劉 磊,孔德光
(1.山東省濰坊市峽山區(qū)王家莊街道獸醫(yī)站,山東 濰坊 262115;
2.山東省安丘市畜牧局,山東 安丘 262100)
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豬痢疾的癥狀與實(shí)驗(yàn)室診斷及防治
劉磊1,孔德光2
(1.山東省濰坊市峽山區(qū)王家莊街道獸醫(yī)站,山東 濰坊 262115;
2.山東省安丘市畜牧局,山東 安丘 262100)
摘要:豬痢疾是由豬痢疾密螺旋體引起豬的一種以血痢為主的腸道傳染病。主要特征為大腸黏膜發(fā)生嚴(yán)重的黏液性、出血性和壞死性炎癥。在自然條件下僅豬發(fā)生,尤以2~4月齡的斷奶仔豬最易感染,其他畜禽未見感染發(fā)病。主要通過消化道感染和傳播,本病尚無疫苗應(yīng)用,以預(yù)防為主。發(fā)病時(shí),應(yīng)用抗生素治療。
關(guān)鍵詞:豬;痢疾;診斷;防治
1臨床癥狀
最急性病豬無明顯癥狀而突然死亡,是豬群開始暴發(fā)本病的預(yù)兆。最急性病豬往往突然死亡,急性病程1~2天,慢性病豬病程1~2周[1]。急性病豬精神差,食欲減退,糞便較硬且表面附有條狀黏液,隨后體溫升高至40.5~41.0℃左右,糞稀如水樣,嚴(yán)重者糞內(nèi)充滿黏液和血液,有的混有膿液或脫落的黏膜碎片,病畜渴欲增加,糞便惡臭,腹部凹陷,起立無力,逐漸消瘦,最后極度衰弱而死。慢性病例病情較輕,下痢,糞中黏液及壞死組織碎片較多,血液較少,病期較長。
2實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)
2.1病原學(xué)檢查
直接鏡檢:取新鮮糞便(含黏液)或直腸拭子,或刮取病變的結(jié)腸黏膜直接抹片,干燥,火焰固定,用結(jié)晶紫或稀釋堿性復(fù)紅染色3~5min,水洗,吸干。鏡檢時(shí)每份樣品應(yīng)制作2張,油鏡觀察每片最少10個(gè)視野。豬痢疾密螺旋體的菌體長度為6~8μm,呈2~5個(gè)疏螺旋狀,兩端尖銳。當(dāng)多數(shù)視野中至少出現(xiàn)3~5個(gè)類似上述的菌體,可判為假定病豬。
組織切片鏡檢:按常規(guī)將病變大腸制成石蠟切片,用結(jié)晶紫或姬姆薩染色鏡檢。若在黏膜表面特別是在腺窩處見到聚集不同數(shù)量的類似豬痢疾密螺旋體菌體,多時(shí)密集如網(wǎng)狀,可作初步判斷。
分離培養(yǎng)和鑒定:①材料準(zhǔn)備:采取新鮮糞便、大腸內(nèi)容物或大腸病變黏膜,不要冰凍,立即分離培養(yǎng)。糞便、直腸拭子可置于0.5mL(0.01mol/L、pH值7.2)的磷酸鹽緩沖液中,密封后0~4℃保存,3天內(nèi)處理完畢。兩端結(jié)扎的結(jié)腸段,0~4℃可保存5~7天。分離培養(yǎng)基(胰胨大豆血液瓊脂)的配制:胰胨15g,植物蛋白胨5g,氯化鈉5g,瓊脂15g,蒸餾水1000mL,pH值7.3左右。使用前加入鹽酸壯觀霉素400μg/mL和5%脫纖馬血或牛血。②操作方法:將病料進(jìn)行直接劃線接種于培養(yǎng)基,置厭氧培養(yǎng)器內(nèi)42℃加以培養(yǎng),每隔4~6天檢查1次,共檢查2~4次。病原性豬痢疾密螺旋體呈完全溶血(強(qiáng)β溶血)。溶血區(qū)呈條狀或一端稍尖的橢圓形斑點(diǎn)(與其他細(xì)菌在菌落周圍形成圓形溶血區(qū)有明顯不同),一般不見菌落。當(dāng)培養(yǎng)條件適宜時(shí),可見到云霧狀菌苔。經(jīng)鏡檢發(fā)現(xiàn)豬痢疾密螺旋體典型形態(tài)時(shí),可在無雜菌的溶血區(qū)挑取一小塊瓊脂,劃線接種于新培養(yǎng)基上,37℃培養(yǎng),每隔2天移植1次,一般移植2~4次即可獲得純培養(yǎng)。③致病性測定:致病性測定需用10代以內(nèi)的菌種,10代以上的菌種毒力逐漸減弱。將血液瓊脂平皿上的菌體用生理鹽水沖洗,低速離心去瓊脂。取2周齡小豬2頭,保持饑餓48h。全身麻醉后手術(shù)使結(jié)腸暴露,先注入200~400mL滅菌生理鹽水,用于將腸內(nèi)容物向后推移。每隔5~10cm將腸作一道雙重結(jié)扎,一般可結(jié)扎6~10個(gè)腸段,每段間隔2cm,不要損傷血管。每個(gè)腸段注入5mL菌液(含5億個(gè)菌),另留一腸段注入5mL生理鹽水作為對照。另一頭實(shí)驗(yàn)豬也接種相同的菌株和菌量,但腸段接種的內(nèi)容物前后順序與第一頭相反??p合腹腔,禁食,經(jīng)48~72h剖檢。如接種腸段滲出液增多(3~7mL),內(nèi)含黏膜、纖維素或血液,黏膜腫脹、充(出)血,抹片鏡檢有大量的密螺旋體菌,則判為致病菌株。1頭豬可同時(shí)測定5~9個(gè)菌株。
2.2微量凝集試驗(yàn)
試驗(yàn)方法。材料準(zhǔn)備:V型孔微量板、微量加樣器、磷酸鹽緩沖液(pH值7.2)、兔血清等??乖芍付▎挝还?yīng)。試驗(yàn)方法:先將被檢血清用含有1%兔血清的磷酸鹽緩沖液作10倍稀釋,于56℃滅能30min。然后在微量板上每排第一、二孔每孔加入10倍稀釋被檢血清50μL,第二至六孔每孔加入磷酸鹽緩沖液液50μL。從第二孔開始血清作倍比稀釋至第五孔(稀釋倍數(shù)為160倍),最后棄去50μL混合液。每孔加50μL抗原。第六孔為抗原對照。設(shè)陰、陽性血清對照。輕微振蕩后,置38℃中,經(jīng)18~24h后觀察結(jié)果。
結(jié)果判定:根據(jù)反應(yīng)板底部凝集(呈盾狀)或不凝集(呈圓點(diǎn)狀)判定凝集滴度。血清效價(jià)判定,以引起50%菌體凝集的血清最高稀釋度表示。
3防治措施
預(yù)防本病目前尚無推廣應(yīng)用的疫苗。若豬群一旦發(fā)生本病,如數(shù)量較少時(shí),除采取嚴(yán)格消毒處理糞便外,可根據(jù)情況急宰或淘汰病豬。病豬糞便污染的場地、周圍環(huán)境、圈舍等,可用1%氫氧化鈉或2%來蘇爾消毒。如發(fā)病較多時(shí),可用抗生素藥物進(jìn)行治療,如對發(fā)病豬群全群投服痢菌凈,按0.5~1.0mg/kg飼料比例拌料喂服,連用10天[2]。病豬和同群豬內(nèi)臟作工業(yè)用或銷毀,肉尸經(jīng)高溫處理后出場,豬皮消毒后利用,脂肪煉制后可食用。
參考文獻(xiàn):
[1] 孟凡祥.豬痢疾的診治[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2010(15),367-368.
[2] 李勇生.豬痢疾的診斷與防治[J].畜牧獸醫(yī)雜志,2008(5),107.
文章編號:2095-9737(2016)01-101-01
中圖分類號:S858.28
文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B
作者簡介:劉磊(1977-)男,山東安丘人,大專,助理獸醫(yī)師。
收稿日期:2015-09-28