血清鱗狀細(xì)胞癌抗原和組織蛋白酶-D檢測(cè)在宮頸鱗癌診治中的應(yīng)用價(jià)值

王　攀　晉其云　王東紅　楊昌偉　鄭家深

(遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，貴州　遵義　563003)

血清鱗狀細(xì)胞癌抗原和組織蛋白酶-D檢測(cè)在宮頸鱗癌診治中的應(yīng)用價(jià)值

王攀晉其云1王東紅2楊昌偉鄭家深

(遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，貴州遵義563003)

〔摘要〕目的探討血清鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCCAg)和組織蛋白酶(Cath)-D水平檢測(cè)對(duì)宮頸鱗癌的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清中SCCAg和Cath-D的水平。分為宮頸鱗癌組35例；宮頸上皮內(nèi)瘤變組(CIN組)25例；慢性宮頸炎組25例。宮頸鱗癌組在術(shù)前、術(shù)后分別檢測(cè)血清SCCAg和Cath-D濃度，分析其對(duì)宮頸鱗癌預(yù)后的情況。CIN、慢性宮頸炎組僅檢測(cè)術(shù)前血清SCCAg和Cath-D水平，分析血清SCCAg和Cath-D水平與宮頸鱗癌臨床病理特征、手術(shù)療效的關(guān)系。結(jié)果宮頸鱗癌組術(shù)前血清SCCAg和Cath-D水平明顯高于CIN、慢性宮頸炎組(P=0.001，0.000)， 兩組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.432、0.321)。宮頸鱗癌組術(shù)后1年內(nèi)未復(fù)發(fā)患者動(dòng)態(tài)檢測(cè)SCCAg和Cath-D水平呈進(jìn)行性下降(P=0.02，0.04)。宮頸鱗癌組術(shù)前血清SCCAg和Cath-D水平與臨床分期、腫瘤體積、分化程度、間質(zhì)浸潤、盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等有關(guān)(P<0.05)；計(jì)算血清SCCAg和Cath-D診斷宮頸鱗癌及預(yù)測(cè)盆腔淋巴轉(zhuǎn)移的臨界值分別為0.95、3.21和17.33、20.25ng/L，ROC曲線下面積分別為0.91、0.78和0.95、0.90；同時(shí)對(duì)SCCAg和Cath-D進(jìn)行相關(guān)性分析，二者在宮頸鱗癌組織中表達(dá)呈顯著正相關(guān)。結(jié)論血清SCCAg和Cath-D檢測(cè)對(duì)宮頸鱗癌具有很高的診斷價(jià)值，聯(lián)合檢測(cè)對(duì)宮頸鱗癌術(shù)后療效、預(yù)后判斷及預(yù)測(cè)盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等方面具有更高參考價(jià)值。

〔關(guān)鍵詞〕宮頸鱗癌；鱗狀細(xì)胞癌抗原 ；組織蛋白酶D

宮頸癌中宮頸鱗癌居多〔1〕。目前應(yīng)用鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCCAg)和組織蛋白酶D(Cath-D)同時(shí)檢測(cè)對(duì)宮頸鱗癌診療的應(yīng)用價(jià)值國內(nèi)報(bào)道較少〔2，3〕，本文旨在檢測(cè)血清SCCAg和Cath-D水平對(duì)宮頸鱗癌診斷、術(shù)后療效觀察及預(yù)判轉(zhuǎn)移的應(yīng)用價(jià)值。

1資料與方法

1.1一般資料收集2009年1月至2011年12月本院病理活檢確診、住院并實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)手術(shù)治療的宮頸鱗癌老年患者35例為宮頸鱗癌組，年齡55～68歲，平均(60±2.1)歲；按照FIGO分期，其中IA2 期5例，IB1期8例，IB2期10例，ⅡA期12例。病理確診的宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)25例為CIN組，慢性宮頸炎25例為慢性宮頸炎組。所有病例均排除妊娠、支氣管囊腫、肺結(jié)核、牛皮癬及濕疹等其他疾病。組別間進(jìn)行年齡比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.215)。隨訪宮頸鱗癌組在手術(shù)后1、2、4、26、52 w分別檢測(cè)SCCAg和Cath-D水平，CIN組和慢性宮頸炎組僅在手術(shù)前檢測(cè)一次血清SCCAg和Cath-D水平。

1.2檢測(cè)方法靜脈抽血3 ml，3 000 r/min分離血清置于-80℃冷凍保存待檢。SCCAg和Cath-D采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)方法檢測(cè)，試劑由上海信裕生物科技有限公司提供，檢測(cè)儀器為荷蘭WellscanMK2酶標(biāo)儀，嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行檢測(cè)。

1.3結(jié)果判斷選擇本院體檢健康女性25例(經(jīng)過婦科檢查及宮頸刮片確診)檢測(cè)SCCAg和Cath-D水平，確定本次實(shí)驗(yàn)SCCAg和Cath-D的參考值，SCCAg的95%可信區(qū)間為0.1～1.5 ng/ml，≥1.5 ng/ml為陽性，Cath-D的95%可信區(qū)間為4.3～7.5 ng/L，≥7.5 ng/L為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS17.0軟件繪制ROC曲線，計(jì)算曲線下面積(AUC)和標(biāo)準(zhǔn)誤。AUC小于0.70表示準(zhǔn)確度較低，0.70～0.90為中等，0.90以上表示較高〔4〕。

2結(jié)果

2.1三組血清SCCAg和Cath-D水平比較宮頸鱗癌組術(shù)前SCCAg和Cath-D水平顯著高于CIN組及慢性宮頸炎組(P=0.001、0.000)，而CIN組與慢性宮頸炎組SCCAg和Cath-D水平比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.432、0.321)。見表1。

2.2宮頸鱗癌組手術(shù)前后血清SCCAg和Cath-D水平變化隨訪1年未復(fù)發(fā)的宮頸鱗癌組，在手術(shù)后1、2、4、26、52 w分別檢測(cè)SCCAg和Cath-D水平，其水平呈進(jìn)行性下降，表明與宮頸鱗癌療效和預(yù)后密切相關(guān)。見表2。

2.3宮頸鱗癌組術(shù)前血清SCCAg和Cath-D水平與不同病理參數(shù)的關(guān)系手術(shù)前血清SCCAg和Cath-D水平與臨床分期、腫瘤體積、分化程度、間質(zhì)浸潤深度、是否有脈管癌栓、宮旁轉(zhuǎn)移、盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等均明顯相關(guān)(P<0.05)，且與臨床分期、分化程度、間質(zhì)浸潤深度存在一定的線性相關(guān)性(P<0.05)。見表3。

表1　三組血清SCCAg與Cath-D檢測(cè)水平比較(四分位數(shù))

表2　宮頸鱗癌組手術(shù)前后血清SCCAg和Cath-D水平

2.4應(yīng)用ROC曲線分析SCCAg和Cath-D水平對(duì)宮頸鱗癌的診斷價(jià)值及預(yù)測(cè)盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性能評(píng)價(jià)依據(jù)敏感度與特異度之和最大化原則計(jì)算血清SCCAg和Cath-D診斷宮頸鱗癌及預(yù)測(cè)盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的臨界值，為0.95 ng/ml、3.21 ng/ml和17.33 ng/L、20.25 ng/L，敏感度為0.76、0.66和0.91、0.89，特異度為0.85、0.87和0.89、0.90，陽性預(yù)測(cè)值為0.84、0.55和0.87、0.72，陰性預(yù)測(cè)值為0.78、0.90和0.90、0.95。SCCAg診斷宮頸鱗癌準(zhǔn)確度較高，預(yù)測(cè)盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移準(zhǔn)確度為中等，而Cath-D對(duì)宮頸鱗癌診斷和預(yù)測(cè)盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的準(zhǔn)確度均較高。見表4。

2.5對(duì)SCCAg和Cath-D水平進(jìn)行相關(guān)性分析對(duì)宮頸鱗癌患者在手術(shù)前和手術(shù)后1、2、4、26、52 w的SCCAg和Cath-D水平進(jìn)行相關(guān)性分析，二者具有分好的相關(guān)性。見表5。

表3　宮頸鱗癌組不同病理參數(shù)的SCCAg與Cath-D術(shù)前檢測(cè)結(jié)果(四分位數(shù))

1)線性趨勢(shì)檢驗(yàn)

表4　血清SCCAg與Cath-D診斷宮頸鱗癌及預(yù)測(cè)盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的AUC、標(biāo)準(zhǔn)誤、P值及95%可信區(qū)間

表5　宮頸鱗癌組血清SCCAg和Cath-D手術(shù)前后的

3討論

宮頸鱗癌的病因尚不完全清楚，國內(nèi)外認(rèn)為其發(fā)生發(fā)展是多基因共同作用的結(jié)果，相關(guān)致癌因子通過各種物質(zhì)作用機(jī)制激活原發(fā)基因，使細(xì)胞增殖和凋亡紊亂〔5〕。目前臨床對(duì)宮頸鱗癌的診斷尚無統(tǒng)一及規(guī)范的腫瘤標(biāo)志物〔6〕，因此尋找早期診斷和預(yù)測(cè)的標(biāo)志物是提高宮頸癌診療的關(guān)鍵。而SCCAg存在于鱗狀細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)，是腫瘤相關(guān)抗原TA-4的亞單位，作為一種腫瘤標(biāo)志物與各種器官的鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)〔7〕。當(dāng)鱗狀細(xì)胞異常增生時(shí)，就會(huì)被動(dòng)表達(dá)SCCAg并釋放到人體外周血中，誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T細(xì)胞的免疫活性，激發(fā)機(jī)體對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答〔8〕。Cath-D是一種52 kD的含天冬氨酸的糖蛋白，是存在于細(xì)胞內(nèi)溶酶體中物質(zhì)，有分解細(xì)胞內(nèi)蛋白、激活細(xì)胞內(nèi)酶原和激素的作用，當(dāng)腫瘤組織細(xì)胞代謝加強(qiáng)時(shí)，隨著腫瘤的發(fā)展Cath-D也會(huì)明顯升高〔9〕，有研究顯示〔10〕，在多種腫瘤患者體內(nèi)的Cath-D均有高度表達(dá)。

SCCAg和Cath-D水平在宮頸鱗癌組術(shù)前顯著高于正常宮頸組及慢性宮頸炎組，可能是因?yàn)槭中g(shù)摘除腫瘤瘤體后，消除了腫瘤分泌源〔11〕直接導(dǎo)致結(jié)果下降。因此，血清SCCAg和Cath-D水平測(cè)定可以作為診斷宮頸鱗癌重要指標(biāo)，同時(shí)也是手術(shù)療效和預(yù)后判定的標(biāo)志。

資料還顯示，血清SCCAg和Cath-D水平表達(dá)與腫瘤臨床分期、分化程度、瘤體大小、腫瘤浸潤深度、脈管癌栓及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有直接關(guān)系，與Gadducci等〔12〕、丁洪慧等〔13〕報(bào)道高度一致。其機(jī)制如下：①可能是宮頸鱗癌侵犯鱗狀細(xì)胞基層，腫瘤中的SCCAg容易通過血管、淋巴管進(jìn)入外周血導(dǎo)致水平增高；隨著其臨床分期的上升，SCCAg水平也不斷升高；同時(shí)腫瘤細(xì)胞在惡性生長時(shí)期，鱗狀細(xì)胞基因表達(dá)和調(diào)控失常，受到浸潤生長及分化程度的影響，參與凋亡調(diào)控的細(xì)胞高表達(dá)SCCAg，使得癌細(xì)胞通過抑制細(xì)胞凋亡途徑，而對(duì)機(jī)體相關(guān)的細(xì)胞自殺機(jī)制產(chǎn)生抵抗性有關(guān)〔14〕。②Cath-D水平同樣與腫瘤臨床分期、分化程度、瘤體大小、腫瘤浸潤深度及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移直接相關(guān)，可能是Cath-D隨腫瘤周圍組織代謝升高，同時(shí)抑制了自噬體的活性，使得Cath-D的表達(dá)隨著腫瘤病情加重而不斷升高，Cath-D同時(shí)刺激癌細(xì)胞的生長，降解基膜和結(jié)締組織、破壞宿主細(xì)胞外基質(zhì)天然屏障，有利于腫瘤細(xì)胞侵襲，使得Cath-D纖溶酶原的水解片段有抑制血管生成作用，在缺氧條件下導(dǎo)致的環(huán)氧化酶2的表達(dá)使得血管密度增加〔15〕。SCCAg和Cath-D二者在宮頸鱗癌中的表達(dá)存在高度正相關(guān)，說明SCCAg和Cath-D在宮頸鱗癌中的發(fā)生發(fā)展、分化程度、侵襲、轉(zhuǎn)移等過程中具有相互調(diào)控、誘導(dǎo)或信息傳遞的協(xié)同作用，具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。本研究表明，SCCAg診斷宮頸鱗癌價(jià)值較高，預(yù)測(cè)盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移價(jià)值中等，而Cath-D對(duì)宮頸鱗癌診斷和預(yù)測(cè)盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移都具有很高的價(jià)值。

4參考文獻(xiàn)

1董小艷.50例年輕宮頸癌患者的臨床及病理特點(diǎn)〔J〕.中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2011；23：141-2.

2陳桂，黃德琪.宮頸癌患者血清組織蛋白酶D檢測(cè)及臨床意義〔J〕.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013；23：3239-40.

3劉謝華.COX-2、MMP-9與SCCAg聯(lián)合檢測(cè)在宮頸癌早期診斷中的價(jià)值〔J〕.中醫(yī)臨床研究，2014；20：131-3.

4王樂三.SPSS在醫(yī)學(xué)科研中的應(yīng)用〔M〕.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，生物醫(yī)藥出版分社，2007：50.

5顧曉荔，孟躍進(jìn)，楊亞培，等.β-Catenin在宮頸鱗癌組織中的表達(dá)及意義〔J〕.中國婦幼保健，2013；28(5)：481-3.

6高寶榮，趙桂玲，張虹，等.SCC-Ag對(duì)早期宮頸癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移評(píng)估價(jià)值〔J〕.中國腫瘤臨床，2010；37(11)：630-3.

7李衛(wèi)鵬，張蕾蕾.鱗狀細(xì)胞癌抗原研究進(jìn)展〔J〕.放射免疫分析雜志，2010；23(1)：34-7.

8Homma S，Harada M，Yano H，etal.Identification of squamous cell carcinoma antigen derived peptides having the capacity of inducing cancer reactive CTLs in HLA-A24 + cancer patients〔J〕.Int J Oncol，2006；29(3)：577-87.

9王曉云，張凡，陳江平，等.自噬活性相關(guān)蛋白Cathepsin-D LC3表達(dá)與宮頸鱗狀細(xì)胞癌新輔助化療耐藥關(guān)系研究〔J〕.中國婦幼保健，2012；27(4)：609-11.

10Mebratu YA，Dickey BF，Evans C.The BH3-only protein Bik/Blk/Nbk inhibits unclear translocation of activated ERK1/2 to mediate IFN-gamma-induced cell death〔J〕.J Cell Biol，2008；183(3)：429.

11孔雙燕.鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原檢測(cè)在宮頸癌中的臨床意義〔J〕.浙江實(shí)用醫(yī)學(xué)，2009；14(1)：51-2.

12Gadducci A，Tana R，F(xiàn)anucchi A，etal.Biochemical prognostic factors and risk of relapses in patients with cervical cancer〔J〕.Gynecol Oncol，2007;107 (Suppl 1)：S23-6.

13丁洪慧，劉暉，梁美蓉，等.鱗狀細(xì)胞癌抗原在宮頸癌中的臨床應(yīng)用〔J〕.中國婦幼保健，2009；24(26)：3757-9.

14黃玲莎，李美琴，黃文成.血清鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原在宮頸癌中的表達(dá)及應(yīng)用〔J〕.中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2011；21(16)：1904-6.

15Myo K.Prediction of occult cervical lymph node metastasis in patients with stageI-II squamous cell carcinoma of the oral cavity〔J〕.Kokubyo Gakkai Zasshi，2006；73(1)：100-6.

〔2015-03-10修回〕

(編輯苑云杰)

〔中圖分類號(hào)〕R737.33

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)11-2680-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.11.051

1遵義婦女保健兒童醫(yī)院兒童保健科

2遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦科

第一作者：王攀(1975-)，男，副教授，主要從事腫瘤標(biāo)志物的研究。