王子健 楊靜波 李光譜 孫寧寧 孫萬春 彭其勝 劉寧

摘 要 采用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI- TOF MS）和納升電噴霧四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜（Nano-ESI -QTOF MS）技術(shù)，以標(biāo)準(zhǔn)肽段和流感病毒基質(zhì)蛋白酶切肽段為模型，研究了甲醛對蛋白質(zhì)和多肽主鏈的修飾作用。采用與實際病毒滅活過程一致的實驗條件（4℃，0.025%（V/V）福爾馬林（37%（w/w）甲醛溶液）處理72 h），進行甲醛與多肽的化學(xué)反應(yīng)。結(jié)果表明，在實驗條件下，甲醛能與標(biāo)準(zhǔn)肽段N端的氨基反應(yīng)生成羥甲基加合物，再發(fā)生縮合反應(yīng)生成亞胺，形成+12 Da的產(chǎn)物。此外，甲醛還能與標(biāo)準(zhǔn)肽段中的精氨酸、賴氨酸的側(cè)鏈發(fā)生反應(yīng)， 生成+12 Da的反應(yīng)產(chǎn)物。對流感病毒基質(zhì)蛋白的酶切肽段與甲醛的反應(yīng)的質(zhì)譜分析結(jié)果顯示，多數(shù)的肽段都生成了+24 Da的產(chǎn)物，質(zhì)量的增加來源于肽段N端氨基（+12 Da）和C端精氨酸或賴氨酸的側(cè)鏈（+12 Da）的貢獻。此外，還觀察到有一個漏切位點的肽段生成了+36 Da的產(chǎn)物。本研究結(jié)果表明，在實驗條件下，低濃度甲醛主要與肽段和蛋白的N 端氨基，以及精氨酸和賴氨酸側(cè)鏈發(fā)生反應(yīng)。本研究為分析低濃度甲醛與蛋白質(zhì)的反應(yīng)產(chǎn)物提供了有效的質(zhì)譜分析方法和解譜依據(jù)。

關(guān)鍵詞 甲醛；多肽；基質(zhì)蛋白；化學(xué)修飾；質(zhì)譜