田阿林　周文康　溫圣賢

摘 要：綠原酸是煙葉中最主要的酚類物質(zhì)，與烤煙的色澤、香氣及質(zhì)量密切相關(guān)。該文以綠原酸的遺傳研究現(xiàn)狀作為出發(fā)點，圍繞生態(tài)、栽培和調(diào)制3個方面對影響煙草綠原酸含量的因素進行了分析，為有目的地改善煙葉香氣品質(zhì)、外觀質(zhì)量和服務(wù)生產(chǎn)實際提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：烤煙；綠原酸；轉(zhuǎn)基因調(diào)控；生態(tài)因素；栽培措施；調(diào)制技術(shù)

中圖分類號 S572 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2016）17-0022-05

Abstract：Chlorogenic acid is the most important tobacco phenolics， closely related to the color， aroma and quality of tobacco. In this paper，status of genetic research chlorogenic acid as the starting point，and surrounding ecology，cultivation and modulation three aspects of factors affecting tobacco chlorogenic acid content were analyzed to provide theoretical basis for purposefully improving tobacco aroma quality，appearance，quality and service production.

Key words：Flue-cured tobacco；Chlorogenic acid；Transgene regulation；Ecological factors；Cultivation measures；Modulation techniques

煙葉中綠原酸含量占總多酚的75%～95%，在烤煙中含有3%或更高的綠原酸，是煙葉中含量最高的多酚化合物。綠原酸是產(chǎn)生煙草香氣的重要成分之一，不僅直接影響煙葉顏色，而且對煙氣質(zhì)量和香吃味也有間接影響，其降解產(chǎn)物還可以改善煙草制品的吸味，是衡量煙葉品質(zhì)的重要指標[1]。提高煙草中綠原酸的含量，可以提高煙草的香氣質(zhì)、香氣量及透發(fā)性，降低刺激性[2]，且綠原酸的含量與煙葉等級是相一致的，綠原酸含量越高，煙草制品等級也就越高。綠原酸在煙草行業(yè)中有重要應(yīng)用，并且已經(jīng)廣泛應(yīng)用于食品、保健、醫(yī)藥、日常生化用品等領(lǐng)域[3]。目前，國內(nèi)外圍繞著煙草綠原酸已經(jīng)進行了大量研究，但多是與其他酚類物質(zhì)結(jié)合在一起來分析，很少有單獨將綠原酸作為一個研究主體來討論的。筆者基于已開展的針對綠原酸的研究資料，系統(tǒng)地分析了綠原酸的積累在烤煙基因型間的不同及基因調(diào)控，并闡述了生態(tài)條件、栽培措施和調(diào)制技術(shù)等因素對烤煙綠原酸含量的影響，以期為煙葉品質(zhì)的提高和特色優(yōu)質(zhì)煙葉的開發(fā)研究提供有益的參考。

1 遺傳因素對烤煙綠原酸含量的影響

1.1 烤煙基因型差異 煙草綠原酸有著定量的遺傳差異，含綠原酸高的煙草品種，其后代的綠原酸含量也較高，反之亦然[4]。這說明煙草中綠原酸含量是受遺傳基因控制的，品種間綠原酸水平的差異能夠傳遞給后代，因此可以通過育種途徑來選育綠原酸含量適宜的煙草品種。不同基因型間相比，多酚物質(zhì)絕對含量的最高值是最低值的2～3倍，綠原酸相對含量最高值比最低值高20個百分點[5]。對河南中部煙區(qū)種植的4個烤煙品種初烤煙葉中的多酚成分進行了測定，發(fā)現(xiàn)中煙100的多酚總量、總綠原酸、綠原酸含量顯著高于NC89、云煙85和云煙87，NC89次之，云煙85和云煙87的相對較低[6]；山東諸城、四川西昌兩產(chǎn)區(qū)中烤煙總綠原酸含量均高于平均值的品種有NC89、凈葉黃、中煙102、中煙98、云煙87、中煙14、單育2號、革新三號、09-53等，可作為高綠原酸含量親本在育種中利用[5]。綠原酸的含量除了在不同基因型烤煙整體間存在差異外，在其不同部位間也有較大差異，表現(xiàn)為下部葉（X2F）>中部葉（C3F）>上部葉（B2F），而4-O-咖啡喹尼酸和新綠原酸為中部葉（C3F）≥下部葉（X2F）>上部葉（B2F）[7]。綠原酸含量不僅在煙株不同部位葉片中存在著一定的差異，而且同一片煙葉中綠原酸的分布也呈現(xiàn)一定的規(guī)律性，綠原酸含量從尖端到基部逐漸降低，尖端的綠原酸含量為基部的2倍[8]。

1.2 轉(zhuǎn)基因調(diào)控 隨著對綠原酸生物合成途徑的深入了解，通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)可增加煙草體內(nèi)綠原酸的積累。煙草中過量表達tobHQT基因，煙草葉片中綠原酸的含量提高了10%以上，而且在過量表達tobHQT的轉(zhuǎn)基因煙草中抗氧化脅迫和抗病毒能力有顯著的提高[9]。朝鮮薊中的HQT1基因在本明煙中瞬時過量表達，轉(zhuǎn)基因煙草葉片中的綠原酸含量提高了大約3倍，朝鮮薊中HQT1在普通煙草中穩(wěn)定過量表達，能使煙草葉片中的綠原酸含量提高10倍以上[10]。研究表明[11]，與野生型相比，轉(zhuǎn)NtC3H基因的煙草葉片中綠原酸的含量最高提高了3.6倍，最高含量達到1 167.1μg/g（鮮重）。這種變化很可能是由于對-香豆酸3-羥化酶（C3H）在次生代謝途徑中起到的作用不僅僅是調(diào)節(jié)木質(zhì)素的合成過程，也同時對綠原酸所在的合成途徑中其他相關(guān)酶的表達產(chǎn)生了影響，促進其在煙草植株體內(nèi)的累積[11]。說明C3H可能并不是直接催化生成綠原酸，而是合成過程的中間酶。

2 生態(tài)環(huán)境因素對烤煙綠原酸含量的影響

生態(tài)、品種及其互作對烤煙綠原酸含量變異的貢獻率不同，生態(tài)對三者含量變異的貢獻率分別為47%、18%、35%[12]。生態(tài)條件、生態(tài)與品種和栽培措施互作效應(yīng)是影響烤煙綠原酸含量的關(guān)鍵因素，品種和栽培措施對綠原酸的含量亦有重要作用[13]，但環(huán)境因素對綠原酸累積的影響大明顯于遺傳因素[14]。

2.1 光照 光周期對煙草不同器官內(nèi)綠原酸的積累有重要作用，光照能誘導(dǎo)煙草體內(nèi)綠原酸合成代謝水平的上升。光對煙草體內(nèi)綠原酸含量的影響是通過光敏色素來控制的。生長在冬季光照充足條件下的葉片中綠原酸含量較背陰條件下明顯增高；夏季葉片中的綠原酸含量則比冬季增高一倍[15]。同一品種的煙草生長在溫室中，由于溫室中光照強度弱，綠原酸含量減少，補充短波紫外光時，煙葉綠原酸含量顯著提高[16]。Tso等[17]研究表明，添加遠紅外光對增加煙葉內(nèi)的綠原酸含量的促進作用尤為顯著。成熟期烤煙上部葉施加UV-B（波長為280～320nm）能促進煙葉多酚含量的提高，增幅與UV-B強度成正比，但會抑制中部葉的綠原酸和蕓香苷的合成，且降幅與UV-B強度成正比，隨著UV-B強度增加煙葉綠原酸含量呈曲線下降趨勢[18]。這可能與中部葉受到的UV-B強度弱于上部葉，多酚氧化酶和過氧化物酶含量升高，導(dǎo)致多酚氧化分解所致。由此看來紫外光在煙草綠原酸合成與積累過程中可能起關(guān)鍵作用。光照強度與烤煙的多酚（綠原酸和蕓香苷）含量成正相關(guān)[18]。適度遮陰有利于紅花大金元和中煙100的上部葉綠原酸合成，不利于K326上部葉綠原酸的合成；有利于紅花大金元中部葉的綠原酸合成，不利于中煙100和K326上部葉綠原酸的合成；遮陰對于下部葉成熟期綠原酸的合成均有不良影響，并且一定范圍內(nèi)光強越低，綠原酸含量越少[19]。通過不同的LED獲得單色光，對生長中的煙草進行光質(zhì)處理，與白光相比，紫、藍光促進了煙葉內(nèi)的綠原酸合成和積累[20]。這與紫、藍光處理促進了苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性增強，降低了過氧化物酶（POD）活性在某種程度上有一定的關(guān)系。

2.2 溫度 煙草綠原酸含量的變化也與煙株的受寒溫度有關(guān)，受過驟寒的煙株與對照煙株相比，除了根部以外部位的綠原酸濃度增大了4～5倍[21]，這可能是煙草抵御寒冷的應(yīng)激反應(yīng)。煙草成熟期以前，煙葉中總酚含量持續(xù)下降，但移栽-團棵期時較低溫度（均溫16℃）下的總酚含量維持在一個相對較高的水平，而到了團棵-現(xiàn)蕾期，較高的溫度（均溫25℃）更有利于總酚含量的維持；進入成熟期后，煙葉中的總酚含量開始逐漸升高，且較高的溫度下的總酚積累量最多[22]。而在低溫脅迫下，總酚含量持續(xù)降低[23]。因此，煙草生長期間前期稍低后期較高的氣溫條件更有利于多酚物質(zhì)的積累，而前期高后期低的氣溫條件則不利于多酚物質(zhì)的積累。

2.3 水分 綠原酸能夠緩解逆境脅迫引起的膜脂過氧化，減少細胞膜損傷，從而可以保護細胞膜和細胞壁。干旱脅迫早期，總酚和木質(zhì)素的積累量明顯升高，在24h時達最大值，之后隨脅迫時間的延長逐漸降低[24]。但干旱脅迫可能不會上調(diào)綠原酸含量，因為ABA是調(diào)節(jié)干旱脅迫和鹽脅迫的重要激素，而ABA沒有明顯上調(diào)綠原酸合成關(guān)鍵基因NtHQT1的表達[25]。

2.4 海拔 生長在高海拔地區(qū)的煙草綠原酸含量比生長在低海拔地區(qū)的高，這與紫外輻射較強有關(guān)。河南、山東、陜西、安徽、廣東、湖南、江西、廣西8省區(qū)的濃香型烤煙主產(chǎn)區(qū)范圍內(nèi)（海拔高度17～1 298m），綠原酸占多酚含量的比例與海拔高度成負相關(guān)和極顯著負相關(guān)，且華中地區(qū)（海拔高度64～1 044m）烤煙綠原酸占多酚含量的比例與海拔高度成極顯著和顯著負相關(guān)[26]。李軍營等[27]研究指出，綠原酸與海拔高度間的相關(guān)性沒有達到顯著水平，但多酚物質(zhì)總量隨海拔升高顯著增加[28]，因此海拔可能對除綠原酸外的主要多酚類物質(zhì)存在影響。目前，一些研究認為，綠原酸與海拔高度呈顯著或極顯著負相關(guān)[29]。而另一些研究則認為，高海拔有利于提高煙葉中除綠原酸外其他物質(zhì)的含量[30]。導(dǎo)致這種差異的原因可能是因為海拔高度對綠原酸含量的影響存在閾值效應(yīng)，且供試品種對海拔高度的敏感程度不同。

3 栽培措施對烤煙綠原酸含量的影響

3.1 礦質(zhì)營養(yǎng) 礦質(zhì)元素的不平衡會影響綠原酸在煙株中的積累，增加氮肥施用量是否促進綠原酸的積累尚存在爭議[31-32]。但煙草成熟中后期，適當增加硝態(tài)氮比例，能明顯提高綠原酸含量，改善烤煙煙葉香氣風格[33]。磷肥的施用量增加，煙葉中綠原酸、蕓香苷和莨菪亭的含量也增加，增施鉀肥對多酚類化合物含量影響較小[16]。但分次施鉀肥能夠提高煙葉總酚、綠原酸含量[34]。主要營養(yǎng)元素缺乏會對烤煙主要香氣前體物造成嚴重影響，缺N、缺K、缺P、缺Mg對綠原酸合成代謝極為不利，缺P抑制煙葉綠原酸合成代謝影響最大，缺Mg、缺K其次，缺N影響最小[35]，缺Ca的煙葉中綠原酸含量低。但缺B可以導(dǎo)致煙株體內(nèi)積累大量酚酸[36]。因此，在烤煙生產(chǎn)中后期保持N、P、K、Mg、Ca的合理供應(yīng)，進一步研究平衡施肥，對提高烤煙香氣量和煙葉品質(zhì)至關(guān)重要。鹽脅迫對烤煙綠原酸含量也存在影響。適度NaCl（350mmol/L）脅迫處理下鮮煙葉綠原酸等多酚物質(zhì)含量增加，且與PAL活性變化密切相關(guān)，但過度（700mmol/L）脅迫增幅較小，可能因為嚴重的脅迫會將綠原酸氧化形成其他物質(zhì)[37]。

3.2 有機質(zhì) 土壤有機質(zhì)對烤煙品質(zhì)形成有重要影響，能較好地改善煙葉內(nèi)在品質(zhì)。煙葉綠原酸含量隨土壤有機質(zhì)含量增加呈先升高后降低的趨勢，但差異不顯著，而煙葉多酚總量隨土壤有機質(zhì)含量增加遞增，高有機質(zhì)組的煙葉多酚總量顯著高于低有機質(zhì)組（P<0.05）[44]。這可能是因為土壤有機質(zhì)主要影響莨菪亭和蕓香苷含量[38]。趙銘欽等[39]的研究表明，增施有機質(zhì)可以使煙葉中綠原酸含量明顯增加，以增施發(fā)酵后的豆?jié){最好，其次是增施豆參，而增施芝麻和香油的效果較差。

3.3 植物生長調(diào)節(jié)劑 植物生長調(diào)節(jié)劑對煙草綠原酸的合成及積累有很大影響，噴施萘乙酸（NAA）可降低綠原酸含量。茉莉酸甲酯（MeJA）、生長素（IAA）、獨角金內(nèi)酯類似物（GR24）、6-芐氨基腺嘌呤（6-BA）和赤霉素（GA）能明顯上調(diào)NtHQT1基因的表達，脫落酸（ABA）對基因表達沒有明顯作用[25]。因此，推測MeJA、IAA、GR24、6-BA和GA能夠上調(diào)綠原酸含量。打頂后涂抹IAA可以降低煙葉中多酚類化合物含量，降低程度與涂抹次數(shù)有關(guān)[40]。目前，關(guān)于IAA、NAA、GA等植物生長調(diào)節(jié)劑的適宜濃度、作用時期及作用機制仍需進一步深入系統(tǒng)的研究[41]。

3.4 成熟度 隨著生育期延長，烤煙綠原酸含量逐漸增加，成熟期時達到最高值。中、上部初烤煙葉多酚中綠原酸比例隨采收成熟度的提高而增加，達到過熟時略有降低[42]。只有采收適熟煙葉，才能保持煙葉內(nèi)有適宜綠原酸含量。煙葉延后采收，葉片柵欄組織厚度、海綿組織厚度和組織比等參數(shù)呈下降趨勢，細胞間隙呈逐漸增大趨勢，葉肉細胞出現(xiàn)逐漸解體現(xiàn)象[43]。而柵欄組織、海綿組織都含有相當豐富的綠原酸，且柵欄細胞綠原酸含量高于海綿細胞含量[44]。因此，延遲采收可能會降低煙葉中綠原酸的含量。不同品種的基因差異以及生態(tài)適應(yīng)性是造成葉片結(jié)構(gòu)差異的主要因素[44]，在育種和栽培上培育柵欄細胞適度發(fā)達的品種，有利于提高綠原酸含量，從而改善了煙葉品質(zhì)。

3.5 裝煙方式 煙篦烤煙的總酚、綠原酸含量最高，煙夾烤煙次之，煙筐烤煙的最低，且有顯著性的差異（P<0.05）；3種裝煙方式的抗氧化能力順序（DPPH自由基清除能力和還原能力）與總酚含量和綠原酸含量之間存在一定的正相關(guān)性[45]。從煙葉品質(zhì)和抗氧化能力考慮，煙篦裝煙是比較好的選擇[45]。

3.6 其他因素 不同栽培模式、種植密度及留葉數(shù)均對對煙草綠原酸含量存在影響，地膜覆蓋栽培[46]、低起壟2次培土成壟[34]及合理的種植密度和留葉數(shù)[47]有利于提高促進煙草綠原酸的合成，進而改善煙葉質(zhì)量。另外，還發(fā)現(xiàn)一些病原菌侵染能提高植物綠原酸含量，當煙草遭受根串珠霉菌侵染時根和葉中的綠原酸含量明顯增高[48]。這可能與綠原酸能提高植物的抗病性有關(guān)。

4 調(diào)制技術(shù)對烤煙綠原酸含量的影響

4.1 烘烤 烘烤過程中煙葉綠原酸形成有相當大的數(shù)量，與新鮮煙葉相比，烘烤后綠原酸的含量增加約9倍之多。煙葉密集烘烤前對鮮煙葉正面煙梗劃開和煙葉背面煙梗剔除，烘烤過程中苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性呈上升趨勢[49]，這有利于綠原酸的合成。與普通烤房相比，密集烘烤過程中多酚氧化酶活性較低，總酚、綠原酸和新綠原酸的含量較高，說明密集烘烤烤后煙葉趨于變黃充分，不易發(fā)生棕色化反應(yīng)，有利于煙葉烤黃[50]。為了改善和提高密集烘烤煙葉質(zhì)量，有研究指出，“8點式精準工藝”有利于多酚糖苷和酯的分解代謝，促進多酚的積累，為非酶棕色化反應(yīng)和煙葉香氣的形成提供了必要的前體物質(zhì)，而且棕色化反應(yīng)適度，對烤后煙葉的顏色有利[51]。定色前期是烤煙煙葉多酚含量最容易減少的時期，一旦烘烤不當，綠原酸等就會在多酚氧化酶的作用下被氧化為醌，然后與氨基酸、糖類等結(jié)合成為深色色素，對煙葉顏色和香味造成不利影響。定色前期以44℃為穩(wěn)溫點時，烤后煙葉中的綠原酸和總酚含量含量較低，而以46、48℃作為穩(wěn)溫點時，烤后煙葉中的綠原酸和總酚含量含量較高[52]。究其原因，可能是在不同穩(wěn)溫點煙葉脫水速度不同，煙葉含水量不同，導(dǎo)致多酚氧化酶活性不同所致。定色期慢升溫定色處理的多酚氧化酶（PPO）活性顯著低于快速升溫定色處理，較不易發(fā)生棕色化反應(yīng)[53]。

4.2 陳化 煙葉陳化可以達到完善煙葉品質(zhì)和提高煙葉可用性的目的。陳化期間，不同溫濕度條件下，總酚、綠原酸、蕓香苷含量在陳化過程中整體上呈下降趨勢，其中前期（0～12個月）下降幅度較大，中后期（12～21個月）較緩，此后至陳化結(jié)束基本穩(wěn)定[54]。陳化初期煙葉褐變主要由綠原酸氧化所導(dǎo)致，后期引起顏色變化的內(nèi)因已不是綠原酸的氧化反應(yīng)[55]。因此，煙葉陳化的前12個月控制綠原酸的氧化程度可防止煙葉陳化初期褐變。陳化條件下，煙葉綠原酸含量隨溫度、濕度、氧氣濃度的增加而減少，褐變程度隨溫度、空氣濕度的增加而增加；烤煙的綠原酸含量與煙葉顏色值呈負相關(guān)，溫度和空氣濕度都可以加速綠原酸的氧化，增加煙葉的褐變程度[56]。因此，陳化前期調(diào)控貯藏的溫濕度條件，可抑制綠原酸的氧化，防止煙葉的褐變。

5 展望

前人的研究大都集中在煙草綠原酸與煙葉品質(zhì)以及合成、代謝過程中相關(guān)酶類的關(guān)系上，對調(diào)制中的研究也多集中在棕色化反應(yīng)上[41]。而21世紀初煙葉的品質(zhì)風格和安全性開始進入可用性指標系列[57]，仍有許多問題尚有待進一步研究。綠原酸是影響抽吸安全性的重要因素，通過哪些措施來降低其負面影響？綠原酸熱解轉(zhuǎn)化物兒茶酚對人體健康有害，培育出與形成兒茶酚水平低的煙草品種，是人們迫切需要的。煙株體內(nèi)綠原酸含量的因素很多，通過改變哪些關(guān)鍵措施才能達到適宜的綠原酸含量，而與其他化學(xué)成分又比較協(xié)調(diào)？綠原酸對煙株生長和抗逆的作用生理機制如何？同時，煙葉中綠原酸與煙草香氣成分的關(guān)系也有待研究。目前我國卷煙正處于特色煙葉開發(fā)的關(guān)鍵時期，探索特色煙區(qū)最適宜綠原酸積累的關(guān)鍵因子與特色煙葉形成的關(guān)系等方面的研究，必將成為目前及今后一段時間煙草科研工作的研究重點之一。

參考文獻

[1]王瑞新.煙草化學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2003：109-114.

[2]龍章德，林順順，田兆福，等.煙草多酚類化合物對卷煙品質(zhì)的影響[J].食品與機械，2013，29（6）：41-44.

[3]席利莎，木泰華，孫紅男.綠原酸類物質(zhì)的國內(nèi)外研究進展[J].核農(nóng)學(xué)報，2014，28（2）：292-301.

[4]Williamson R E.Variation of Polyphenols in Flue-cured tobacco cultivars attributed to location，stalk position and year[J].Crop Sci.，1982，22（1）：144-146.

[5]李艷麗，羅成剛，任民，等.不同基因型不同產(chǎn)區(qū)烤煙多酚含量的比較[J].煙草科技，2014（5）：82-87.

[6]劉陽，尹啟生，宋紀真，等.不同品種烤煙多酚含量和組成的差異分析[J].煙草科技，2007（8）：32-34，42.

[7]宗浩，楊程，陳剛，等.不同烤煙品種香型風格與多酚類物質(zhì)含量差異分析[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2011，27（30）：241-245.

[8]于存峰，張峻松，閆洪洋，等.煙草中多酚類化合物研究進展[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008（4）：10-14.

[9]Niggeweg R，Michael A J，Martin C.Engineering plants with increased levels of the antioxidant chlorogenic acid[J].Nat Biotechnol，2004，22（6）：746-754.

[10]Sonnante G，Amore R D，Blanco E，et al.Novel hydroxycinnamoyl-coenzyme A quinate transferase genes from artichoke are involved in the synthesis of chlorogenic Acid[J].Plant Physiol，2010，153（3）：1224-1238.

[11]李洋，唐雪冰，李曉峰，等.NtC3H基因?qū)煵蓊慄S酮及綠原酸合成的影響[J].中國煙草科學(xué)，2016，37（1）：8-13.

[12]丁燕芳，楊鐵釗，李亞培，等.生態(tài)與品種及其互作對烤煙多酚類物質(zhì)的影響[J].中國煙草科學(xué)，2013，34（1）：17-21.

[13]許曉敬，張小全，劉冰洋，等.生態(tài)、品種和栽培措施及其互作對烤煙多酚類物質(zhì)的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，44（3）：117-120.

[14]沈丹紅.新鮮煙葉中的酚類物質(zhì)研究[D].南京：南京理工大學(xué)，2014.

[15]Grace S C，Logan B A，Adams W W.Seasonal differences in foliar content of chlorogenic acid，a phenylpropanoid antioxidant，in Mahonia repens[J].Plant Cell Environment，1998，21（5）：513-521.

[16]朱小茜，徐曉燕，黃義德，等.多酚類物質(zhì)對煙草品質(zhì)的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005，33（8）：1910?1911.

[17]Tso T C，Kasperbauer M J，Sorokin T P.Effects of photoperiod and end-of-day light qualityon alkaloids and phenolic compounds of tobacco[J].Plant Physiol，1970，45（3）：330-333.

[18]李鵬飛，周冀衡，羅華元，等.增強UV-B輻射對烤煙主要香氣前體物及化學(xué)成分的影響[J].煙草科技，2011（7）：69-75.

[19]彭 東.光質(zhì)、光強對烤煙苯丙烷代謝關(guān)鍵酶及多酚產(chǎn)物的影響[D].北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2013.

[20]楊利云.不同光質(zhì)對煙草生長發(fā)育、光合特性及多酚代謝的影響[D].昆明：云南師范大學(xué)，2014.

[21]Koeppe D E，Rohrbaugh L M，Rice E L，et al.Effect of age and chilling temperatures on the concentration of scopolin and caffeoylquinic acids in tobacco[J].Physiol Plant，1970，23（2）：258-266.

[22]楊慧芹，王莎莎，金云峰，等.生長溫度對不同生育期煙草多酚物質(zhì)代謝的影響[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2015，34（9）：1957-1974.

[23]楊慧芹，王莎莎，張建波，等.煙草多酚代謝對干旱和低溫脅迫的響應(yīng)差異及其比較[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2015，34（3）：645-654.

[24]楊慧芹.溫度和水分對煙草多酚代謝的影響及種子引發(fā)對提高煙草種子和幼苗抗逆性的效應(yīng)[D].昆明：云南師范大學(xué)，2015.

[25]武明珠，許亞龍，李鋒，等.煙草綠原酸合成關(guān)鍵基因NtHQT1的克隆及表達分析[J].煙草科技，2015，48（11）：1-6.

[26]劉鵬飛，位輝琴，張駿，等.海拔對濃香型烤煙多酚類物質(zhì)組成的影響[J].煙草科技，2014（7）：85-88.

[27]李軍營，方敦煌，宋春滿，等.烤煙品種間煙葉化學(xué)成分含量對海拔高度的響應(yīng)[J].中國煙草科學(xué)，2012，33（2）：17-23.

[28]黎妍妍，李錫宏，林國平，等.湖北烤煙多酚類物質(zhì)質(zhì)量分數(shù)及其與海拔高度的關(guān)系分析[J].湖北民族學(xué)院學(xué)報（自然科學(xué)版），2009，27（3）：267-270.

[29]王育軍，周冀衡，張一揚，等.海拔對烤煙品種NC102和NC297物理特性和化學(xué)成分的影響[J].中國煙草科學(xué)，2015，36（1）：42-47.

[30]宋淑芳，周冀衡，李強，等.基因與環(huán)境互作對云南保山烤煙主要潛香型物質(zhì)的影響[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報，2014，25（11）：3223-3228.

[31]Williama C，Elliot J M.Influence of nitrogen，Phosphorus，potassium and magnesium in the phenolic constituents of flue-cured tobacco[J].Can J Plant Sci.，1978，58（2）：543-548.

[32]王愛華，王松峰，宮長榮.氮素用量對烤煙上部葉片多酚類物質(zhì)動態(tài)的影響[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2005（3）：57-60.

[33]孟祥東，趙銘欽，李元實，等.不同氮素形態(tài)及比例對烤煙多酚及相關(guān)酶活性動態(tài)的影響[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2010，32（1）：25-30.

[34]趙銘欽，劉金霞，黃永成，等.不同成壟方式和分次施鉀對烤煙多酚類和石油醚提取物含量的影響[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2007（5）：719-722.

[35]李鵬飛，周冀衡，郭漢華，等.養(yǎng)分虧缺對烤煙主要香氣前體物含量的影響[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2009，35（5）：474-479.

[36]周冀衡，朱小平，王彥亭，等.煙草生理與生物化學(xué)[M].合肥：中國科技大學(xué)出版社，1996.

[37]胡慶輝，王程棟，王樹聲，等.NaCl脅迫下鮮煙葉中多酚物質(zhì)含量及PAL和PPO活性變化[J].中國煙草科學(xué)，2013，34（1）：51-55.

[38]王小東，田曉莉，許自成，等.不同土壤有機質(zhì)水平對烤煙內(nèi)在品質(zhì)的影響[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報，2011，20（5）：99-105.

[39]趙銘欽，劉金霞，劉國順，等.增施不同的有機質(zhì)對烤煙多酚和石油醚提取物含量的影響[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2008（4）：536-539.

[40]張婷，汪宏毅，王國宏，等.頂端調(diào)控措施對烤煙葉片多酚氧化酶活性和酚類化合物含量的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007（36）：11875-11876，11882.

[41]楊志曉，王軼，任學(xué)良，等.煙草多酚類化合物合成與積累影響因素研究進展[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，41（10）：1-5.

[42]劉陽，高麗君，蔡憲杰，等.采收成熟度對烤煙多酚含量和組成的影響[J].煙草科技，2011（8）：73-78.

[43]張亞婕，張高菊，楊曉艷，等.不同延遲采收期煙葉組織結(jié)構(gòu)的比較解剖研究[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2013，29（19）：93-97.

[44]黃勇，何小力，張偉，等.不同烤煙品種中部葉的顯微結(jié)構(gòu)分析[J].煙草科技，2012（6）：76-79.

[45]傅茂潤，趙雙，侯連濤，等.不同裝煙方式對煙葉色澤·酚類物質(zhì)及抗氧化能力的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（3）：901-902，938.

[46]易嬌.煙草中有機酸和多酚的HPLC測定及煙草專用轉(zhuǎn)光膜的應(yīng)用研究[D].長沙：湖南師范大學(xué)，2006.

[47]趙銘欽，王瑩，李元實，等.種植密度及留葉數(shù)對延邊烤煙多酚及石油醚提取物含量的影響[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2008（2）：60-65.

[48]Gayed S K，Rosa N.Levels of chlorogenic acid in tobacco cultivars，healthy and infected with Thielaviopsis basicola[J].Phytopathology，1975，65（10）：1049-1053.

[49]趙華武，賀帆，石盼盼，等.密集烘烤過程中不同前處理煙葉生理生化變化研究[J].中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2012，17（3）：101-106.

[50]董淑君，黃明迪，王耀鋒，等.密集烤房與普通烤房烘烤中煙葉色素和多酚含量的變化分析[J].中國煙草科學(xué)，2015，36（1）：90-95.

[51]徐秀紅，王傳義，劉昌寶，等.“8點式精準密集烘烤工藝”的創(chuàng)新集成與應(yīng)用[J].中國煙草科學(xué)，2012，33（5）：68-73.

[52]劉領(lǐng)，王能如，徐增漢，等.定色前期穩(wěn)溫點對煙葉石油醚提取物和多酚含量的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007（19）：5788-5789.

[53]王松峰，王愛華，王金亮，等.密集烘烤定色期升溫速度對烤煙生理生化特性及品質(zhì)的影響[J].中國煙草科學(xué)，2012，33（6）：48-53.

[54]趙銘欽，陳紅華，陳秋會，等.不同陳化條件下烤煙多酚類物質(zhì)的動態(tài)變化及其與化學(xué)成分的相關(guān)分析[J].中國煙草學(xué)報，2007（4）：16-18，30.

[55]王長征，陳少濱，李清祿，等.不同陳化時期烤煙K326·云煙85綠原酸含量與褐變關(guān)系的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008（7）：2794-2795，2925.

[56]張愛民，王長征.不同陳化條件下烤煙綠原酸含量與褐變程度的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008（10）：4119-4120，4132.

[57]唐遠駒.關(guān)于煙葉的可用性問題[J].中國煙草科學(xué)，2007（1）：1-5.

（責編：張宏民）