王立梅,孫玉珠,王　丹

(哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司，哈爾濱 150069)

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豬丹毒的人工主動免疫

王立梅,孫玉珠,王丹

(哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司，哈爾濱 150069)

豬丹毒是豬丹毒桿菌引起的一種急性熱性傳染病，其主要特征為高熱、急性敗血癥、皮膚疹塊(亞急性)、慢性疣狀心內(nèi)膜炎及皮膚壞死與多發(fā)性非化膿性關(guān)節(jié)炎(慢性)。目前集約化養(yǎng)豬場比較少見，但仍未完全控制。本病自有研究機(jī)構(gòu)研究了利用毒力減弱的丹毒桿菌制造菌苗，進(jìn)行抗豬丹毒的免疫以后，各國學(xué)者提出了很多方法，歸納起來，可以分為以下三類：弱毒活菌苗免疫、免疫血清和強(qiáng)毒活菌共同注射免疫、滅活菌苗免疫。本文對其進(jìn)行了詳細(xì)的介紹。

豬丹毒；菌苗；培育；免疫

1　弱毒活菌苗免疫

我國在弱毒菌苗方面的研究：①GC42弱毒菌種：哈爾濱獸醫(yī)研究所培育成功可供注射及口服免疫的GC42弱毒菌種是用該所培育的G370(豚鼠系)通過雛雞繼代育成的。僅取其42代(簡稱GC42)，作為制苗的菌種，有較好的安全性與免疫原性。以大劑量的活菌500億皮下接種或口服，試驗豬沒有任何臨床癥狀；以1000萬個活菌皮下接種小鼠或豬，攻毒后的平均保護(hù)率為90%以上。本菌種連續(xù)在豬體通過5代，毒力仍然不變，有較好的穩(wěn)定性。免疫持續(xù)期按規(guī)程確定為6個月。本菌種也可作為口服，是一株安全穩(wěn)定及免疫原性較好的弱毒菌種，從1976年開始在我國各獸醫(yī)生物藥品廠生產(chǎn)，并推廣應(yīng)用。②GC42弱毒菌種：是江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院與南京藥械廠協(xié)作培育而成。其基礎(chǔ)菌株是哈爾濱獸醫(yī)研究所的G370，通過含有0.01%錐黃素鮮血瓊脂斜面繼續(xù)傳40代，經(jīng)過菌落的選擇，再通過0.04%錐黃素鮮血瓊脂斜面繼續(xù)傳10代后，以10億活菌皮下接種小鼠，平均存活率為93.5%；500億活菌皮下接種豬，沒有任何臨診的不良反應(yīng)。100萬活菌皮下接種小鼠或豬，攻毒后的保護(hù)率為100%。6個月的免疫持續(xù)期保護(hù)率為96.34%。本菌種連續(xù)通過豬體5代，在鮮血瓊脂斜面上繼續(xù)傳50代，其安全性與免疫原性沒有發(fā)生變化，本菌種稱為G4T(10)，也是一株毒力穩(wěn)定、安全性與免疫原性較好的豬丹毒弱毒菌種。此外，獸醫(yī)藥品檢查所培育的T60-10弱毒菌種，安全性與免疫原性較好，也是一株較有希望的弱毒菌種。③豬的三聯(lián)苗與二聯(lián)苗：1974-1977年，由獸醫(yī)藥品檢查所、哈爾濱獸醫(yī)研究所、江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)和南京、鄭州、成都、蘭州等獸醫(yī)生物藥品廠7個單位協(xié)作研究，以豬丹毒GC42菌種，豬肺疫EO630菌種與豬瘟免化毒按一定的工藝制造三聯(lián)苗(或二聯(lián)苗)，對豬皮下或肌肉注射1mL，即可預(yù)防豬的三大烈性傳染病，頗受基層防疫人員和群眾的歡迎。

江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院與南京藥械廠協(xié)作以豬丹毒弱毒菌種G4T(10)Z制成聯(lián)苗，并已經(jīng)過大規(guī)模的區(qū)域試驗，在各地農(nóng)村使用，獲得較好的防疫效果。

巴斯德一杜伊埃氏弱毒菌苗，連續(xù)通過兔體后，對兔的毒力逐漸增強(qiáng)，但對豬的毒力逐漸減弱；于是，從一系列的對豬具有不同毒力的菌株中，選擇了二株用以制造菌苗，其中之一毒力較弱的稱為第一號菌苗，注射豬后不引起嚴(yán)重反應(yīng)，但可以使豬獲得一定免疫力，以抵抗毒力較強(qiáng)的第二號菌苗的注射。第一號及第二號菌苗的使用劑量均為1/8mL,皮下注射，二次注射的間隔時間為12天，免疫期可達(dá)1年以上，但也有的報告僅為3～5個月的。這種菌苗雖然證實有效，也曾被很多國家采用，但各地使用的結(jié)果并不相同，對于感受性較大的豬種，往往引起嚴(yán)重反應(yīng)和死亡，死亡率有時高達(dá)5%～10%，近年來也逐漸被其他較好的菌苗所代替。

近藤正-杉村克治氏弱毒菌苗，近藤等將豬丹毒桿菌接種于含錐黃素的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)多次移植傳代獲得毒力減弱的菌株，注射小鼠亦不死亡，但仍具有免疫原性，逐用以制造菌苗。這種菌苗在日本使用的結(jié)果，認(rèn)為效力良好，并曾被其他國家采用。菌苗的使用劑量為2～5mL，免疫期約半年，但也有免疫2～3個月仍感染豬丹毒的。

2　血清和強(qiáng)毒活菌共同注射免疫

抗豬丹毒血清和豬丹毒強(qiáng)毒菌液共同注射的免疫方法是國外學(xué)者提出的；系利用豬丹毒免疫血清所產(chǎn)生的被動免疫力以防止強(qiáng)毒菌的危害，同時又利用強(qiáng)毒菌刺激機(jī)體使其產(chǎn)生主動免疫力，以彌補(bǔ)被動免疫期短的缺點。

3　滅活菌苗免疫

很多學(xué)者曾試圖制造一種死菌苗(或稱滅活菌苗)進(jìn)行對豬丹毒的免疫。由獸醫(yī)藥品監(jiān)察所、華東農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所和南京、成都、鄭州等3個獸醫(yī)生物藥品廠共5個單位曾集體研究，用多種培養(yǎng)基和不同方法所制菌苗的效力檢定結(jié)果表明，以肉肝胃酶消化湯不加血清的培養(yǎng)基也可制出效力良好的氫氧化鋁菌苗，對小鼠、鴿及豬均屬安全有效。此菌苗于1956年開始投產(chǎn)，在全國范圍內(nèi)推廣應(yīng)用。

另外，獸醫(yī)藥品監(jiān)察所與成都獸醫(yī)生物藥品廠制成的豬丹毒半固體菌苗有良好的效力。后又仿Trau法制成的豬丹毒吸附菌苗，接種劑量5mL，免疫持續(xù)可達(dá)6個月。

有人用加有0.25%瓊脂的肉湯培養(yǎng)物，并以0.3%的福爾馬林殺菌48h制成的半圓體菌苗，對鴿及豬有相當(dāng)好的免疫效果；這種菌苗曾在蘇聯(lián)大量的使用。還有用含10%馬血清的肉湯培養(yǎng)豬丹毒桿菌，加氫氧化鋁吸附后沉淀，吸棄上清液使之濃縮為1/4，豬丹毒桿菌用稀堿溶液處理，加0.1%皂角苷及0.002%硫柳汞制成的菌苗，有良好的免疫效力。

2015-12-23

王立梅(1986-),女,大專,助理獸醫(yī)師。

S858.28

B文章編號：2095-9737(2016)04-0184-01