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利用高通量測(cè)序技術(shù)評(píng)價(jià)Neo轉(zhuǎn)基因豬的安全性
新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因(NEO)是對(duì)新霉素的抗藥基因,細(xì)胞表達(dá)該基因可以破壞卡那霉素和新霉素(原核生物)以及G418(geneticin)(真核生物)。該基因往往被克隆到表達(dá)載體,作為篩選基因,被廣泛地用作轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和植物生產(chǎn)的選擇標(biāo)記。近期的關(guān)注一直集中于NEO轉(zhuǎn)基因表達(dá)的安全問(wèn)題。在該項(xiàng)研究中,NEO轉(zhuǎn)基因豬和非轉(zhuǎn)基因豬被隨機(jī)分配到A組和B組,利用高通量測(cè)序,通過(guò)腸道菌群的變化來(lái)評(píng)估NEO轉(zhuǎn)基因的影響。A組豬只飼喂添加抗生素新霉素的標(biāo)準(zhǔn)日糧;B組豬只飼喂標(biāo)準(zhǔn)日糧。試驗(yàn)采用多重PCR技術(shù)檢測(cè)外源性NEO基因的轉(zhuǎn)移水平。通過(guò)檢測(cè)A組豬只腸道微生物的變化模式,研究A組轉(zhuǎn)基因豬中,腸道中分泌的NPT II(NEO表達(dá)產(chǎn)物)能否幫助豬只對(duì)抗新霉素。在B組豬只中研究了NEO基因?qū)δc道菌群的意外影響。結(jié)果表明:在任何轉(zhuǎn)基因豬的腸道菌群中未檢測(cè)到水平基因轉(zhuǎn)移;在A組,轉(zhuǎn)基因豬和非轉(zhuǎn)基因豬之間糞便樣品中變形菌數(shù)量的變化存在顯著差異;在B組,轉(zhuǎn)基因豬與非轉(zhuǎn)基因豬之間的厚壁菌、變形菌、乳桿菌和大腸桿菌的相對(duì)豐度存在顯著差異。我們推測(cè),轉(zhuǎn)基因組織/細(xì)胞中分泌的NPTII進(jìn)入腸道菌群可以抑制新霉素活性和菌群不同模式變化。此外,新的基因?qū)︼曃够A(chǔ)日糧(沒(méi)有補(bǔ)充新霉素)的轉(zhuǎn)基因豬腸道菌群有意想不到的影響。該項(xiàng)研究將幫助我們探索NEO轉(zhuǎn)基因在轉(zhuǎn)基因領(lǐng)域的安全問(wèn)題和監(jiān)管,同時(shí)為支持政府機(jī)構(gòu)對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的管理提供了科學(xué)數(shù)據(jù)。
(編譯自:http://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0150937)