魏　強，　秦　川

(北京協(xié)和醫(yī)學院比較醫(yī)學中心，中國醫(yī)學科學院醫(yī)學實驗動物研究所，衛(wèi)生部人類疾病比較醫(yī)學重點實驗室，

國家中醫(yī)藥管理局人類疾病動物模型三級實驗室，北京　100021)

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淺談實驗動物微生物國家標準

魏強，秦川

(北京協(xié)和醫(yī)學院比較醫(yī)學中心，中國醫(yī)學科學院醫(yī)學實驗動物研究所，衛(wèi)生部人類疾病比較醫(yī)學重點實驗室，

國家中醫(yī)藥管理局人類疾病動物模型三級實驗室，北京100021)

【摘要】1994年我國第一個國家標準《實驗動物微生物學和寄生蟲學監(jiān)測等級》頒布實施以來已經(jīng)跨越20年，使得微生物監(jiān)測工作有了依據(jù)，在促進我國實驗動物質量提高，滿足科學研究需要等方面起到了無可替代的作用。國標本身在伴隨著實驗動物整體發(fā)展而不斷發(fā)展、提高的過程中，也發(fā)現(xiàn)了一些問題，諸如定位問題、等級問題、檢測頻率問題等等。本文就以上問題，進行了分析，并提出一些觀點和建議，供大家思考，以便集思廣益，為配合國家十三五和中長遠科技發(fā)展計劃，修訂更科學、更嚴謹、更適用的微生物標準做好前期工作。

【關鍵詞】動物實驗；微生物標準

實驗動物國家標準在實驗動物質量提高、保障“標準化的實驗動物”用于生命科學研究，特別是醫(yī)學、醫(yī)藥、生物、獸醫(yī)、比較醫(yī)學、轉化醫(yī)學等等方面的研究起著其他手段不可替代的作用。我國實驗動物標準制定工作在政府部門的關懷支持下，經(jīng)過中國實驗動物標準化委員會組織多種跨學科工作者的不斷努力，取得了很大的發(fā)展，形成了一定的標準體系，尤其是1994、2001和2008～2011年國家實驗動物微生物、寄生蟲等級和檢測標準的頒布，使我國實驗動物質量保證有了綱領性文件，為我國實驗動物質量穩(wěn)步推進提供了有力的保障。但是，隨著實驗動物學科及相關學科的發(fā)展，特別是和國際實驗動物資源的交換越加頻繁，對現(xiàn)行版本的微生物國家標準，也提出了諸多建議、觀點，本文就這些觀點、建議做一些梳理，供大家思考，以便促進百家爭鳴，集思廣益，為配合國家十三五和中長遠科技發(fā)展計劃，修訂更科學、更嚴謹、更適用的微生物標準做好前期工作。

1國家標準定位

實驗動物法治化管理以1988年國家科委頒布的《實驗動物管理條例》(眾所周知的2號令)為標志，陸續(xù)頒布了《實驗動物質量管理辦法》、《實驗動物許可證管理辦法》以及各省市相關法規(guī)、政策等，這些法規(guī)、政策的頒布實施，確定了管理主體和管理體系，明確了管理措施和管理辦法，使我國實驗動物質量監(jiān)管體系有了根本性的改變和改善。

實驗動物國家標準，包括微生物和寄生蟲標準在1994年的基礎上，提高、修訂，并將寄生蟲標準獨立，目前實施版為2008、2011年頒布版本。隨著我國實驗動物科學發(fā)展，形成了具有我國特色的相關標準，促進了實驗動物監(jiān)測技術體系的發(fā)展, 形成了一定的規(guī)模，并達到了一定的標準化水平，實驗動物監(jiān)測能力和檢測技術也是圍繞國家標準制訂的內容開展工作。

因此，《實驗動物微生物學等級及監(jiān)測》和《實驗動物寄生蟲學等級及監(jiān)測》標準作為強制性標準(2008年后改為大部分強制性標準)，按照《實驗動物管理條例》明確定位，將實驗動物分成不同的四個等級，提供檢測項目和方法，為我國實驗動物依法管理提供了科學依據(jù)，從而保證我國實驗動物整體水平的提高和滿足生命科學發(fā)展的基本需要。

2國家標準歷史作用

實驗動物國家標準在經(jīng)過微生物、寄生蟲檢測技術經(jīng)驗積累多年后，1994年形成我國第一個標準《實驗動物微生物學和寄生蟲學監(jiān)測等級》。監(jiān)測工作有了依據(jù)，動物質量等級開始明確，不符合等級的動物不再被認可。實驗用動物的概念隨即拓展，動物實驗室化的基礎工作也引起重視。

2001年在《實驗動物微生物學和寄生蟲學監(jiān)測等級》的基礎上，結合學科概念，將與寄生蟲學監(jiān)測等級的有關內容分開，分別形成《實驗動物微生物學等級及監(jiān)測》(GB14922.2-2001)、《實驗動物 微生物學檢測方法》(GB/T14926.1-14926.64-2001)和《實驗動物寄生蟲學等級及監(jiān)測》(GB14922.1-2001)、《實驗動物寄生蟲學檢測方法》(GB/T18448.1-18448.10-2001)的獨立標準。標準得到進一步優(yōu)化，如刪除了大、小鼠輪狀病毒檢測；取消了大、小鼠普通級動物等級，為提高動物質量，全面逐級取消普通級動物奠定基礎。

2006年開始廣泛征求各方意見和建議，修訂時間跨度達5年之久，形成2011年版標準，使得微生物和寄生蟲監(jiān)測內容和技術達到統(tǒng)一、整體化要求，兩者監(jiān)測內容緊密配合，更適合學科要求。標準規(guī)定了實驗動物微生物學、寄生蟲學等級及監(jiān)測，包括：實驗動物微生物學、寄生蟲學的等級分類，檢測要求，檢測程序，檢測規(guī)則、方法，結果判定和報告等。標準取消了李斯特桿菌的檢測項目，優(yōu)化了部分檢測方法，特別是犬相關病毒如犬細小病毒等疫苗免疫后70%陽性判為合格，更符合科學性和適用性。經(jīng)過充分考慮，未增加諾如病毒等的檢測項目。

目前，根據(jù)以上國家標準，按照微生物、寄生蟲對實驗動物致病性和危害性的不同，以及是否存在于動物體內, 將實驗動物分成不同的四個等級?？紤]各種實驗動物質量控制的具體要求和情況不同，又進一步具體化：實驗小鼠和大鼠的微生物學等級分為清潔級、無特定病原體級(SPF)和無菌級動物三個等級。豚鼠、地鼠和兔為四級。犬和猴分為普通級和SPF級。

從三次修訂來看，第一次版本起到“從無到有”的歷史作用，第二次修訂主要起到精簡、提高作用，第三次修訂起到更規(guī)范、更科學、更適用的作用?？傮w是伴隨著實驗動物整體發(fā)展而不斷發(fā)展、提高。

3現(xiàn)狀及問題

3.1定位問題

國家標準是全國實施的標準，應該是準入性的基本標準，也可以理解為“最低限制”性標準。目前標準，既含有就高不就低的原則，又有“要符合中國國情”的成分。結果是，既有國家標準的理念，又有行業(yè)、企業(yè)標準的痕跡，處于高不成低不就的狀態(tài)。

3.2動物等級問題

目前將動物分為普通級、清潔級、無特定病原體級(SPF)和無菌級動物四個等級。一刀切起到了全國統(tǒng)一，同步推進的作用。但往往達不到要求，甚至采取不合適方法規(guī)避正常檢測。規(guī)定普通動物不能用于實驗，只用于教學，其實教學的概念包含動物實驗。無菌級實驗動物屬于特殊用途動物，不應歸為常規(guī)動物(悉生動物、無抗原動物)。特別是清潔級動物，是考慮國情的產(chǎn)物。

3.3檢測項目問題

有學者提出作為國標檢測項目過高，如綠膿桿菌、金黃葡萄球菌項目，高于有些國家的機構檢測項目，給動物進出口、資源交流帶來“技術壁壘”，也可理解為自找麻煩。更有學者提出SPF概念應該遵循經(jīng)典含義，即應按實驗要求排除的病原，而不是盲目規(guī)定，限制動物使用；相反的，有學者提出檢測項目不全，應增加諾如病毒，牛棒狀桿菌等項目。并提出作為國家標準，檢測的項目應該涵蓋所有國外提倡排除的項目，這樣做，將有力提高我國實驗動物質量，凸顯國家質量水平。

3.4檢測頻率問題

大部分的意見是，國標不易規(guī)定所有的項目均要求年檢4次，應按病原特性進行檢測。檢測的方法應該增加病原檢測的力度等。也有學者提出，一年檢測4次實為不足，尤其是嚙齒類動物，繁殖幾代可能才檢測到一次，漏檢的幾率會很大。

4思路和建議

綜合以上觀點，提出以下思路和建議，歡迎學者各盡所能，積極發(fā)表各種意見，為進一步配合國家十三五和中長遠科技發(fā)展計劃，修訂更科學、更嚴謹、更適用的微生物標準做好前期工作。

(1)建議取消現(xiàn)有的實驗動物四個等級劃分：4個等級的劃分，不符合所有動物特性和環(huán)境要求，也阻止了一些動物作為“實驗動物”的資格，處于“實驗用動物”的狀態(tài)，既不科學，也不適用

(2)建議制定實驗動物微生物、寄生蟲通用標準，即SPF等級標準：將國標回歸到基礎定位，即所謂最低標準。病原檢測項目即排除的病原重點分為3類：引起本動物疾病病原、人獸共患病病原、對實驗明顯有影響的病原。不再包含條件致病菌和環(huán)境指標性病原。

(3)鼓勵實驗動物生產(chǎn)單位、企業(yè)制定“行業(yè)標準或企業(yè)標準”：作為國家標準的補充和提高，將更高要求留給生產(chǎn)單位、企業(yè)，鼓勵他們自己制定檢測項目多、實行動態(tài)監(jiān)測的“行業(yè)標準或企業(yè)標準”，特別是關于悉生動物、無抗原動物和無菌動物相關標準，從標準方面鼓勵競爭，促使他們提供更優(yōu)質量的實驗動物。

〔修回日期〕2015-12-26

doi:10.3969.j.issn.1671-7856. 2016.02.001

【中圖分類號】R-33

【文獻標識碼】A

【文章編號】1671-7856(2016) 02-0001-03

實驗動物國家標準論壇

編者按： 實驗動物相關國家標準于1994年頒布實施以來已經(jīng)跨越21年，在促進我國實驗動物質量提高，滿足科學研究需要等方面起到了無可替代的作用。國標本身在伴隨著實驗動物整體發(fā)展而不斷發(fā)展、提高的過程中，也發(fā)現(xiàn)了一些問題，諸如國標定位問題、實驗動物等級問題、實驗用動物標準、領域覆蓋問題等等。本論壇擬就各種問題，組織國內外不同領域專家、學者廣泛開展討論，不設命題，自由撰文，以便集思廣益，聆聽各種觀點、建議，為配合國家十三五和中長遠科技發(fā)展計劃，修訂更科學、更嚴謹、更適用的實驗動物國家標準做好前期工作。

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