王玲，吳軍林，，*，吳清平，袁林，張文（.廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，廣東廣州50663；.廣東省微生物研究所，廣東廣州50070）

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綠茶提取物對化學(xué)性肝損傷保護(hù)作用的研究及應(yīng)用進(jìn)展

王玲1，吳軍林1，2，*，吳清平2，袁林1，張文1
（1.廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，廣東廣州510663；2.廣東省微生物研究所，廣東廣州510070）

摘要：綠茶提取物含有茶多酚、茶氨酸、生物堿等活性物質(zhì)，具有很強(qiáng)的抗氧化能力，對化學(xué)性肝損傷具有顯著的保護(hù)作用，本文就國內(nèi)外綠茶提取物對化學(xué)性肝損傷保護(hù)作用及提高其生物利用率的研究進(jìn)行了闡述，并分析了綠茶提取物的安全性，對其在功能食品上的應(yīng)用進(jìn)行了綜述，最后對綠茶提取物的應(yīng)用及前景進(jìn)行了展望。

關(guān)鍵詞：綠茶提取物；化學(xué)性肝損傷；安全性；應(yīng)用

綠茶又稱不發(fā)酵茶，是不經(jīng)發(fā)酵，直接經(jīng)殺青、揉捻、干燥等工藝制成的一種茶，含有豐富的藥理活性成分。研究者對綠茶提取物的藥理活性及活性成分進(jìn)行了全面的研究，發(fā)現(xiàn)綠茶提取物具有抗氧化、抗菌、抗癌、抗血管生成、抗誘變、抗病毒、抗衰老、保護(hù)中樞神經(jīng)、保護(hù)心臟、抗炎、降血糖、降血壓、護(hù)肝等藥理作用［1-6］。

近年來，由于長期大量飲酒引起的酒精性肝病變、服用藥物引起藥物性肝損害及環(huán)境毒物或其他物質(zhì)引起的肝損傷等一系列化學(xué)性肝損傷己越來越成為當(dāng)今威脅人類健康的疾病。有關(guān)綠茶提取物對化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用及提高綠茶生物利用率的研究和安全性問題引起了眾多學(xué)者的關(guān)注。

1　國內(nèi)外對綠茶提取物的化學(xué)性肝損傷保護(hù)作用的研究

綠茶提取物具有強(qiáng)抗氧化能力，能夠調(diào)節(jié)體內(nèi)氧自由基與自由基清除劑的平衡，綠茶提取物的對化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用與其具有的強(qiáng)抗氧化能力有密切關(guān)系［7-8］。目前關(guān)于綠茶提取物的化學(xué)性肝損傷保護(hù)作用的研究進(jìn)展主要集中在三方面。

1.1綠茶提取物活性成分對化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用研究

學(xué)者目前研究的綠茶提取物護(hù)肝成分主要有茶多酚，咖啡堿、茶氨酸等，其中茶多酚主要含有4種單體：表沒食子酸酯（Epigallocatechi-3-gallate，EGCG）、表沒食子兒茶素（Epigallocatechin，EGC）、表兒茶素沒食子酸酯（Epicatechi gallate，ECG）和表兒茶素（Epi－catechi，EC）。吳偉青等［9］研究發(fā)現(xiàn)綠茶多酚對小鼠酒精性肝損傷具有明顯保護(hù)作用，機(jī)理與其抗氧化活性有關(guān)。Tipoe G.L.等［10］研究發(fā)現(xiàn)同時給予小鼠四氯化碳（CCl4）和EGCG，可以減輕小鼠肝臟炎癥，氧化應(yīng)激和肝纖維化。咖啡堿通過減輕炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激抑制酒精性肝損傷［11］。茶氨酸能通過抑制CCl4代謝激活與增強(qiáng)小鼠肝臟抗氧化能力來減弱炎癥反應(yīng)和肝細(xì)胞凋亡，從而抑制CCl4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷［12］。

1.2綠茶提取物對不同模型化學(xué)性肝損傷的保護(hù)研究

學(xué)者對CCl4肝損傷模型、酒精性肝損傷模型、藥物肝損傷模型、環(huán)境中有毒物質(zhì)如重金屬、煙毒等肝損傷等模型進(jìn)行了研究。Shahid S.M.等［13］讓大鼠自由飲用5%的綠茶8周，研究發(fā)現(xiàn)綠茶能顯著降低CCl4升高的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、結(jié)合膽紅素、堿性磷酸酶（ALP）、丙二醛（MDA）水平，超氧化物歧化酶（SOD）水平，對肝損傷具有明顯的保護(hù)作用，機(jī)理可能與綠茶具有抗氧化性質(zhì)和減少氧化應(yīng)激有關(guān)。綠茶提取物能抑制酒精導(dǎo)致的肝臟、膽管和血漿中ROS的減少，肝臟中4-羥基壬烯醛-蛋白加合物的增加，Kupffer細(xì)胞浸潤，脂質(zhì)集聚以及ALT水平的升高［14］。學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)綠茶提取物對咪唑硫嘌呤、甲氨蝶呤，它莫昔芬引起的藥物性肝損傷具有保護(hù)作用［15-17］。另外有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)綠茶提取物對鉛、鎘等、焦油、尼古丁、硫代乙酰胺、二甲基亞硝銨等引起的肝損傷具有顯著保護(hù)作用［18-23］。

1.3綠茶提取物與護(hù)肝保肝藥或其他物質(zhì)對化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用的比較

目前已有的護(hù)肝保肝藥有聯(lián)苯雙酯、水飛薊素、干擾素-α等。Cui Y.M.等［24］研究黃山毛峰綠茶抑制CCl4肝損傷作用，并用抗肝炎藥聯(lián)苯雙酯片做比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)高劑量黃山毛峰綠茶具有理想的肝保護(hù)作用。Mahmoud M.F.等［25］比較了綠茶、硒、水飛薊素三者對CCl4的引起的肝纖維化的保護(hù)作用，研究發(fā)現(xiàn)綠茶和硒與水飛薊比較，具有同等的保護(hù)作用的，但在降低膠原纖維化程作用方面比水飛薊更強(qiáng)。Nosseir D.A.等［26］比較了綠茶和干擾素-α對CCl4肝損傷的保護(hù)作用，研究發(fā)現(xiàn)與干擾素-α比較，綠茶提取物抑制CCl4導(dǎo)致肝纖維化的作用更強(qiáng)，可作為肝纖維化患者的輔助治療物。

2　國內(nèi)外提高綠茶提取物生物利用率的研究

綠茶提取物茶多酚具有穩(wěn)定性差，易被氧化的特點(diǎn)，李地才等［27］利用卵磷脂、膽固醇將其制備成脂質(zhì)體制劑，可以提高其穩(wěn)定性和在體內(nèi)的生物利用度及其靶向作用。馬寧等［28］研究了茶多酚脂質(zhì)體最佳制備工藝參數(shù)為茶多酚∶磷脂（質(zhì)量比）=81∶300，膽固醇∶磷脂（質(zhì)量比）=58∶300，VE∶磷脂（質(zhì)量比）=16.7∶300和乙醇4.5 mL。在最優(yōu)條件下茶多酚脂質(zhì)體包封率達(dá)7 8.10%，電鏡觀察表明茶多酚脂質(zhì)體形態(tài)均勻，呈現(xiàn)不規(guī)則的橢圓形，粒徑分布于400 nm～1000 nm范圍內(nèi)。

齊連祥［29］利用微膠囊技術(shù)，乙基纖維素（EC）和硬脂酸作壁材，在溫度為120℃、壓力0.2 MPa的條件下，芯材與壁材比例為1∶10，EC與硬脂酸的比例為1∶4，固形物含量為20%，最終產(chǎn)品的包埋率為93%。熊和建等［30］研究了茶多酚微囊化包埋最佳條件為：采用3%的海藻酸鈉（海藻酸鈉∶茶多酚=3∶1）、1%殼聚糖和3%的氯化鈣體系用一步法制備茶多酚微膠囊，該微膠囊在體外模擬胃、腸液中約2 h中達(dá)到茶多酚釋放峰值，表現(xiàn)出較好的緩釋效果。

Raederstor等［31］研究發(fā)現(xiàn)綠茶提取物主要成分兒茶素與高分子聚合物聚乙二醇（PEG）、聚乙醇酸（PGA）通過偶極-偶極相互作用后，能延長綠茶提取物作用時間，降低血液乙醇和乙醛濃度，對肝臟起到保護(hù)作用。

3　綠茶提取物安全性研究

一般認(rèn)為綠茶提取物是無毒的。鄭子新等［32］采用經(jīng)口毒性試驗(yàn)、蓄積毒性試驗(yàn)、小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)，V79細(xì)胞基因突變試驗(yàn)對綠茶提取物的急性毒性、蓄積毒性、遺傳毒性進(jìn)行了觀察，結(jié)果表明綠茶提取物不具有任何毒性。陸益等［33］對茶多酚進(jìn)行了毒理研究，結(jié)果各項(xiàng)指標(biāo)都未見異常，大白鼠長期灌服茶多酚 ［833 mg/（kg·d）］相當(dāng)于人擬用日用量的100倍也是安全的。

但是早年就不斷有病例案例報(bào)道服用綠茶提取物，患者服用一種綠茶減肥用補(bǔ)充劑，導(dǎo)致急性肝損傷，嚴(yán)重情況甚至導(dǎo)致肝移植［34］。有學(xué)者研究可能與茶多酚的主要成分EGCG有關(guān)，EGCG損傷線粒體膜，引起氧化過激［35］。目前又有學(xué)者對IGS大鼠腹膜內(nèi)注射綠茶提取物200 mg/d，發(fā)現(xiàn)綠茶提取物能引起急性嚴(yán)重的肝中毒，可能與肝細(xì)胞脂質(zhì)過氧化和DNA氧化應(yīng)激有關(guān)［36］。

4　綠茶提取物護(hù)肝功能食品研究及應(yīng)用

綠茶提取物護(hù)肝功能食品的研究主要有三方面，一是對產(chǎn)品的工藝的研究，Wu C.B.等［37］以新鮮藜蒿、綠茶為主要原料，加以白砂糖、檸檬酸為輔料，經(jīng)科學(xué)加工制成有保健功能的復(fù)合型飲料。試驗(yàn)結(jié)果表明：該飲品的最佳工藝為藜蒿汁10 mL，綠茶茶汁200 mL，白砂糖6 g，檸檬酸0.06 g。最佳穩(wěn)定劑CMC-Na添加量為0.03%，在該工藝條件下的產(chǎn)品呈淺黃綠色，具有藜蒿特有的香氣，酸甜可口，呈均勻液體狀。二是產(chǎn)品配方功效的研究，唐嬌玉［38］采用茶多酚、茶氨酸、牛至油、魚腥草4種中草藥提取物組合而成得茶多酚復(fù)方制劑。研究發(fā)現(xiàn)茶多酚復(fù)方制劑灌胃可顯著降低大鼠血液谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、ALT、ALP活性，可顯著降低肝臟總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、游離脂肪酸（FFA）、MDA含量，可顯著提高肝臟SOD活性。茶多酚復(fù)方制劑對脂肪肝大鼠肝臟具有顯著的保護(hù)作用。三是產(chǎn)品安全性的研究。宿迷菊等［39］通過急性毒性試驗(yàn)、遺傳毒性試驗(yàn)（Ames試驗(yàn)、小鼠骨髓微核試驗(yàn)、小鼠精子畸形試驗(yàn)）、30 d喂養(yǎng)試驗(yàn)對一款綠茶口含片進(jìn)行了毒理學(xué)研究，結(jié)果為綠茶口含片屬于無毒級別、無遺傳毒性，確定了試驗(yàn)中最大無損害作用劑量。

綠茶提取物制成的保健食品在國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊的已有不少，綠茶提取物很少單獨(dú)用于保健食品，主要是和其他植物提取物、維生素、營養(yǎng)強(qiáng)化劑復(fù)配制成具有對化學(xué)性肝損傷保護(hù)作用的保健食品，如葆苾牌茶薊椰橄片是由綠茶提取物與朝鮮薊提取物、五味子提取物等復(fù)配制成的?？地愄嘏泼袅︼嬃鲜怯删G茶提取物與其他植物提取物、維生素、營養(yǎng)強(qiáng)化劑共同組成的配方。

5　結(jié)論及展望

綠茶提取物對化學(xué)性肝損傷具有顯著的保護(hù)作用，但是其引起肝損傷的病例也不斷報(bào)道，近年來對綠茶提取物的肝毒性也有研究，綠茶提取物確實(shí)產(chǎn)生肝毒性。因此急需對綠茶提取物的安全性進(jìn)一步研究，明確綠茶提取物中具有肝毒性的化學(xué)成分，以及產(chǎn)生毒性的劑量。有利于綠茶提取物在臨床、功能性食品方面的應(yīng)用。

綠茶提取物中含有豐富的生物活性成分，對于各種肝損傷均有顯著的保護(hù)能力。各成分間存在協(xié)同作用，有研究發(fā)現(xiàn)，EGCG和茶氨酸對細(xì)胞氧化損傷具有協(xié)同保護(hù)和修復(fù)作用［40］。為了充分發(fā)揮綠茶提取物的作用，其成分間的協(xié)同作用值得進(jìn)一步研究。

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DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2016.11.044

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金（51271940）；廣東省省級科技計(jì)劃項(xiàng)目（2013B091500024，2013B0102019）；廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2013J2200079）

作者簡介：王玲（1984—），女（漢），工程師，碩士，主要研究方向：功能性食品。

*通信作者：吳軍林（1978—），男，研究員，博士。

收稿日期：2015-05-08

Research and Application Progress of Green Tea Extracts for Hepataprotective

WANG Ling1，WU Jun-lin1，2，*，WU Qing-ping2，YUAN Lin1，ZHANG Wen1

（1.Guangdong Huankai Microbial Sci＆Tech Co.Ltd.，Guangzhou 510663，Guangdong，China；2.Guangdong Institute of Microbiology，Guangzhou 510070，Guangdong，China）

Abstract：Current studies had revealed that green tea extracts had significantly hepataprotective effect.The scientists have paid extensive attention to the research in this field.The effects and mechanisms of green tea and bioactive component against liver injury and the research of improving the biological availability were introduced.The safety of the green tea extracts was analyzed.In addition，the future development trend had also been discussed.

Key words：green tea extracts；hepataprotective；safety；mechanism