楊　菁　雷　源　邢　輝.武漢大學(xué)人民醫(yī)院生殖中心，湖北武漢　430060；.湖北省襄陽市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北襄陽　440

長鏈非編碼RNAs與卵巢癌相關(guān)性的研究進展

楊菁1雷源1邢輝2
1.武漢大學(xué)人民醫(yī)院生殖中心，湖北武漢430060；2.湖北省襄陽市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖北襄陽441021

長鏈非編碼RNA（lncRNA）是長度大于200個核苷酸的非編碼RNA，因不編碼蛋白質(zhì)曾被稱為垃圾基因，隨著各種實驗技術(shù)的發(fā)展和對相關(guān)研究的不斷深入，垃圾基因的身份才被更正。lncRNAs目前已經(jīng)是繼mRNA、microRNA之后功能基因組研究領(lǐng)域的熱點。隨著卵巢癌與lncRNAs相關(guān)研究的深入展開，其作用機制日漸清晰，使其有希望成為將來卵巢癌的新型標志物和治療靶點，但要清楚了解尚有待于進一步探索。本文綜述了lncRNAs在卵巢癌領(lǐng)域的相關(guān)研究，旨在為研究卵巢癌侵襲及治療提供新的分子靶點。

卵巢癌；長鏈非編碼RNAs；研究進展；綜述

［Abstract］lncRNAs are defined as non-coding RNA of more than 200 nt in length.It is called“junk gene”as the result of no protein-coding potential.With the development of various experimental techniques and the deepening of associated researches，the identity of the junk was corrected.Long non-coding RNAs are emerging as hotspots in the field of functional genomics research after mRNA，microRNA.Recently，with the deepening of research on the ovarian cancer associated with lncRNAs，its mechanism had been understood more clear in gradually which make it possible to become a new marker of ovarian cancer and therapeutic targets in the future，but it will be further explorated to understand clearly.The researches of lncRNAs in ovarian cancer is reviewed in this article，aimed to provide new molecular targets for the study of ovarian cancer invasion and treatment.

［Key words］Ovarian cancer；Long non-coding RNAs；Research progress；Review

卵巢癌是三大婦科惡性腫瘤之一，其發(fā)病部位深藏于盆腔內(nèi)，并且癥狀隱匿，大部分患者在首次確定病情時已進入到了進展期，其臨床致死率最高，發(fā)病率呈逐年遞增之勢，但病因至今不明。卵巢癌的種類繁多，其中就以上皮性卵巢癌為主。目前，對于已確診的卵巢癌患者，臨床上多采用手術(shù)后化療的方式，但因為耐藥現(xiàn)象后期反饋欠佳，總體5年生存率不超過35%［1］。盡管積極給予治療，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率仍居高不下，遠期生存率亦不理想。故而，有關(guān)卵巢腫瘤的發(fā)病分子機制、早期的協(xié)助診斷、確診后治療方案的選定及后期的隨訪監(jiān)測等相關(guān)的一些問題有待被更深入地了解。本綜述歸納了目前為止與卵巢癌相關(guān)的lncRNAs較新研究進展。

長鏈非編碼RNAs（Long non-coding RNAs，lncRNAs）是一類長度大于200 nt，缺少特異完整的開放閱讀框（Open reading frame，ORF）且無蛋白質(zhì)編碼功能的RNA［2］。根據(jù)lncRNA與蛋白編碼基因的位置關(guān)系將lncRNA分為5類:正義lncRNA、反義lncRNA、雙向 lncRNA、基因間 lncRNA和基因內(nèi) lncRNA［3］。lncRNA的調(diào)控機制復(fù)雜多樣，在轉(zhuǎn)錄水平、轉(zhuǎn)錄后調(diào)控、基因組印記、染色質(zhì)的修飾、剪接調(diào)控、細胞周期調(diào)控、表觀遺傳學(xué)調(diào)控中均能發(fā)揮重要作用［4-8］。依據(jù)lncRNA的分子功能可將其分為引導(dǎo)分子、骨架分子、信號分子、誘餌分子4類［9］。本文就近期的lncrnas與卵巢癌的相關(guān)研究及取得的進展做些簡要介紹。

1　H19的表達與卵巢癌的相關(guān)性

H19基因全長2.5 kb，是在胰島素樣生長因子2（insulin-like growth factor 2，IGF2）沉默的母源等位基因中表達的印記基因。IGF2的印跡基因的產(chǎn)物H19是卵巢癌領(lǐng)域最早發(fā)現(xiàn)的lncRNA［10］。IGF2印記基因的變化可引發(fā)H19高表達，變異的IGF2/H19位點在前列腺癌、結(jié)腸腫瘤、卵巢腫瘤等多種腫瘤中均被發(fā)現(xiàn)［11］。Dammann等［12］發(fā)現(xiàn)大部分卵巢癌中差異性甲基化區(qū)域（Differentially-methylated region，DMR）出現(xiàn)顯著低甲基化，CTCF［12］（轉(zhuǎn)錄阻抑物CTCF是CTCF基因編碼的轉(zhuǎn)錄因子，廣泛存在于真核生物中，與絕緣子的活性相關(guān)）結(jié)合位點表現(xiàn)出高甲基化，推測在卵巢癌與這些異常變化可能相關(guān)。并有研究發(fā)現(xiàn)二甲雙胍可通過DNA甲基化來下調(diào)H19的表達，從而抑制腫瘤細胞的遷移浸潤，作用機制與影響H19/let-7軸中l(wèi)et-7（一種抑癌 Micro RNA）介導(dǎo)的促轉(zhuǎn)移效應(yīng)有關(guān)［13］。

2　失活特異轉(zhuǎn)錄物（X inactive specific transcript，XISTX）與卵巢癌的相關(guān)性

X1IST基因位于X失活中心（X inactivation center，XIC），“劑量補償”效應(yīng)使兩性在實際X染色體數(shù)目上維持相同，由X失活中心調(diào)控。Xic辨別X染色體數(shù)目的信息和Xist基因，兩者共同作用保證有且僅有一條染色體有活性。根據(jù)Lyon猜想，異染色質(zhì)即巴氏小體（Barr's body）為失活的X染色體（Inactivated X，Xi）的存在形式。通過對巴氏小體進行染色處理后，即可確認女性體細胞中活性X染色體數(shù)目［14］。2007年Benoit等［15］發(fā)現(xiàn)約50%的卵巢癌細胞株細胞內(nèi)XIST水平很低，伴巴氏小體缺失。提示XIST丟失致使X染色體無法失活，而致使卵巢腫瘤發(fā)生。2002年Huang等［16］研究發(fā)現(xiàn)，卵巢腫瘤細胞中的XIST RNA表達水平可在化療反應(yīng)敏感性方面成為一種評估參考。此外，其可能還與卵巢癌的復(fù)發(fā)有關(guān)。

3　同源異型框基因反義基因間RNA（HOX transcript antisense intergenic RNA）與卵巢癌的相關(guān)性

HOTAIR位于12q13.13，由HOX位點轉(zhuǎn)錄而來，是首個被發(fā)現(xiàn)具有反式轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用的lncRNA，據(jù)Marsh等［17］研究發(fā)現(xiàn)，HOTAIR基因過表達可促進多種器官腫瘤的轉(zhuǎn)移。推測可能是通過上皮細胞間質(zhì)化和基質(zhì)金屬蛋白酶3（Matrixmetallopreteinases，MMP3）、MMP 9的通路來完成的。崔玲等［18］發(fā)現(xiàn) HOTAIR mRNA在低度分化的卵巢癌組織中表達明顯高于中、高分化。據(jù)Qiu等［19］研究顯示，在卵巢癌上皮（Ethernet over cable，EOC）組織中，HOTAIR表達升高，與腫瘤的分期、分型密切相關(guān)，并減少了總生存期和無病生存率，可將HOTAIR作為患者評估前兩者的影響因素。下調(diào)HOTAIR可使順鉑耐藥的A2780cicR細胞敏感性增加，通過調(diào)節(jié)金屬蛋白酶和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)基因而被介導(dǎo)是其作用方式之一，HOTAIR有希望作為對抗順鉑耐藥性分子藥物的研發(fā)突破點之一［18］。

4　LncRNA UCA1與卵巢的相關(guān)性

2015年王帆等［20］實驗發(fā)現(xiàn)在卵巢癌細胞SKOV3中上調(diào)UCA1 RNA的表達，增加細胞的遷移及侵襲能力，而且增加細胞表達MMP2、MMP9蛋白水平。因而認為UCA1 RNA在卵巢癌細胞中發(fā)揮促進侵襲及轉(zhuǎn)移的作用可能是通過上調(diào)MMP2、MMP9表達。此研究可能為阻斷卵巢癌侵襲及轉(zhuǎn)移提供新的研究路線，為研究卵巢癌侵襲與進展提供新的分子靶點。

5　人卵巢癌特殊轉(zhuǎn)錄本2（Human ovarian cancer specific transcript 2，HOST2）與卵巢癌的相關(guān)性

HOST2定位于10q23.1，有研究表明，HOST2和Clorfl86在上皮性卵巢癌中特異性高表達，兩者與miR-1266的競爭性結(jié)合的結(jié)局或在一定程度上導(dǎo)致了上皮性卵巢癌的發(fā)生與進展［21-22］。HOST2調(diào)控下的Clorfl96．JAK2．STAT3信號通路可能是Clorfl86+這一細胞亞群生長得以維持的關(guān)鍵。HOST2和Clorfl86均有潛力作為新的靶標，用于上皮性卵巢癌的靶向干預(yù)治療。

6　LncRNA肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄子1（Matastasis associatedlungadenocarcinomatranscript1，MALAT1）與卵巢癌的相關(guān)性

LncRNA MALAT1長約8000 nt，2003年被Ping等［23］初次報道，在非小細胞肺癌中表達上調(diào)，并與患者的預(yù)后相關(guān)，后又被證明與肝癌、宮頸癌、膀胱癌及膽囊癌等腫瘤的發(fā)生關(guān)系密切［24］。其在卵巢癌中的作用少有研討觸及，據(jù)2014年劉石萍等［25］研究顯示，在體外下調(diào)MALAT1表達能夠抑制卵巢癌細胞的增殖和轉(zhuǎn)移，且下調(diào)MALAT1表達還能夠降低卵巢癌細胞的體內(nèi)增殖，其研究表明MALAT1對卵巢癌有促進作用，具備成為新的卵巢癌治療靶點的潛力。

7　母系表達印記基因3（materally expressed gene3，MEG3）與卵巢癌的相關(guān)性

MEG3位于14q32.2，在包括卵巢細胞在內(nèi)的多種正常細胞中表達，然而在多種腫瘤細胞中其啟動發(fā)生甲基化后導(dǎo)致其本身的表達下調(diào)或缺失，如腎細胞癌、垂體腺瘤、肝細胞癌等［26］。為了檢測上皮性卵巢癌組織中MEG3啟動子CpG島的甲基化狀態(tài)，探討MEG3啟動子的甲基化狀態(tài)與上皮性卵巢癌臨床病理特征的關(guān)系，趙琴等［27］發(fā)現(xiàn)MEG3在上皮性卵巢癌中發(fā)生甲基化改變，MEG3啟動子區(qū)甲基化的發(fā)生率臨床Ⅰ期和Ⅱ期顯著低于Ⅲ期和Ⅳ期，高中分化的低于低分化。得出結(jié)論:上皮性卵巢癌組織中存在著MEG3啟動子的甲基化，提示MEG3啟動子異常甲基化可能與上皮性卵巢癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，并可能與上皮性卵巢癌臨床分期及分化程度有關(guān)。

8　Pvt1與卵巢癌的相關(guān)性

Tseng等［28］將焦點放在了包含MYC基因，且常在癌癥中表達的一個基因組區(qū)域:8q24。研究小組通過小鼠實驗表明MYC與PVT1的協(xié)動關(guān)系。證實PVT1 是MYC蛋白的一個關(guān)鍵調(diào)控因子，這改變了我們理解MYC擴增癌癥的模式。通過將MYC和PVT1解配對，研究人員猜想他們可以阻止癌癥生長，將MYC限制于癌前水平。這將使得PVT1成為潛在控制重要癌基因的一個理想藥物靶點。Tseng等［28］表示現(xiàn)在有兩個主要的方面可供研究:破壞MYC和PVT1之間的關(guān)系是否能夠在所有MYC驅(qū)動的癌癥中，甚至是不由這一特異的遺傳位點驅(qū)動的癌癥中起同樣的作用？PVT1是如何穩(wěn)定或是提高細胞中的MYC的？這一關(guān)系將是開發(fā)藥物靶向這一機制的關(guān)鍵?！?/p>

其他關(guān)于卵巢癌lncRNAs的研究層層推進發(fā)現(xiàn)，越來越多的lncRNAs參與其發(fā)生發(fā)展中，如LSINCT5的過表達［29］，AB073614的過表達［30］，F(xiàn)ALEC的過表達［31］，CDKN2B-AS1［32］的過表達，HOXA11-AS［33］的表達下調(diào)，ZNF300P1［34］的表達下調(diào)等，但進一步的探索仍有待深入，lncRNAs臨床意義也將更加突顯。

9　小結(jié)

全球癌癥領(lǐng)域頂級雜志CA Cancer J Clin 2016年1月25日在線發(fā)表了國家癌癥中心公布的2015年癌癥統(tǒng)計數(shù)據(jù)，顯示中國2015年卵巢癌預(yù)估總數(shù)5.21萬例，死亡數(shù)2.25萬例，針對卵巢癌患者，盡早給予合適治療對病人的預(yù)后及其家庭的影響重大。lncRNAs的發(fā)現(xiàn)是中心法則的新補充。盡管人們逐漸認識到lncRNAs在人類正常生理和病理中的重要作用，但在卵巢癌中，對其相關(guān)lncRNAs的認識還很局限。人們對卵巢癌發(fā)生發(fā)展的機制仍不夠明了，隨著研究技術(shù)的不斷發(fā)展，研究內(nèi)容的不斷深化，我們預(yù)測lncRNAs在未來將會成為卵巢癌的早期診斷、發(fā)生發(fā)展、侵襲以及預(yù)后的重要分子之一。

［1］Mizrahi A，Czerniak A，Levy T，et al.Development of targeted therapy for ovarian cancer mediated by a plasmid expressing diphtheria toxin under the control of H19 regulatory sequences［J］.J Transl Med，2009，7（1）:69.

［2］Sone M，Hayashi T，Tarui H，et al.The mRNA-like noncoding RNA Gomafu constitutes a novel nuclear domain in a subset of neurons［J］.Journal of Cell Science，2007，120 （Pt 15）:2498-2506.

［3］Ponting CP，Oliver PL，Reik W.Evolution and Functions of Long Noncoding RNAs［J］.Cell，2009，136（4）:629-641.

［4］Mercer TR，Dinger ME，Mattick JS.Long non-coding RNAs: insights into functions［J］.Nature Reviews Genetics，2009，10（3）:155-159.

［5］Pandey RR，Kanduri C.Transcriptional and posttranscriptional programming by long noncoding RNAs［J］.Progress in Molecular&Subcellular Biology，2011，51:1-27.

［6］Gong C，Maquat LE.lncRNAstransactivate STAU1-mediated mRNA decay by duplexing with 3'UTRs via Alu elements［J］.Nature，2011，470（7333）:284-288.

［7］Tsai MC，Manor O，Wan Y，et al.Long noncoding RNA as modular scaffold of histone modification complexes［J］. Science，2010，329（5992）:689-693.

［8］Wang K，Chang H.Molecular Mechanisms of Long Noncoding RNAs［J］.Molecular Cell，2011，43（6）:904-914.

［9］Tanos V，Prus D，Ayesh S，et al.Expression of the imprinted H19 oncofetal RNA in epithelial ovarian cancer［J］.European Journal of Obstetrics Gynecology&Reproductive Biology，1999，85（1）:7-11.

［10］宋皓軍，俞秀沖，夏天，等.長鏈非編碼 RNA與腫瘤的關(guān)系及其臨床價值［J］.中國細胞生物學(xué)學(xué)報，2012，34 （7）:704-712.

［11］Filippova GN，F(xiàn)agerlie S，Klenova EM，et al.An exceptionally conserved transcriptional repressor，CTCF，employs different combinations of zinc fingers to bind diverged promoter sequences of avian and mammalian cmyc oncogenes［J］.Mol Cell Biol，1996，16（6）:2802-2818.

［12］DammannRH，KirschS，SchagdarsurenginU，etal.Frequent aberrant methylation of the imprinted IGF2/H19 locus and LINE1 hypomethylation in ovarian carcinoma［J］.International Journal of Oncology，2010，36（1）:171-179.

［13］Yan L，Zhou J，Gao Y，et al.Regulation of tumor cell migration and invasion by the H19/let-7 axis is antagonized by metformin-induced DNA methylation［J］.Oncogene，2014，34（23）:3076-3084.

［14］Weakley SM，Wang H，Yao Q，et al.Expression and function of a large non-coding RNA gene XIST in human cancer［J］.World Journal of Surgery，2011，35（8）:1751-1756.

［15］Benoit MH，Hudson TJ，Maire G，et al.Global analysis of chromosome X gene expression in primary cultures of normal ovarian surface epithelial cells and epithelial ovarian cancer cell lines［J］.International Journal of Oncology，2007，30（1）:5-17.

［16］Huang KC，Rao PH，Lau CC，et al.Relationship of XIST expression and responses of ovarian cancer to chemotherapy［J］.Molecular Cancer Therapeutics，2002，1（10）:769-776.

［17］Marsh DJ，Shah JS，Cole AJ.Histones and their modifications in ovarian cancer-drivers of disease and therapeutic targets［J］.Frontiers in Oncology，2014，4:144.

［18］崔玲，謝曉硯，王和，等.長鏈非編碼 RNA HOTAIR mRNA在卵巢癌中的表達［J］.四川大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版，2013，44（1）:57-59

［19］Qiu JJ，Lin YY，Ye LC，et al.Overexpression of long noncoding RNA HOTAIR predicts poor patient prognosis and promotes tumor metastasis in epithelial ovarian cancer［J］.Gynecologic Oncology，2014，134（1）:121-128.

［20］王帆，周戩平，謝小娟，等.LncRNA UCA1對卵巢癌細胞侵襲及遷移的影響及機制［J］.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2015，23 （1）:1-4.

［21］高原.長鏈非編碼RNA——HOST2在上皮性卵巢癌中的表達及功能機制研究［D］.上海:第二軍醫(yī)大學(xué)，2014.

［22］汪先桃，劉靜.HOST2 lncRNA在上皮性卵巢癌細胞株的表達及意義［J］.臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志，2015，14（15）: 1245-1247.

［23］Ping J，Diederichs S，Wang W，et al.MALAT-1，a novel noncoding RNA，and thymosin beta4 predict metastasis and survival in early-stage non-small cell lung cancer［J］. Oncogene，2003，22（39）:6087-6097.

［24］何丹.長鏈非編碼RNA在腫瘤研究中的進展［J］.國際病理科學(xué)與臨床雜志，2012，32（4）:297-301.

［25］劉石萍.與卵巢癌侵襲相關(guān)的1ncRNA的初步篩選及MALAT1對卵巢癌細胞生物學(xué)行為的影響［D］.北京:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，2014.

［26］Huarte M，Rinn JL.Large non-coding RNAs:missing links in cancer？［J］.Human Molecular Genetics，2010，19（R2）: R152-R161.

［27］趙琴.上皮性卵巢癌MEG3啟動子甲基化狀態(tài)及其臨床意義的研究［D］.廣州:廣州醫(yī)科大學(xué)，2014.

［28］Tseng YY，Moriarity BS，Gong W，et al.PVT1 dependence in cancer with MYC copy-number increase［J］.Nature，2014，512（7512）:82-86.

［29］Silva JM，Boczek NJ，Berres MW，et al.LSINCT5 is over expressed in breast and ovarian cancer and affects cellular proliferation［J］.Rna Biology，2011，8（3）:496-505.

［30］Cheng Z，Guo J，Li C，et al.A long noncoding RNA AB073614 promotes tumorigenesis and predicts poor prognosis in ovarian cancer［J］.Oncotarget，2015，6（28）: 25381-25389.

［31］Hu X，F(xiàn)eng Y，Zhang D，et al.A Functional Genomic Approach Identifies FAL1，as an oncogenic long noncoding RNA that associates with BMI1 and represses p21 expression in cancer［J］.Cancer Cell，2014，53（5）:223-226.

［32］Qiu JJ，Lin YY，Ding JX，et al.Long non-coding RNA ANRIL predicts poor prognosis and promotes invasion/ metastasis in serous ovarian cancer［J］.International Journal of Oncology，2015，46（6）:2497-2505.

［33］Richards EJ，Permuthwey J，Li Y，et al.A functional variant in HOXA11-AS，a novel long non-coding RNA，inhibits the oncogenic phenotype of epithelial ovarian cancer［J］.Oncotarget，2015，6（33）:34745-34757.

［34］Gloss B，Moran-Jones K，Lin V，et al.ZNF300P1，Encodes a lincRNA that regulates cell polarity and is epigenetically silenced in typeⅡ epithelial ovarian cancer［J］. Molecular Cancer，2014，13（1）:1-10. （

Research progress in the relationship between long non-coding RNA and ovarian cancer

YANG Jing1LEI Yuan1XING Hui2
1.Reproductive Medicine Center，Renmin Hospital of Wuhan University，Hubei Province，Wuhan430060，China；2.Department of Obstetrics and Gynecology，Xiangyang Central Hospital，Hubei Province，Xiangyang441021，China

R730

A

1673-7210（2016）08（a）-0028-04

2016-04-22本文編輯:任念）

湖北省衛(wèi)計委西醫(yī)類重點項目（WJ2015MA024）。［作者簡介］楊菁（1958-），女，博士，主任醫(yī)師；研究方向:婦產(chǎn)科學(xué)。雷源（1989-），男，武漢大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院2014級婦產(chǎn)科學(xué)專業(yè)在讀碩士研究生；研究方向:婦科腫瘤，輔助生殖。

邢輝（1969-），女，博士，主任醫(yī)師；研究方向:婦科腫瘤。