苦參對抗甲狀腺藥物致Graves病患者白細胞減少的影響

湯建雷，周彥，高云明

(連云港市第二人民醫(yī)院內(nèi)分泌科1、檢驗科2，江蘇 連云港 222000)

苦參對抗甲狀腺藥物致Graves病患者白細胞減少的影響

湯建雷1，周彥2，高云明1

(連云港市第二人民醫(yī)院內(nèi)分泌科1、檢驗科2，江蘇 連云港 222000)

目的 針對Graves病(GD)經(jīng)抗甲狀腺藥物(ATD)治療后出現(xiàn)白細胞減少患者，通過苦參治療后觀察療效，并初步探討其可能的作用機制。方法隨機選取2014年1月至2015年10月我科收治的ATD致白細胞減少的GD患者共計30例作為研究對象，檢測記錄患者外周血白細胞(WBC)、粒細胞(NE)數(shù)量，及血清白細胞介素-1 (IL-1)、白細胞介素-6(IL-6)含量，隨后患者在繼續(xù)ATD治療同時聯(lián)合苦參應用，10 d后再次檢測外周血WBC、NE數(shù)量及血清中IL-1、IL-6含量。結(jié)果GD患者ATD治療后外周血WBC、NE數(shù)量、血清IL-1、IL-6含量分別為(3.45±0.25)×109/L、(1.72±0.21)×109/L、(0.29±0.06)ng/mL、(1.40±0.14)ng/mL，聯(lián)合苦參治療后患者外周血WBC、NE數(shù)量、血清IL-1、IL-6含量分別為(4.31±0.38)×109/L、(2.34±0.28)×109/L、(0.40±0.07)ng/mL、(1.67±0.08)ng/mL，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05或0.01)。血清IL-1、IL-6水平與外周血WBC、NE數(shù)量呈直線正相關(guān)(r=0.595，0.456；0.473，0.467，P＜0.05或0.01)。結(jié)論苦參對ATD致GD白細胞減少患者的治療能明顯提升其WBC和NE數(shù)量，究其原因可能是通過促進體內(nèi)免疫細胞因子IL-1、IL-6的表達進而刺激患者骨髓造血從而達到治療效果。

苦參；白細胞減少；Graves?。豢辜谞钕偎幬?；細胞因子

甲狀腺功能亢進癥簡稱甲亢，是甲狀腺體本身產(chǎn)生甲狀腺激素過多引起的甲狀腺毒癥，表現(xiàn)為神經(jīng)、消化、循環(huán)等系統(tǒng)興奮增高和代謝亢進，以Graves病(GD)多見，臨床出現(xiàn)多種并發(fā)癥和合并癥，其中又以白細胞(WBC)減少較常見，分為初治即白細胞減少和抗甲狀腺藥物(ATD)應用后出現(xiàn)白細胞減少兩類，ATD常用包括甲巰咪唑(MMI)和丙硫氧嘧啶(PTU)，臨床上針對GD合并白細胞減少患者傳統(tǒng)多采用利可君、維生素B4、醋酸潑尼松、粒細胞刺激因子等藥物[1-3]，而苦參作為傳統(tǒng)中成藥物既往多用于護肝、抗腫瘤方面，在甲亢合并白細胞減少患者治療中鮮有報道。本實驗旨在通過對聯(lián)合苦參治療前后患者白細胞、粒細胞(NE)及體內(nèi)相關(guān)細胞因子的變化入手，為該類患者治療方法上尋求新的途徑，并為其產(chǎn)生的可能作用機制提供初步探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取連云港市第二人民醫(yī)院內(nèi)分泌科2014年1月至2015年10月期間收治的ATD致GD白細胞減少患者30例，所有GD患者的診斷均符合人民衛(wèi)生出版社第八版內(nèi)科學診斷標準，患者年齡18～54歲，平均(36.7±16.4)歲，男性6例，女性24例，既往體健，排除感染、慢性肝病、血液病、風濕結(jié)締組織病、接觸致白細胞減少藥物等病史，研究過程中除1例有輕微皮膚瘙癢，其余均無不適反應發(fā)生，入選前均與患者充分溝通并取得患者和家屬的積極配合。

1.2 治療方法 上述收治的患者檢查肝功能均正常，根據(jù)患者甲功不需要調(diào)整ATD治療劑量，而后繼續(xù)ATD原劑量治療，同時聯(lián)合苦參氯化鈉注射液(丹盛，含苦參素0.6 g與氯化鈉0.9 g，主要成份為氧化苦參堿，丹東聯(lián)盛制藥有限公司)100 mL×1瓶，每日一次，共計10 d。

1.3 標本采集及處理方法 將上述入組患者于清晨8時空腹安靜狀態(tài)抽取外周靜脈血10 mL，其中5 mL利用流式細胞檢測技術(shù)測定患者外周血白細胞(WBC)和粒細胞(NE)數(shù)量，另外5 mL抗凝后1 500 r/min低溫離心5 min，分離血清無菌分裝，置于-20℃保存，通過放射免疫法測定血清白細胞介素-1(IL-1)、白細胞介素-6(IL-6)含量，然后聯(lián)合苦參氯化鈉注射液治療10 d后再次按上述步驟檢測患者外周血WBC、NE數(shù)量及血清IL-1、IL-6含量。主要儀器設(shè)備與試劑盒包括：外周血WBC和NE采用日本SYSMEX公司生產(chǎn)的XT-4000i型號血細胞分析儀。IL-1、IL-6測定試劑盒由上海超研生物科技有限公司提供，測量儀器選用由上海五九自動化設(shè)備有限公司生產(chǎn)的GC-1200型智能放免γ計數(shù)器。IL-1：批內(nèi)批間變異系數(shù)＜8%、＜15%；IL-6：批內(nèi)批間變異系數(shù)＜6%、＜10%，嚴格按說明書步驟進行操作。

1.4 實驗室檢查 Graves病：高代謝癥候群，彩超提示甲狀腺彌漫腫大，甲狀腺功能提示三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)升高，促甲狀腺激素(TSH)下降，促甲狀腺激素受體抗體(TR-Ab)陽性。外周血白細胞＜4.0×109/L[參考值范圍：(4.0～10.0)×109/L]為白細胞減少癥、粒細胞＜2.0×109/L[參考值范圍：(2.0～7.0)× 109/L]為粒細胞減少癥。

1.5 統(tǒng)計學方法 應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料均以均數(shù)±標準差(±s)表示，兩組均數(shù)間比較采用Paired-Samples t檢驗，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 患者經(jīng)聯(lián)合苦參治療前后的血WBC、NE、IL-1、IL-6水平比較 ATD致GD白細胞減少患者，經(jīng)聯(lián)合苦參治療后患者外周血WBC、NE數(shù)量及血清IL-1、IL-6含量增加，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05或0.01)，見表1。

表1 30例患者聯(lián)合苦參治療前后的血WBC、NE、IL-1、IL-6水平比較(±s)

表1 30例患者聯(lián)合苦參治療前后的血WBC、NE、IL-1、IL-6水平比較(±s)

分類WBC (×109/L) NE (×109/L) IL-1 (ng/mL) IL-6 (ng/mL) ATD治療后ATD+苦參治療后t值P值3.45±0.25 4.31±0.38 1.31 0.015 1.72±0.21 2.34±0.28 1.26 0.021 0.29±0.06 0.40±0.07 1.69 0.001 1.40±0.14 1.67±0.08 2.20 0.001

2.2 經(jīng)苦參治療后患者的血清IL-1、IL-6含量與外周血WBC、NE數(shù)量的相關(guān)性 本研究表明，隨著IL-1、IL-6水平升高，外周血WBC、NE數(shù)量亦升高，呈直線正相關(guān)(P＜0.05或0.01)。其中IL-1水平與WBC、NE數(shù)量相關(guān)性為r=0.595、0.456，P=0.010、0.011；IL-6水平與WBC、NE數(shù)量相關(guān)性為r=0.473、0.467，P= 0.008、0.009。

3 討 論

甲狀腺功能亢進癥是血液循環(huán)系統(tǒng)中甲狀腺激素過多導致的以神經(jīng)、循環(huán)、消化等系統(tǒng)興奮性增高及代謝亢進為主要表現(xiàn)的臨床綜合征，其中GD約占85%，治療分為ATD、131I和手術(shù)。目前國內(nèi)對GD的治療仍以ATD居多，而該類藥物本身有可能引起患者白細胞減少。本實驗收集的病史資料也表明GD經(jīng)ATD治療后部分患者外周血白細胞和粒細胞數(shù)量出現(xiàn)不同程度下降，與文獻報道一致[4]，究其下降原因有報道可能與患者免疫功能紊亂、抗中性粒細胞特異性Fcr受體Ⅲb抗體、HLA基因多態(tài)性等因素有關(guān)[5-7]。國內(nèi)高云明等[8]研究發(fā)現(xiàn)甲亢經(jīng)ATD治療后存在粒細胞由循環(huán)池向邊緣池聚集現(xiàn)象，為白細胞減少原因提供新的解釋。

GD為自身免疫性疾病，在其發(fā)病過程中多種免疫細胞因子參與，與疾病的發(fā)展轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)[9]。研究表明，白細胞介素(IL)作為一類免疫細胞因子，參與機體的多種生理及病理反應，其中IL-1能使骨髓細胞庫的中性粒細胞釋放到血液，并使之活化，同時與集落刺激因子(CSF)協(xié)同可促進骨髓造血祖細胞增殖能力，使之形成巨大的集落；還可誘導骨髓基質(zhì)細胞產(chǎn)生多種CSF并表達相應受體，從而促使造血細胞定向分化，而IL-6亦具有類似促進骨髓造血功能。Rodriguez等[10]研究表明體內(nèi)IL-6不足對骨髓前體細胞的增殖和粒細胞集落刺激因子的發(fā)育產(chǎn)生重要影響，能導致造血功能的紊亂，這也解釋了GD治療后白細胞減少可能和體內(nèi)細胞因子紊亂有關(guān)。

苦參主要成分為氧化苦參堿，因其具有抗病毒、抗肝纖維化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤等多種藥理功效，臨床既往多應用于肝功能損傷、腫瘤放化療期間[11-14]，也有學者將其用于皮膚病治療[15]。艾立清等[16]發(fā)現(xiàn)苦參對腫瘤患者化療后引起的白細胞減少具有明顯提升作用，目前作用機制尚不明確。有研究表明可能是通過促進骨髓中白細胞釋放及刺激粒巨噬細胞集落形成(CFU-GM)的增殖、分化達到升白細胞和粒細胞作用[17]，國內(nèi)外學者也從動物實驗證明氧化苦參堿能刺激小鼠和家兔骨髓粒系造血功能，并使CFU-GM明顯增加，從而對動物的白細胞減少具有提升所用[18-19]。本實驗研究發(fā)現(xiàn)ATD致GD白細胞減少患者聯(lián)合苦參治療后不僅白細胞和粒細胞明顯增加，同時體內(nèi)IL-1、IL-6水平也有所上升，且兩者具有正相關(guān)性，表明患者經(jīng)苦參治療后可能通過促進體內(nèi)IL-1、IL-6的表達進而刺激患者骨髓造血從而達到提升白細胞的作用。

苦參作為常用藥物，價格低廉，希望在未來的臨床工作中能更多的應用到甲亢合并白細胞減少患者，從而為該類患病群體提供更多的藥物選擇機會。

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Effects of Sophora flavescens on Graves'disease patients with leucopenia induced by anti-thyroid drug.

TANG Jian-lei1,ZHOU Yan2,GAO Yun-ming1.Department of Endocrinology1,Department of Clinical Laboratory2,the Second People's Hospital of Lianyungang City,Lianyungang 222000,Jiangsu,CHINA

ObjectiveTo observe the therapeutic effect of Sophora flavescens on Graves'disease(GD)patients with leucopenia after treatment of anti-thyroid drug(ATD),and to make a preliminary discussion on the possible mechanism of its formation.MethodsThirty GD patients with leucopenia after ATD treatment from January 2014 to October 2015 in our department were randomly chosen to detect peripheral white blood cell(WBC),neutrophilic granulocyte(NE)counts and blood serum interleukin 1(IL-1),interleukin 6(IL-6)levels.After that,these patients were treated with Sophora flavescens and ATD for ten days,and WBC,NE counts,IL-1,IL-6 levels would be again checked out.ResultsAfter ATD treatment,peripheral WBC,NE counts and blood serum IL-1,IL-6 levels were(3.45±0.25)×109/L, (1.72±0.21)×109/L,(0.29±0.06)ng/mL,(1.40±0.14)ng/mL,respectively.After Sophora flavescens and ATD treatment, above indexes were(4.31±0.38)×109/L,(2.34±0.28)×109/L,(0.40±0.07)ng/mL,(1.67±0.08)ng/mL,respectively.The difference of each index showed statistical significance(P＜0.05 or 0.01).Then,we found there was a positive correlation between IL-1,IL-6 levels and WBC,NE counts(r=0.595,0.456;0.473,0.467,P＜0.05 or 0.01 for all).ConclusionAfter ATD treatment,WBC and NE counts of partial patients decreased,while Sophora flavescens would obviously elevate WBC and NE counts of GD patients with leucopenia.The possible mechanism of its formation is that Sophora flavescens promote IL-1,IL-6 levels of these patients to stimulate the proliferation and differentiation of blood cells in the bone marrow.

Sphora flavescens;Leukopenia;Graves'disease(GD);Anti-thyroid drug(ATD);Cytokine

R582+.1

A

1003—6350（2016)14—2277—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.14.014

2016-01-05)

高云明。E-mail：gaoyunming@medmail.com.cn