聯(lián)合檢測(cè)在宮頸病變篩查中的廣泛應(yīng)用，可在很大程度上降低宮頸癌的漏診率，提高診斷效率。

[關(guān)鍵詞]薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查；人乳頭瘤病毒檢測(cè)；宮頸癌；診斷價(jià)值；病理分型

1資料與方法

1.1研究對(duì)象

選擇2012年9月至2015年12月在煙臺(tái)東方醫(yī)院婦科門診就診的女性患者761例為研究對(duì)象，患者年齡23～59歲，平均37.16±3.44歲，就診原因包括婦科查體、白帶增多、陰道不規(guī)則出血、月經(jīng)失調(diào)、同房后出血等，所有患者均進(jìn)行TCT和HPV-DNA檢查，對(duì)于TCT和HPV-DNA檢查任一陽性者共247例進(jìn)一步行陰道鏡和組織活檢病理檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有陰道鏡檢查及宮頸活檢禁忌癥者；②既往有宮頸切除病史及手術(shù)史；③既往有盆腔放射治療史者；④任一檢測(cè)方法陽性但不同意進(jìn)行陰道鏡檢查者。所有患者均知情同意并自愿參加本次研究。

1.2薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)

選擇月經(jīng)干凈后3～7天檢查(絕經(jīng)者無時(shí)間要求)，取材前48小時(shí)禁止性生活，檢查前3d禁止沖洗陰道、使用陰道內(nèi)藥物。將TCT專用采樣刷置于宮頸管內(nèi)并抵住宮頸，旋轉(zhuǎn)3圈，停留10s，然后將采樣刷置入液基細(xì)胞保存液中，專用制片機(jī)處理成薄層涂片，巴氏染色后進(jìn)行鏡檢，細(xì)胞學(xué)診斷按照國(guó)際癌癥協(xié)會(huì)推薦的(2001)分級(jí)系統(tǒng)作為診斷標(biāo)準(zhǔn)，分為正?；蜓装Y反應(yīng)、意義不明的不典型鱗狀細(xì)胞(atypical squamous cells，ASCUS)、低度鱗狀上皮內(nèi)病變(low-grade squamous intraepithelial lesions，LSIL)、高度鱗狀上皮內(nèi)病變(height of squamous intraepithelial lesion，HSIL)、鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma，SCC)。

1.3HPV-DNA檢測(cè)

使用羅氏-Lightcycler全自動(dòng)熒光定量PCR檢測(cè)儀，使用HPVl6/18型核酸檢測(cè)試劑盒。設(shè)臨界值對(duì)照、陰性對(duì)照、強(qiáng)陽性模板經(jīng)稀釋成103、104、105、106、107，用于做標(biāo)準(zhǔn)曲線，陽性者檢測(cè)結(jié)果≥500拷貝。檢測(cè)13種HPV分型，其中分為高危型和低危型兩大類，高危型HPV分型包括8種：HPV16、18、31、33、45、53、56和58；低危型HPV分型包括5種：HPV6、11、42、43和44，高危型HPV病毒合并低危型病毒感染為混合感染。

1.4病理學(xué)檢查

對(duì)337例患者中TCT、HPV-DNA任一檢測(cè)方法陽性及雙陽性者進(jìn)行陰道鏡檢查，若陰道鏡未發(fā)現(xiàn)病灶或圖像不清晰者，在宮頸3、6、9、12點(diǎn)處取材活檢，若陰道鏡圖像異常者在病灶最嚴(yán)重部位或可疑部位取材活檢，按照2003年WHO《乳腺與女性生殖系統(tǒng)腫瘤病理與遺傳學(xué)》診斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果分為：慢性炎癥、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宮頸癌。

水云天蘇醒過來，臉上已經(jīng)顯出辭世的倦容。老人睜開眼睛，顯現(xiàn)出生命跡象，深情地望著林志。林志坐在床前，輕輕地說：“老師，您有什么事，吩咐我?。　?/p>

1.5觀察指標(biāo)

觀察TCT細(xì)胞學(xué)檢測(cè)結(jié)果、HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果，對(duì)任一檢測(cè)方法陽性者經(jīng)陰道鏡宮頸活檢進(jìn)行病理診斷，比較兩種檢測(cè)方法單獨(dú)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均使用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料的比較方法采用卡方檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)結(jié)果

761例患者TCT檢查結(jié)果中正?；蜓装Y反應(yīng)565例(74.24%)，TCT檢查結(jié)果異常者196例(25.76%)，其中包括ASCUS者97例(49.49%)、LSIL者56例(28.57%)、HSIL者41例(21.43%)，SCC者2例(1.02%)。與病理檢查結(jié)果對(duì)照后發(fā)現(xiàn)，196例TCT檢查結(jié)果異常者87例(44.39%)為慢性宮頸炎，其次為CINⅠ58例(29.59%)，見表1。

2.2HPV-DNA檢查結(jié)果

761例患者中HPV-DNA陽性者214例(28.12%)，其中高危型HPV-DNA陽性者149例(69.63%)，低危型HPV-DNA陽性者65例(30.37%)。與病理檢查結(jié)果對(duì)照后發(fā)現(xiàn)，214例HPV-DNA陽性者121例(56.54%)為慢性宮頸炎，其次為CINⅠ50例(23.36%)，見表2。

2.3薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)與HPV-DNA檢查效果比較

761例患者中，TCT結(jié)果顯示細(xì)胞學(xué)陽性196例，陽性率為25.76%；HPV-DNA結(jié)果顯示HPV-DNA陽性214例，陽性率為28.12%，其中TCT及HPV-DNA雙陽性者178例(23.39%)。HPV-DNA檢測(cè)方法陽性率略高于TCT，但兩種檢測(cè)方法陽性率比較無顯著性差異(χ2=1.082，P>0.05)，見表3。

2.4不同檢測(cè)方法敏感度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值等比較

對(duì)于TCT和HPV-DNA檢查任一陽性者共247例進(jìn)一步行陰道鏡和組織活檢病理檢查，病理學(xué)診斷結(jié)果：炎癥128例，CINⅠ61例，CINⅡ29例，CINⅢ24例，宮頸癌5例，HPV-DNA檢測(cè)敏感度及特異度均稍高于TCT檢測(cè)方法，兩種方法聯(lián)合檢測(cè)敏感度及特異度均最高，見表4。

3討論

3.1薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)在宮頸疾病篩查中的應(yīng)用

宮頸癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)較為漫長(zhǎng)的過程，其早期可無癥狀，當(dāng)出現(xiàn)接觸性出血或者陰道異常流血流液時(shí)，多數(shù)患者已經(jīng)到中晚期，宮頸癌的手術(shù)或放化療給女性的身體及心理造成極大傷害。因此，對(duì)宮頸癌前病變和早期癌的及時(shí)高效篩查是預(yù)防和治療宮頸癌，提高患者生存率，降低其死亡率的關(guān)鍵[4]。臨床研究表明，從CIN發(fā)展到浸潤(rùn)癌大約需經(jīng)過8～12年的時(shí)間，在未經(jīng)治療的CINⅡ-CINⅢ患者中，約有5%～30%可發(fā)展為浸潤(rùn)癌，但接近10%～40%的病變可發(fā)生逆轉(zhuǎn)，而HPV感染后大約經(jīng)過20年左右才可能致癌[5]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，761例患者TCT檢查結(jié)果中異常者196例(25.76%)，其中最常見為ASCUS者(97例)，其次為L(zhǎng)SIL和HSIL，與病理檢查結(jié)果對(duì)照后發(fā)現(xiàn)，196例TCT檢查結(jié)果異常者87例(44.39%)為慢性宮頸炎，其次為CINⅠ58例(29.59%)。而單用TCT檢查敏感度和特異度分別為86.65%和62.47%，宮頸相關(guān)疾病的診斷中，采用TCT篩查已經(jīng)比較普遍，但是若將其作為單一檢測(cè)手段，可能因?yàn)椴僮鞯仍蛟斐杉訇栃曰蛘呒訇幮缘某霈F(xiàn)。因此，不能將TCT作為確診宮頸癌的唯一診斷依據(jù)。

3.2HPV-DNA檢測(cè)在宮頸疾病篩查中的應(yīng)用

HPV是一組DNA病毒，高危型HPV主要有16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68 型，不同的類型致癌率也有一定的差異。HPV感染好發(fā)于年輕女性，大多數(shù)是一過性的，可自行消退，僅大約3%患者感染HPV后轉(zhuǎn)為持續(xù)狀態(tài)[6]。HPV感染持續(xù)存在1～2年可引起宮頸輕微病變，高危型HPV感染持續(xù)存在10～15年部分患者可發(fā)展為宮頸癌，因此，HPV篩查對(duì)預(yù)防宮頸癌有重要意義。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，761例患者中HPV-DNA陽性者214例(28.12%)，其中高危型HPV-DNA陽性者149例(69.63%)，低危型HPV-DNA陽性者65例(30.37%)。與病理檢查結(jié)果對(duì)照后發(fā)現(xiàn)，214例HPV-DNA陽性者121例(56.54%)為慢性宮頸炎，其次為CINⅠ50例(23.36%)，單用TCT檢查敏感度和特異度分別為82.32%和58.44%。高危型 HPV 檢測(cè)在預(yù)防宮頸癌的方案中越來越受到醫(yī)務(wù)工作者的重視，加上HPV的取材簡(jiǎn)單方便，在臨床上被廣泛應(yīng)用。有研究顯示，在宮頸癌患者中，16、18 型的檢出率就高于其他型[7]。 因此，高危型 HPV 分型檢測(cè)對(duì)病情的追蹤、監(jiān)測(cè)、評(píng)價(jià)及預(yù)后有指導(dǎo)作用。但單獨(dú)用于宮頸癌的篩查有一定局限性，可能存在假陽性或假陰性，且不能從中知道是否處于持續(xù)感染或?qū)m頸是否已致病變及病變輕重。

3.3薄層液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV-DNA檢測(cè)在宮頸疾病篩查中的價(jià)值

文獻(xiàn)報(bào)道，單獨(dú)使用TCT或HPV-DNA在診斷宮頸疾病篩查中均有一定的局限性，而兩者聯(lián)合應(yīng)用可提高宮頸癌篩查的價(jià)值，王愛春等[8]研究TCT及HC2-HPV-DNA檢測(cè)對(duì)絕經(jīng)后婦女宮頸癌篩查的應(yīng)用價(jià)值評(píng)估，可提高診斷篩選的陽性檢出率、診斷符合率、敏感性，有效降低漏診。本文以宮頸活檢病理檢查為金標(biāo)準(zhǔn)來判斷兩種檢測(cè)方法單獨(dú)使用或聯(lián)合應(yīng)用的價(jià)值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩種方法聯(lián)合檢測(cè)敏感度及特異度均最高，提示TCT和HPV-DNA 聯(lián)合篩查可以互補(bǔ)不足，提高宮頸疾病的檢出率及篩查準(zhǔn)確程度，其漏診率低，在臨床上適宜大力推廣，實(shí)現(xiàn)早診斷、早治療、早預(yù)防宮頸癌的發(fā)生。

[參考文獻(xiàn)]

[1]韓歷麗,趙同香,鄧小紅.宮頸癌篩查工作評(píng)價(jià)指標(biāo)的比較研究[J].中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志(電子版),2014,10(6):757-761.

[2]Pimple S,Muwonge R,Amin G,etal.Cytology versus HPV testing for the detection of high-grade cervical lesions in women found positive on visual inspection in Mumbai India[J].Int J Gynaecol Obstet,2010,108(3):236-239.

[3]付玉梅,張曉坤,梁惠芬,等.HC2-HPV-DNA聯(lián)合TCT篩查宮頸癌早期及癌前病變的臨床分析[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2012,28(11):1823-1825.

[4]Wang S Y,Yang H W,Zhang H T,etal.A surface plasmon resonance-based system to genotype human papillomavirus[J].Cancer Genet Cytogenet,2010,200(2):100-105.

[5]Dahlstr?m L A,Ylitalo N,Sundstr?m K,etal.Prospective study of human papillomavirus and risk of cervical adenocarcinoma[J].Int J Cancer,2010,127(8):1923-1930.

[6]McAdam M,Sakita J,Tarivonda L,etal.Evaluation of a cervical cancer screening program based on HPV testing and LLETZ excision in a low resource setting [J].PLoS One, 2010, 5(10): e13266.

[7]徐興云,趙蔚,李桂軍,等.細(xì)胞學(xué)聯(lián)合人乳頭瘤病毒雜交捕獲檢測(cè)在宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變篩查中應(yīng)用[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2012,92(35):2 503-2 505.

[8]王愛春,顧依群,王軍,等.TCT及HC2-HPV-DNA檢測(cè)對(duì)絕經(jīng)后婦女宮頸癌篩查的應(yīng)用價(jià)值評(píng)估[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué),2011,19(1):133-135.

[專業(yè)責(zé)任編輯：安瑞芳]

Value of HPV-DNA combining TCT in diagnosis of cervical disease and pathological typing

SUN Mao-chun, KANG Xiao-lin

(Department of Gynecology and Obstetrics, Yantai Dongfang Hospital, Shandong Yantai 264000, China)

[Key words]thin prep cytology test (TCT); human papilloma virus (HPV) test; cervical cancer; diagnostic value; pathological type

[Abstract]Objective To study the value of HPV-DNA combining TCT examination in diagnosis of cervical disease and pathological types, so as to provide basis for prevention of chronic cervicitis and early intervention of cervical cancer. Methods During the period of September 2012 to December 2015 totally 761 female patients visiting the outpatient department of gynecology in Yantai Dongfang Hospital were selected as research objects, and HPV-DNA combining TCT was used for screening. Meanwhile, cervical biopsy was performed to compare different methods. Results Among 761 patients TCT examination results of 565 cases (74.24%) were normal or inflammatory, and those were abnormal in 196 cases (25.76%), including 97 cases (49.49%) of ASCUS, 56 cases (28.57%) of LSIL, 41 cases (21.43%) of HSIL, and 2 cases (1.02%) of SCC. There were 214 cases (28.12%) with positive HPV-DNA results, including 149 cases (69.63%) of high risk type and 65 cases (30.37%) of low risk type. Of 761 patients, TCT results showed positive cytology in 196 cases (25.76%). HPV-DNA results showed that HPV-DNA was positive in 214 cases and the positive rate was 28.12%. The positive rate of HPV-DNA testing method was slightly higher than that of TCT, but two methods were not significantly different in positive rate (χ2=1.082,P>0.05). A total of 247 cases were positive for TCT or HPV-DNA examination, and they further accepted colposcopy and biopsy pathologic examination. Pathological diagnosis results suggested HPV-DNA detection had higher sensitivity and specificity than TCT detection method, and the sensitivity and specificity of combining two methods were highest. Conclusion Combined detection of HPV-DNA and TCT is widely used in cervical lesions screening, and it reduces missed diagnosis rate of cervical cancer to great extent and improves diagnostic efficacy.

[收稿日期]2016-05-17

[作者簡(jiǎn)介]孫茂春(1964-)，女，主治醫(yī)師，主要從事婦女保健方面的工作。

[通訊作者]康曉琳，副主任技師。

doi:10.3969/j.issn.1673-5293.2016.05.033

[中圖分類號(hào)]R711.7

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1673-5293(2016)05-0647-03