鄧戈，賈守寧，李軍茹，馬春花，李生洪

1.河南中醫(yī)藥學(xué)院，河南 開封 475000；2.青海省中醫(yī)院，青海 西寧 810000

紅景天苷對高原紅細(xì)胞增多癥大鼠防治作用的實(shí)驗(yàn)研究

鄧戈1，賈守寧2，李軍茹2，馬春花2，李生洪2

1.河南中醫(yī)藥學(xué)院，河南 開封 475000；2.青海省中醫(yī)院，青海 西寧 810000

目的：觀察紅景天苷對高原紅細(xì)胞增多癥大鼠的防治作用。方法：實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、紅景天苷高、中、低劑量組和陽性藥組，測定紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積，全血黏度、血漿黏度，采用酶聯(lián)免疫法測定一氧化氮（NO）、一氧化氮酶（NOS）、內(nèi)皮素（ET）-1、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）。結(jié)果：模型組大鼠紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（Hb）、血球壓積（HCT）與空白組比較，顯著升高（P＜0.05）。與模型組比較，紅景天苷高、中、低劑量具有降低上述指標(biāo)的作用，尤其是中、高劑量組作用顯著（P＜0.05）。模型組大鼠血漿黏度、全血黏度與空白組比較，顯著升高（P＜0.05）。與模型組比較，紅景天苷高、中、低劑量具有降低全血黏度、血漿黏度的作用，尤其是高劑量作用顯著（P＜0.05）。模型組大鼠NO、NOS與空白組比較顯著降低（P＜0.05），ET-1、VEGF顯著升高（P＜0.05）。與模型組比較，紅景天苷高劑量具有顯著升高NO、NOS，降低VEGF的作用（P＜0.05）；紅景天苷高、中劑量具有顯著降低ET-1的作用（P＜0.05）。結(jié)論：紅景天苷對高原紅細(xì)胞增多癥大鼠有較好的防治作用。

高原紅細(xì)胞增多癥（HAPC）；紅景天苷；防治作用；大鼠

在我國西藏、青海及四川西部等海拔3000 m以上的高原地區(qū)，平原移居者為適應(yīng)外界低氧環(huán)境，其紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血球壓積(HCT)會(huì)出現(xiàn)代償增高。當(dāng)血液出現(xiàn)淤滯、血流阻力增加，即RBC、HGB、HCT代償增高過度，出現(xiàn)頭昏、胸悶、胃腸不適等臨床癥狀時(shí)，就可診斷為高原紅細(xì)胞增多癥(high altitude polycythemia，HAPC)[1]。HAPC是由于機(jī)體持續(xù)高原低氧引發(fā)紅細(xì)胞過度增生的一種慢性高原病，是常駐高海拔地區(qū)常見的慢性高原病之一，也是引發(fā)其他慢性高原病的重要基礎(chǔ)病因。筆者現(xiàn)報(bào)道紅景天苷對HAPC大鼠血液指標(biāo)影響。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)wistar大鼠，雌雄各半，體重(220± 20)g，由蘭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK(甘) 2012-0033。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物 紅景天苷，成都恒基醫(yī)藥科技有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20130412；川芎嗪注射液，上海現(xiàn)代哈森藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20110412。

1.3 主要試劑 大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫檢測試劑盒、內(nèi)皮素(ET)試劑盒(解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免研究所)，一氧化氮(NO)試劑盒、一氧化氮酶(NOS)試劑盒(南京建成生物研究所)。

1.4 主要儀器 UV-210型紫外分光光度儀(日本SHIMADZU公司)、TL05型離心機(jī)(北京大恒建?？泼?、BS2-l型電熱三用水箱(北京醫(yī)療設(shè)備廠)、MVlS-2015全自動(dòng)血流變儀。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法 48只大鼠隨機(jī)分為6組，分別為空白組、模型組、紅景天苷高、中、低劑量組和陽性藥組，每組8只。除空白組外，其余5組按照文獻(xiàn)[4]方法復(fù)制HAPC大鼠疾病模型，并同時(shí)注射相應(yīng)的藥物治療。陽性藥組給予川芎嗪注射液，模型組、空白組注射等體積生理鹽水，40天后，股靜脈取血，測定相關(guān)指標(biāo)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，多組之間比較采用單因素方差分析，組間差異比較用q檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 各組大鼠RBC、Hb、HCT變化比較 見表1 。模型組大鼠RBC、Hb、HCT與空白組比較，顯著升高(P＜0.05)。與模型組比較，紅景天苷高、中、低劑量具有降低上述指標(biāo)的作用，尤其是中、高劑量組作用顯著(P＜0.05)。

表1 各組大鼠RBC、Hb、HCT變化比較()

表1 各組大鼠RBC、Hb、HCT變化比較()

與空白組比較，①P＜0.05，②P＜0.01；與模型組比較，③P＜0.05，④P＜0.01

組別空白組模型組紅景天苷低紅景天苷中紅景天苷高陽性藥組劑量(mg/kg) 10 20 40 50 n888888 RBC(×1012/L) 7.22±0.27 10.26±0.31②9.81±0.30③8.29±0.42④8.12±0.51④8.82±0.49③Hb(g/L) 148.04±11.54 210.07±25.08②202.41±22.47 175.68±18.24④167.28±22.34④172.64±19.75④HCT(%) 48.58±5.17 70.52±7.22②65.37±8.15 61.22±8.54③58.47±7.28④62.22±9.04③

2.2 各組大鼠血液黏度比較 見表2 。模型組大鼠血漿黏度、全血黏度與空白組比較，顯著升高(P＜0.05)。與模型組比較，紅景天苷高、中、低劑量具有降低全血黏度、血漿黏度的作用，尤其是高劑量作用顯著(P＜0.05)。

表2 各組大鼠血液黏度比較()

表2 各組大鼠血液黏度比較()

與空白組比較，①P＜0.05，②P＜0.01；與模型組比較，③P＜0.05，④P＜0.01

組別空白組模型組紅景天苷低紅景天苷中紅景天苷高陽性藥組劑量(mg/kg)全血黏度(mPa·s) 10 20 40 50 n 888888血漿黏度(mPa·s) 1.34±0.51 1.89±0.47①1.71±0.55 1.58±0.62 1.47±0.55③1.49±0.78③高切4.27±0.76 6.07±0.86②5.84±0.72 5.64±0.63 5.04±0.68③5.24±0.39③中切5.37±0.63 7.28±0.72②7.02±0.82 6.42±0.76③6.22±0.77③6.50±0.93低切10.61±1.09 16.84±1.22②14.35±1.37④14.03±1.55④12.84±1.54④13.75±1.39④

2.3 各組大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管活性物質(zhì)變化比較 見表3 。模型組大鼠NO、NOS與空白組比較顯著降低(P＜0.05)，ET-1、VEGF顯著升高(P＜0.05)。與模型組比較，紅景天苷高劑量具有顯著升高NO、NOS，降低VEGF的作用(P＜0.05)；紅景天苷高、中劑量具有顯著降低ET-1的作用(P＜0.05)。

表3 各組大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管活性物質(zhì)變化比較()

表3 各組大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管活性物質(zhì)變化比較()

與空白組比較，①P＜0.05，②P＜0.01；與模型組比較，③P＜0.05，④P＜0.01

組別 劑量(mg/kg)ET-1(ng/L)V EGF(pg/mL)空白組模型組紅景天苷低紅景天苷中紅景天苷高陽性藥組10 20 40 50 n 888888 NO (μmol/L) 80.24±17.33 54.36±8.94②59.27±8.90 61.64±8.74 69.47±7.94④64.69±8.47③NOS (×103U/L) 17.82±3.86 10.36±7.03①13.68±8.34 14.06±8.69 16.07±7.15③15.39±6.97③62.38±8.95 95.67±9.18②88.64±10.12 84.36±9.64③81.39±8.56④85.61±9.07③121.32±12.36 152.36±15.27②146.38±17.30 140.24±14.60 134.27±11.92③143.61±11.93

3 討論

紅景天(Rhodiola)是景天科(Crassulaceae)紅景天屬多年生草本或亞灌木植物，多生長在海拔較高的山坡林下或灌木叢林，因生長環(huán)境較為惡劣，紅景天具有很強(qiáng)的生命力和適應(yīng)性。早在《四部醫(yī)典》就記載到了紅景天的藥理作用，隨著科研技術(shù)的不斷發(fā)展和提高，紅景天中的主要成分也逐漸被確認(rèn)，目前已明確的成分包括紅景天苷、酪醇等，其中研究最多的就屬紅景天苷，近些年研究證實(shí)，紅景天苷對腎臟、心血管等器官及系統(tǒng)具有保護(hù)作用[2]。紅景天苷還可降低全血黏度，其通過降低紅細(xì)胞剛性和聚集性指數(shù)而使HCT和纖維蛋白原減少，對血小板聚集率起到明顯的抑制作用[3]。紅景天苷具有抗缺氧、抗疲勞、抗衰老和保護(hù)心血管的作用[2～3]。研究發(fā)現(xiàn)，HAPC患者紅細(xì)胞異常增多，血液黏稠度增大，血管內(nèi)皮系統(tǒng)受到很大的損傷[5]。本實(shí)驗(yàn)表明，紅景天苷通過降低HAPC大鼠RBC、Hb、HCT，降低全血黏度、血漿黏度，使異常的血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管活性物質(zhì)趨于正常，從而起到改善微循環(huán)，增加血液與組織的物質(zhì)交換，提高機(jī)體對氧的利用率，對HAPC的治療發(fā)揮作用。

有文獻(xiàn)報(bào)道，HAPC患者血漿ET含量顯著高于同海拔健康組，而NO含量則顯著降低，說明HAPC患者存在明顯的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷并導(dǎo)致內(nèi)皮功能紊亂[5]。ET與NO是由血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌的具有相互拮抗作用的血管活性物質(zhì)[6]。ET是較強(qiáng)的血管收縮因子，NO是較強(qiáng)的血管舒張因子，二者在血管張力調(diào)節(jié)方面起重要作用。NO由內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生并持續(xù)釋放，由細(xì)胞內(nèi)左旋精氨酸和分子氧在NOS催化下生成的，具有擴(kuò)張血管平滑肌的作用，而廣泛分布于腦組織中的NOS受到一氧化氮的負(fù)反饋調(diào)節(jié)，是維持腦血管張力的重要因子。研究證實(shí)HAPC患者的VEGF高于健康對照組，VEGF的表達(dá)與細(xì)胞周圍組織的氧含量密切相關(guān)，正常情況下表達(dá)極低，以維持正常的血管滲透性和血管密度，在低氧時(shí)VEGF明顯表達(dá)并升高[7]。低壓缺氧時(shí)VEGF的濃度升高，從其功能上分析，有正、負(fù)兩個(gè)方面的效應(yīng)，既增加血管通透性，蛋白的滲出作為營養(yǎng)和基質(zhì)，為血管增生及新血管形成提供了基礎(chǔ)；新血管生成與血管密度增加，有利于組織供氧，對適應(yīng)高原缺氧有重要作用。在HAPC死亡者的病理檢查中發(fā)現(xiàn)，毛細(xì)血管密度增加，節(jié)段性內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，胞核突向管腔，空泡形成，使血管受壓，管腔變窄，細(xì)動(dòng)脈及小動(dòng)脈中層平滑肌增生，中層肌化增厚。這種小血管改變主要在肺、腦、心重要器官多見。血管密度增加、血管肌化與肺動(dòng)脈高壓的形成提示與VEGF的作用是一致的，HAPC的小血管病變、肺動(dòng)脈高壓、血黏度增加引起右心室肥厚、右心室或全心功能不全甚至心衰，腦血栓形成或腦溢血等負(fù)面效應(yīng)。

在HAPC治療中，設(shè)法降低ET水平，提高NO水平及其活性，恢復(fù)ET與NO之間的平衡，對于提高HAPC的治療效果及預(yù)防并發(fā)癥發(fā)生具有積極的作用[5]。本研究結(jié)果顯示，紅景天苷具有降低HAPC大鼠RBC、Hb、HCT的作用，降低全血黏度、血漿黏度，調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管活性物質(zhì)的含量，通過降低異常升高的ET、VEGF，升高異常低下的NO、NOS，達(dá)到恢復(fù)內(nèi)皮細(xì)胞和血管活性物質(zhì)的動(dòng)態(tài)平衡，從而在HAPC治療中發(fā)揮積極作用。

[1]于前進(jìn)，孔佩艷.與高原紅細(xì)胞增多癥有關(guān)的血清炎癥因子的研究進(jìn)展[J].西南國防醫(yī)藥，2014，24(9)：2026-2027.

[2]張雪松，李英.紅景天苷現(xiàn)代藥理作用概述[J].中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2014，15(3)：262.

[3]彭麗華.紅景天苷治療心腦血管疾病相關(guān)藥理作用的新進(jìn)展[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2013，32(28)：101.

[4]姜平，賈守寧.高原紅細(xì)胞增多癥大鼠疾病模型的復(fù)制[J].高原醫(yī)學(xué)雜志，1996，6(2)：19-22.

[5]郜中平，陳光浩，肖青林，等.高原紅細(xì)胞增多癥患者血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的研究[J].武警醫(yī)學(xué)，2005，16(4)：278.

[6]王旭紅，寧英遠(yuǎn).內(nèi)皮素、一氧化氮與糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系[J].醫(yī)學(xué)綜述，2000，6(4)：145-146.

[7]王洪斌，李素芝，姚文新，等.高原紅細(xì)胞增多癥的VEGF變化研究[J].西南國防醫(yī)藥，2006，16(2)：167-169.

（責(zé)任編輯：駱歡歡）

Experimental Study of Preventive Effect of Salidroside on Mice with High Altitude Polycythemia

DENG Ge，JIA Shouning，LI Junru，MA Chunhua，LI Shenghong

Objective：To observe the preventive effect of salidroside on mice with high altitude polycythemia.Methods：The experimental mice were divided into blank group，model group，high，mid and low dose group of salidroside，positive drug group.Mesured red blood count，hemoglobin content，hematocrit，whole blood viscosity and plasma viscosity，and detected NO，nitric oxide synthase(NOS)，endothelin(ET)-1，vascular endothelial growth factor(VEGF)by the method of enzyme-linkedimmunoassay.Results：Comparing with blank group，Red Blood Cell(RBC)，hemoglobin(Hb)and hematocrit(HCT)of mice in model group were all increased significantly(P＜0.05).Comparing with model group，above indexes of high，mid and low dose group of salidroside were decreased，especially，those improvement of mid and low dose group being significant(P＜0.05). Comparing with blank group，plasma viscosity and whole blood viscosity of mice in modelgroup were increased significantly(P＜0.05).Comparing with model group，whole blood viscosity and plasma viscosity of high，mid and low dose group of salidroside were decreased，especially，those improvement of high dose group being significant(P＜0.05).Comparing with blank group，NO and NOS of mice in model group were all decreased significantly(P＜0.05)，ET-1 and VEGF were increased significantly(P＜0.05).Comparing with model group，high dose of salidroside had effect on increasing NO and NOS and decreasing VEGF significantly(P＜0.05)；high and mid dose of salidroside had effect on decreasing ET-1(P＜0.05).Conslusion：Salidroside has good preventive effect on mice with high altitude polycythemia.

High altitude polycythemia(HAPC)；Salidroside；Preventive effect；Mice

R285.5

A

0256-7415（2016）05-0304-03

10.13457/j.cnki.jncm.2016.05.113

2015-11-23

青海省科學(xué)技術(shù)廳應(yīng)用基礎(chǔ)研究項(xiàng)目（2012-Z-734）

鄧戈（1967-），女，高級(jí)講師，主要從事中藥教學(xué)和研究工作。