趙可惠，王靜，蘇永文，劉宇，張藝

·藥理毒理·

藏藥江孜沙棘對急性血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響

趙可惠，王靜，蘇永文，劉宇，張藝

目的：考察藏藥江孜沙棘對急性血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響。方法：60只大鼠隨機均勻分為空白對照組，模型對照組，復(fù)方丹參滴丸組，江孜沙棘低、中、高劑量組。預(yù)防性灌胃給藥，每天1次，連續(xù)給藥8天后，除空白對照組外，其余大鼠均采用頸部皮下注射鹽酸腎上腺素復(fù)加冰水浴的方法復(fù)制大鼠急性血瘀模型；腹主動脈采血，運用SA-6000自動血流變測試儀檢測各組大鼠的血液流變學(xué)指標。結(jié)果：與空白對照組比較，模型對照組大鼠血液流變學(xué)指標具有顯著性差異（P＜0.01或0.05）；而江孜沙棘低、中、高劑量組均可使急性血瘀證模型大鼠的全血黏度、紅細胞聚集指數(shù)等指標降至正常水平以下。結(jié)論：江孜沙棘可改善急性血瘀證大鼠血液流變學(xué)的異常，證明了藏醫(yī)藥經(jīng)典著作《晶珠本草》中所記載沙棘具有“益血”的功效。

藏藥；江孜沙棘；急性血瘀證；血液流變學(xué)

江孜沙棘系胡頹子科(Elaeagnacea)沙棘屬(Hippophae Linn)植物江孜沙棘H.rhamnoides L.subsp. gyantsensis Rousi的干燥成熟果實。藏藥經(jīng)典著作《晶珠本草》[1]將其分為大、中、小三種，根據(jù)本草考證，分別為云南沙棘H.rhamnoides subsp. yunnanensis Rousi、江孜沙棘H.rhamnoides L.subsp. gyantsensis Rousi和西藏沙棘H.tibetana Schlechtend.?！毒е楸静荨穂1]記載藏藥江孜沙棘果大如青稞，硬而干，金黃色，微油潤，益血。但是，目前有關(guān)江孜沙棘益血的藥效學(xué)研究尚未見報道。中醫(yī)理論認為，血瘀證是由各種原因所致的血液瘀滯、血流不暢的證候，其主要病機是心脈痹阻，脈管阻塞?，F(xiàn)代藥理研究表明，血瘀證存在血液流變學(xué)指標的改變（血液黏、濃、凝、聚）[2-4]。本實驗通過觀察江孜沙棘對急性血瘀證大鼠模型的血液流變學(xué)影響，進一步驗證其“益血”功效，為本品的臨床推廣應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 實驗動物

SPF級SD大鼠60只，雌雄各半，體重200-250 g。購自成都達碩生物科技有限公司，實驗動物生產(chǎn)許可證號為SCXK（川）2013-24。

1.2 實驗場地

本次實驗在成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院實驗動物觀察室進行，實驗動物觀察許可證號為SYXK（川）2009-124。實驗動物觀察室內(nèi)光照、溫度、濕度均適宜，通風條件良好，環(huán)境相對安靜。

1.3 受試藥物

江孜沙棘提取物：稱取江孜沙棘藥材粉末1000 g，加入15倍量水，煎煮二次，每次2 h，濾過，合并濾液，濃縮，制成每毫升含原藥材1.0 g的江孜沙棘提取物。復(fù)方丹參滴丸（國藥準字Z10950111，批號：130915，天士力制藥集團股份有限公司）。

1.4 實驗儀器

SA-6000自動血流變測試儀，北京賽科希德科技發(fā)展有限公司；TDZ5-WS1多管架自動平衡離心機，長沙湘儀離心機儀器有限公司；ELECTRONC BALANCE電子天平，上海浦春計量儀器有限公司；sartorius BSA124S電子天平，賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司。

1.5 實驗試劑

這個例子或許能夠佐證，《圖像學(xué)》中那些擬人形象方案，里帕即便采納的是視覺化圖像資源，也未必是他個人的實際觀察，而更可能去參考文學(xué)作品中“藝格敷詞式”描述。畢竟，“特征描述法”這種易于再現(xiàn)畫面的文字表達手段，不僅適用于古代的那些佚失無存的圖像作品，而且適用于當時那些受到熱議，卻囿于地理距離無法親往一睹的赫赫名作。

鹽酸腎上腺素注射液，國藥準字：H12020526，1 mL：1 mg，批號：1412021，天津金耀藥業(yè)有限公司；氯化鈉注射液，國藥準字：H51021158，500 mL/瓶，批號：M14110208，四川科倫藥業(yè)股份有限公司；水合氯醛，批號：20100614，成都市科龍化工試劑廠，用純水配成10%溶液供大鼠腹腔注射麻醉用；血流變專用清洗液-SAW，標準標號：Q/CPSKX0026-2014，批號：SAW-20141201，北京賽科希德科技發(fā)展有限公司；SAWZ-加樣針清洗維護液，標準標號：Q/CPSKX0026-2014，批號：SAWZ-20141201，北京賽科希德科技發(fā)展有限公司；肝素鈉一次性抗凝負壓采血管5 mL，批號：20141101，山東奧塞特醫(yī)療器械有限公司；一次性使用血樣采集針，批號：20141019，山東奧塞特醫(yī)療器械有限公司；注射器、灌胃針等。

2 實驗方法

2.1 動物分組及給藥

動物適應(yīng)性喂養(yǎng)4 d后，將雌雄各半的60只SD大鼠，按性別和體重隨機分為6組：空白對照組；模型對照組；復(fù)方丹參滴丸0.1 g．kg-1劑量組（約相當于臨床用量的10倍）；江孜沙棘提取物4.5、9.0、 18.0 g．kg-1劑量組（相當于臨床擬用量的5、10、20倍）；每組10只[5-6]。按照18 mL．kg-1體重灌胃（ig）給藥，江孜沙棘提取物各劑量組分別ig給予相應(yīng)濃度藥物；空白對照組和模型對照組ig給予等量生理鹽水。連續(xù)給藥8 d，每天1次，每3天稱量一次體體重。

2.2 動物造模

預(yù)防性連續(xù)給藥8 d，在末次給藥后30 min，除空白對照組外，其余各組采用鹽酸注射腎上腺素加冰水浴的方法復(fù)制急性大鼠血瘀模型，具體處理方法如下，大鼠頸背部皮下注射鹽酸腎上腺素0.8 mg．kg-1，注射2 h后，將大鼠均浸入0-2 ℃冰水中冰浴5 min，取出后用毛巾擦干大鼠毛皮上的水，放置電熱片旁烤干，2 h后再次頸背部皮下注射鹽酸腎上腺素0.8 mg．kg-1，禁食不禁水20 h[4]。

2.3 血液流變學(xué)指標檢測

次晨動物造模20 h后，應(yīng)用10%水合氯醛3 mL．kg-1腹腔注射麻醉后，用一次性抗凝負壓采血管腹主動脈采血，采血后輕輕震搖采血管，使血液與負壓管內(nèi)肝素鈉抗凝劑充分混勻。血樣采集后，室溫下靜止20 min，采用SA-6000自動血流變測試儀分別測定低切1 / S，5 / S，中切30 / S，高切200 / S四個切變率下的全血粘度、血漿粘度、相對粘度、紅細胞聚集指數(shù)、卡松粘度等血液流變學(xué)指標。

2.4 統(tǒng)計學(xué)處理

3 藏藥江孜沙棘血液流變學(xué)實驗結(jié)果

3.1 江孜沙棘提取物對急性大鼠血液黏度的影響

表1 江孜沙棘對全血粘度于血漿粘度的影響(±S, n=8)

表1 江孜沙棘對全血粘度于血漿粘度的影響(±S, n=8)

注：和模型組比較，**p＜0．01，*p＜0．05

組別全血粘度（s-1）1 5 30200血漿粘度（s-1）空白對照組103.86±10.3533.70±3.1813.53±1.487.84±0.914.61±1.74模型對照組122.90±11.45*38.26±3.74*15.27±1.51*8.51±0.932.95±0.28*復(fù)方丹參滴丸組51.57±7.11**19.13±2.27**9.28±0.88**5.94±0.824.03±0.22**江孜沙棘低劑量65.05±8.11**23.29±2.36**10.76±0.97**6.90±0.673.03±0.32江孜沙棘中劑量77.59±10.63**27.64±3.44**12.17±1.13**7.84±0.683.21±0.38江孜沙棘高劑量80.02±9.41**28.41±281**13.25±1.088.36±0.613.13±0.36

3.2 江孜沙棘提取物對急性大鼠血液流變學(xué)指數(shù)的影響

表2 江孜沙棘對血液流變學(xué)指數(shù)的影響 (±S , n= 8)

表2 江孜沙棘對血液流變學(xué)指數(shù)的影響 (±S , n= 8)

注：和模型組比較，**p＜0．01，*p＜0．05

卡松粘度空白對照組1.95±0.8225.49±9.9713.29±0.905.00±0.49模型對照組2.91±0.42*42.19±7.02*14.53±1.33*5.16±0.74復(fù)方丹參滴丸組1.47±0.14**12.79±1.24**8.77±1.17**4.38±0.56*江孜沙棘低劑量2.30±0.3321.71±3.67*9.48±1.29*4.90±0.56江孜沙棘中劑量2.32±0.4822.89±5.22**9.87±0.79**5.43±0.38江孜沙棘高劑量2.70±0.3225.86±4.46**9.56±0.62**5.84±0.43*組別全血高切相對指數(shù)全血低切相對指數(shù)紅細胞聚集指數(shù)

從表2可知，模型對照組與空白對照組比較，模型對照組全血高切相對指數(shù)、全血低切相對指數(shù)與紅細胞聚集指數(shù)均明顯高于空白對照組,差異具有顯著性,說明本次實驗的大鼠急性血瘀模型造模成功；復(fù)方丹參滴丸組的全血高切相對指數(shù)、全血低切相對指數(shù)、紅細胞聚集指數(shù)、與卡松粘度均低于模型對照組，差異明顯，具有顯著性；江孜沙棘低劑量組、江孜沙棘中劑量組、江孜沙棘高劑量組的全血低切相對指數(shù)、紅細胞聚集指數(shù)均明低于模型對照組，差異顯著，而給藥組的全血高切相對指數(shù)和卡松粘度與模型對照組比較偏高或無統(tǒng)計學(xué)差異。說明復(fù)方丹參滴丸與江孜沙棘均具有一定的活血化瘀作用。其中復(fù)方丹參滴丸能明顯改善瘀血狀況非常明顯，能使瘀血證大鼠血液流變學(xué)指數(shù)低于正常狀態(tài)，與模型對照組和空白對照組比較，均具有顯著差異；江孜沙棘組能明顯改善瘀血狀況明顯，能使血瘀證大鼠全血粘度低于正常狀態(tài)，與模型對照組合空白對照組比較，均具有顯著差異。

4 討論

急性大鼠血瘀模型是目前常用的動物模型，先給大鼠頸部皮下注射外源性鹽酸腎上腺素，然后冰水浴5 min，引起大鼠產(chǎn)生應(yīng)激性反應(yīng)，使體內(nèi)血管收縮，動脈血壓上升，交感神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生變，血液黏度升高及紅細胞聚集性增強，血液流變學(xué)指標發(fā)生變化，造成急性大鼠血瘀模型。研究表明，許多疾病的病理過程均與血液流變學(xué)指標的改變有關(guān)，應(yīng)用此模型，可以從血液流變性方面反映藏藥江孜沙棘提取物的作用特點[4]。

SD大鼠造模之后，全血粘度、全血高切相對指數(shù)、全血低切相對指數(shù)顯著增高，紅細胞聚集指數(shù)也明顯增強，說明大鼠急性血瘀模型造模成功。給藥組與模型對照組比較，江孜沙棘組的全血粘度、全血低切相對指數(shù)、紅細胞凝聚指數(shù)等指標明顯下降（P＜0.01或P＜0.05），表明江孜沙棘對SD大鼠急性血瘀模型的血液流變學(xué)異常具有明顯的改善作用。與陽性對照組對比，江孜沙棘低劑量部分血液流變學(xué)指標無明顯差異（P＞0.05），江孜沙棘中劑量、江孜沙棘高劑量血液流變學(xué)指標存在明顯差異（P＜0.05），表明江孜沙棘對SD大鼠急性血瘀模型的血液流變學(xué)異常的改善作用弱于復(fù)方丹參滴丸。

實驗結(jié)果表明，藏藥江孜沙棘具有藏醫(yī)院經(jīng)典著作《晶珠本草》記載的“益血”功效。隨著江孜沙棘劑量的增大，活血化瘀作用反而降低，這可能是隨著劑量的加大，導(dǎo)致藥物濃度過大，藥物在大鼠胃內(nèi)分布不均勻，吸收不完全導(dǎo)致。其“益血”功效的最佳劑量有待進一步研究。

[1] 帝瑪爾?丹增彭措.晶珠本草[M].上海：上?？萍汲霭嫔?2012.

[2] 姚旭.赤芍和川芎在血瘀證大鼠上的應(yīng)用[D].東北農(nóng)業(yè)大學(xué),2013.

[3] 李偉霞,黃美艷,唐于平,等.大鼠急性血瘀模型造模方法的研究與評價[J].中國藥理學(xué)通報,2011,27(12)：1761.

[4] 劉劍剛,徐鳳芹,史大卓,等.川芎赤芍提取物不同配比的活血化瘀作用研究[J].中藥新藥與臨床藥理,2005,16(5)：315.

[5] 朱詩塔,李新中,文曉麗,等.大黃不同炮制品活血化瘀作用的比較研究[J].藥學(xué)實踐雜志,2010,28(5)：354.

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（責任編輯：陳思敏）

Effects of Tibetan medicine Jiangzishaji on hemorheological changes in rats with acute blood stasis

/ZHAO Ke-hui, WANG Jing, SU Yong-wen, LIU Yu, ZHANG Yi//(College of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, Sichuan)

Objective:The main objective is to observe the effects of Jiangzishaji on hemorheology of rat with acute blood stasis.Method:Sixty rat were divided randomly into blank control group, model control group, compound Danshen dripping pills group, low dose group, middle dose group and high dose group of Jiangzishaji. The rats were orally administered with drugs once a day for 8 days. After the eighth day, the acute blood stasis was induced by subcutaneous injection of adrenaline hydrochloride and ice-water for rats except blank control group. Then blood was collected from abdominal aorta of rats and blood rheology index was detected using SA-6000 automatic blood rheology test apparatus.Result:Compared with blank control group, the hemorheological parameters of model group was significantly different (P＜0.01 or 0.05). However, the low, middle and high dose Jiangzishaji decreased the viscosity of whole blood and erythrocyte aggregation and other index of rats with acute blood stasis to less than normal.Conclusion:Jiangzishaji treat the abnormal hemorheology in rats with acute blood stasis and prove that Jiangzishaji has "beneficial blood" effect recorded in the Tibetan medical classics "Jing-Zhu Materia Medica".

Tibetan medicine; Jiangzishaji; acute blood stasis; hemorheology

R 285.5

A

1674-926X(2016)05-010-03

國家自然科學(xué)基金項目（81473428）

成都中醫(yī)藥大學(xué)民族醫(yī)藥學(xué)院，四川 成都 611137

趙可惠，在讀碩士研究生，主要從事民族醫(yī)學(xué)研究 Email：ccp182@163.com

張藝，研究員，博士生導(dǎo)師。主要從事民族藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究 Email：1175332408@qq.com。

2015-10-13