周君安 孫 琳孫井龍(江蘇豪森藥業(yè)集團(tuán)有限公司 連云港222000)
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利奈唑胺中對(duì)映異構(gòu)體的測(cè)定
周君安孫琳*孫井龍(江蘇豪森藥業(yè)集團(tuán)有限公司連云港222000)
摘要:目的:對(duì)利奈唑胺中的對(duì)映異構(gòu)體進(jìn)行測(cè)定。方法:采用高效液相色譜法,CHIRALPAK AD-H(250mm×4.6mm 5μm);以正己烷-異丙醇-二乙胺(85∶15∶0.2)為流動(dòng)相;紫外檢測(cè)器;流速為1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm;柱溫為40℃。結(jié)果:利奈唑胺中對(duì)映異構(gòu)體能得到良好的分離,峰面積與濃度在一定的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。結(jié)論:該方法作為利奈唑胺中對(duì)映異構(gòu)體的檢測(cè)方法準(zhǔn)確、可靠。
關(guān)鍵詞:利奈唑胺液相色譜對(duì)映異構(gòu)體
利奈唑胺(linezolid)屬?lài)f唑烷酮類(lèi)抗菌新藥。該藥對(duì)葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬等革蘭陽(yáng)性菌具有良好的抗菌作用,包括多重耐藥菌,如MRSA、多重耐藥肺炎鏈球菌、萬(wàn)古霉素耐藥腸球菌[1,2,3]。該藥于2000年獲得美國(guó)FDA批準(zhǔn),2007年進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)。根據(jù)ICH指導(dǎo)原則及《中國(guó)藥典》四部通則指導(dǎo)原則要求[4],本實(shí)驗(yàn)建立了利奈唑胺中對(duì)映異構(gòu)體的檢測(cè)方法。
儀器:電子分析天平,梅特勒XS105;Agilent 1200液相色譜儀,安捷倫色譜工作站;色譜柱:CHIRALPAK AD-H(250mm× 4.6mm 5μm)。試劑:正己烷-異丙醇-二乙胺均為色譜純,來(lái)自MERCK公司;利奈唑胺及利奈唑胺對(duì)映異構(gòu)體均為本公司自制。
2.1色譜條件:照液相色譜測(cè)定法(《中國(guó)藥典》2015年版通則0512),以正己烷-異丙醇-二乙胺(85∶15∶0.2)為流動(dòng)相;紫外檢測(cè)器;流速為1.0mL/min;等度洗脫;檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm;柱溫為40℃;進(jìn)樣體積10μL。
2.2試驗(yàn)溶液配制:取利奈唑胺適量,精密稱(chēng)定,加適量甲醇溶解,并用流動(dòng)相稀釋制成每1mL中約含0.5mg的溶液,作為供試品溶液;精密量取供試品溶液適量,加流動(dòng)相稀釋制成每1mL中含5μg的溶液,作為對(duì)照溶液;取利奈唑胺及利奈唑胺對(duì)映異構(gòu)體對(duì)照品適量,加適量甲醇溶解,用流動(dòng)相稀釋制成每1mL中約含0.25mg的溶液,作為系統(tǒng)適用性溶液。
2.3系統(tǒng)適用性試驗(yàn):量取系統(tǒng)適用性溶液10μL,注入高效液相色譜儀,記錄液相圖譜。從實(shí)驗(yàn)圖譜看出,利奈唑胺與對(duì)映異構(gòu)體分離度良好,分離度為5.0,表明該分析方法專(zhuān)屬性良好。
2.4定量限和檢測(cè)限試驗(yàn):將對(duì)照溶液逐步稀釋?zhuān)謩e進(jìn)樣至信噪比(峰高/基線噪聲)為3±1為檢測(cè)限,至信噪比為10±2為定量限。結(jié)果見(jiàn)下表。
檢測(cè)限 定量限檢測(cè)濃度比值(%)對(duì)映異構(gòu)體 1.2 120 0.025 2.5 250 0.05利奈唑胺 1.2 120 0.025 2.5 250 0.05名稱(chēng) 濃度(ng)檢測(cè)量(ng/mL)檢測(cè)濃度比值(%)濃度(ng) 檢測(cè)量(ng/mL)
2.5線性關(guān)系試驗(yàn):按照標(biāo)準(zhǔn)限度配制線性關(guān)系試驗(yàn)溶液,利奈唑胺對(duì)映異構(gòu)體在0.25~500μg/mL的范圍內(nèi),線性相關(guān)系數(shù)皆大于0.9990,說(shuō)明線性良好。
名稱(chēng) 回歸方程 相關(guān)系數(shù)利奈唑胺對(duì)映異構(gòu)體 A=29.627×C-0.173 r=0.9998
2.6系統(tǒng)精密度:考察供試品溶液及對(duì)照溶液連續(xù)六針進(jìn)樣試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表。
項(xiàng)目對(duì)映異構(gòu)體(%)對(duì)映異構(gòu)體平均值(%) 未檢出SD對(duì)映異構(gòu)體(%) / 第1次 第2次 第3次 第4次 第5次 第6次未檢出 未檢出 未檢出 未檢出 未檢出 未檢出
由結(jié)果可見(jiàn),利奈唑胺對(duì)映異構(gòu)體平行測(cè)定六次,均未檢出,說(shuō)明本方法系統(tǒng)的精密度符合實(shí)驗(yàn)要求。
2.7溶液穩(wěn)定性:考察供試品溶液及對(duì)照溶液在選定稀釋液中的穩(wěn)定性,試驗(yàn)結(jié)果下表。
放置時(shí)間對(duì)映異構(gòu)體(%)0h 2h 4h 8h 12h 24h 結(jié)論未檢出 未檢出 未檢出 未檢出 未檢出 未檢出 無(wú)降解
由結(jié)果可以看出,利奈唑胺樣品在流動(dòng)相中24h內(nèi)穩(wěn)定,無(wú)對(duì)映異構(gòu)體降解產(chǎn)生。
2.8回收率:稱(chēng)取利奈唑胺約50mg,置50mL量瓶中,作為回收率基質(zhì)樣品;另精密稱(chēng)取利奈唑胺對(duì)映異構(gòu)體對(duì)照品約5mg,置250mL量瓶中,加適量乙腈溶解后,用稀釋液稀釋定容至刻度,作為儲(chǔ)備溶液。以對(duì)映異構(gòu)體限度為基準(zhǔn)100%,分別精密量取儲(chǔ)備溶液制成含雜質(zhì)40%、100%和120%的溶液各三份,作為供試品溶液。定量測(cè)定的利奈唑胺對(duì)映異構(gòu)體的平均回收率介于95%~104%之間,RSD為5.43%,說(shuō)明本分析方法對(duì)利奈唑胺對(duì)映異構(gòu)體的測(cè)定是準(zhǔn)確的。
用高效液相色譜法測(cè)定利奈唑胺中對(duì)映異構(gòu)體專(zhuān)屬性良好;對(duì)檢測(cè)限、定量限進(jìn)行測(cè)定,說(shuō)明本方法檢測(cè)靈敏度高,能保證對(duì)低限度溶劑的良好檢測(cè);另外對(duì)線性關(guān)系、系統(tǒng)精密度、溶液穩(wěn)定性、回收率進(jìn)行測(cè)定,發(fā)現(xiàn)本方法均能滿足上述實(shí)驗(yàn)的要求,對(duì)利奈唑胺中對(duì)映異構(gòu)體進(jìn)行準(zhǔn)確定量,能滿足對(duì)利奈唑胺中對(duì)映異構(gòu)體的含量控制。
參考文獻(xiàn)
[1]李娉,李慶林,劉麗萍,等.利奈唑胺和萬(wàn)古霉素對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染療效的Meta分析[J].安徽醫(yī)藥,2015,19(5):969-973.
[2]毛銳.利奈唑胺治療醫(yī)院獲得性耐甲氧西林金黃色葡萄球菌肺炎的療效觀察[J].北方藥學(xué),2015,12(5):60-61.
[3]劉麗.利奈唑胺治療老年人革蘭陽(yáng)性菌感染的療效[J].吉林醫(yī)學(xué),2015,36(15):3289-3290.
[4]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典四部通則[S].中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2015:59,374.
Determination of enantiomers in linezolid
Zhou Junan Sun Lin*Sun Jinglong(Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Co.,Ltd. Lianyungang 222000 China)
Abstract:Objective: To establish a method for detection of enantiomers in linezolid Methods The enantiomers in linezolid was determined by HPLC with CHIRALPAK AD -H(250mm×4.6mm 5μm)column; the mobile phase was in the phase of hexane -isopropanol -diethylamine-(85∶15∶0.2)and with UV detector; The flow rate was 1.0mL/min; detection wavelength was 254nm; column temperature was 40℃; Results The enantiomers could be completely separated,and the calibration curves hand good liner relationship within a certain range Conclusion this method is proved accurate and reliable,it can be used for the determination of enantiomers in linezolid
Key words:Linezolid HPLC Enantiomers
*通訊作者
中圖分類(lèi)號(hào):R917
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
文章編號(hào):1672-8351(2016)04-0001-02