盧金霞，王金慧，周倩宇，朱秀春，張玉彥，周學章，*

(1.寧夏大學生命科學學院，西部特色生物資源保護與利用教育部重點實驗室，寧夏銀川 750021；2.福建農(nóng)林大學動物科學學院，福建福州 350000；3.寧夏智弘生物科技有限公司，寧夏銀川 750021)

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晶維他復合液體維生素對雞理化性能的影響

盧金霞1，王金慧1，周倩宇2，朱秀春3，張玉彥3，周學章1，3*

(1.寧夏大學生命科學學院，西部特色生物資源保護與利用教育部重點實驗室，寧夏銀川 750021；2.福建農(nóng)林大學動物科學學院，福建福州 350000；3.寧夏智弘生物科技有限公司，寧夏銀川 750021)

摘要：本試驗旨在研究復合維生素對雞機體免疫能力、生長指標、新城疫抗體、血液生化指標、體尺性狀的影響。試驗選用1日齡雞200只稱重后隨機分為5個處理組，每組40只，分別為A組(即42 d全給藥組)、B組(即隔天給藥組)、C組(即前21 d給藥組)、D組(即后21 d給藥組)和對照E組(即42 d全飲水組)，試驗周期為42 d，E組自由飲水，A、B、C和D組在飲水中添加不同濃度的維生素。結(jié)果表明，B組、C組和D組雞較A組、E組雞的各項指標均有一定程度的提高，但是以B組效果較為明顯，說明合理飼喂晶維他復合液體維生素可顯著提高雞的理化特性，但長期過量補充維生素會影響機體發(fā)育，降低機體的免疫力。

關(guān)鍵詞：復合液體維生素；雞；免疫器官指數(shù)

在散養(yǎng)的條件下，畜禽能夠采食大量的青飼料，一般不會出現(xiàn)維生素缺乏的情況。但在現(xiàn)代集約化、高密度的籠養(yǎng)時，隨著以生長為主要育種目標的肉雞育種技術(shù)的發(fā)展，肉雞的集約化飼養(yǎng)以及各種環(huán)境應(yīng)激因子導致肉雞免疫力下降，發(fā)病率越來越高[1]。由于肉雞常用配合飼料原料中維生素含量較低，且不穩(wěn)定，易受加工、貯藏等外界環(huán)境的影響，僅依靠飼料中的天然來源已不能滿足動物的需要，會出現(xiàn)維生素缺乏問題，必須補充各種維生素。維生素按其性質(zhì)可分為脂溶性維生素和水溶性維生素，脂溶性維生素包括維生素A、D、E和K，參與動物體內(nèi)的多種生化反應(yīng)，維持機體組織、細胞功能和結(jié)構(gòu)的完整性。維生素 A 是雞生長發(fā)育、生產(chǎn)、視覺及皮膚黏膜完整性不可缺少的一類生物活性物質(zhì)，是雞體內(nèi)多種代謝酶的輔酶和輔基的組成成分，具有促進和調(diào)節(jié)代謝的重要作用。雞維生素 A 缺乏癥是常見的多發(fā)病，蛋雞更是多發(fā)，尤其是在集約化飼養(yǎng)條件下[2]。維生素D和鈣對肉雞具有重要的生理作用， 維生素D可促進Ca吸收和維持Ca平衡，兩者聯(lián)合應(yīng)用可有效降低骨質(zhì)疏松、腸和大腸癌的發(fā)病率[3]。維生素D是一種類固醇激素，其在血液中穩(wěn)定活性物質(zhì)是25-羥維生素D[25(OH)D]，主要通過對骨、腎、腸等靶器官的作用來維持鈣、磷水平的穩(wěn)定[4]。脂溶性維生素中除維生素K可由動物消化道合成足夠的量外，其他脂溶性維生素都必須從外界攝入。脂溶性維生素對雞生長、骨骼發(fā)育、繁殖、抗應(yīng)激、提高免疫力、改善蛋殼色澤和強度等各方面都直接或間接地發(fā)揮作用。由于維生素A、D、E存在易氧化分解的特性，本試驗選自乳化技術(shù)研制成的復合液體維生素ADE(又稱晶維他)添加在雞飲水中，以觀測其對雞理化特性的影響，為復合脂溶性維生素在畜牧生產(chǎn)中的科學應(yīng)用提供參考。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗動物及飼糧試驗選用健康、體重相近的1日齡雞200只，稱重后隨機分為5個處理組，每組40只，試驗期42 d。雞采用涂塑雞籠飼養(yǎng)。自動控溫，試驗雞自由采食，自由飲水，各組的試驗條件保持一致?；A(chǔ)日糧組成為(%)：玉米52.70、豆粕40.00、葵籽油3.00、石粉1.10、磷酸氫鈣1.90、食鹽0.37、蛋氨酸0.19、賴氨酸0.05、微量元素預(yù)混劑0.50、維生素預(yù)混劑0.20。飼料營養(yǎng)水平為(%)：代謝能12.71 MJ/ kg，粗蛋白質(zhì)21.37、鈣1.08、總磷0.62、賴氨酸1.25、蛋氨酸0.54。預(yù)混料可為每kg日糧提供：鐵80 mg，鋅80 mg; 錳80 mg，銅8 mg，碘0.35 m g，硒0.15 mg，維生素E 15 IU，維生素K 2.2 mg，維生素B1 1.5 mg，維生素B2 8.0 mg，維生素B6 2.5 mg，維生素B12 0.011 mg，煙酸44 mg，泛酸11 mg，葉酸0.9 mg，生物素0.11 mg，膽堿550 mg。飲水中晶維他按試驗設(shè)計添加，每1 000 mL晶維他復合液體維生素產(chǎn)品成分為：維生素A 1 300萬IU，維生素D3 350萬IU，維生素E 3 500 mg，維生素B1 2 000 mg，維生素B6 1 200 mg，維生素C 4 000 mg，維生素K3 800 mg，泛酸鈣4 000 mg，精氨酸500 mg，賴氨酸500 mg。

1.1.2飼養(yǎng)管理試驗前對雞舍及周邊環(huán)境、試驗用具進行徹底消毒處理。試驗雞采用單層籠養(yǎng)，試驗期內(nèi)控制溫度，濕度，光照和自然通風，在1 d～3 d雞舍每天23 h光照，溫度33℃。之后，雞舍溫度保持24℃恒定不變。自由采食、飲水，按常規(guī)免疫程序免疫。

1.1.3試劑和儀器設(shè)備印度墨汁，上海鈺博生物科技有限公司產(chǎn)品；1.0 g/L Na2CO3溶液;生理鹽水;721 分光光度計;電子天平;微量取樣器;全自動生化分析儀。

1.2方法

1.2.1生長性能指標每7 d稱重，計算試驗雞平均日增重、平均日采食量及料重比。計算公式：平均日增重=(試驗期末平均體重-試驗期初平均體重)/試驗天數(shù)平均日采食量=(配料總數(shù)-所剩飼料)/(試驗天數(shù)×每組試驗雞數(shù))

1.2.2免疫器官指數(shù)測定在21和42日齡時，分別在每重復組隨機抽取1、2只雞(每處理組共4、8只)，稱重后屠宰，取胸腺、脾臟和法氏囊稱重，測定免疫器官指數(shù)。測定公式：免疫器官指數(shù)(g/kg)=免疫器官重(g)/體重(kg)。

1.2.3單核-巨噬細胞吞噬指數(shù) 應(yīng)用碳廓清試驗方法進行測定。試驗進行至21日齡時，從各處理組中選3只體重接近于組內(nèi)平均體重的肉雞稱重。印度墨汁稀釋后，每只雞翅靜脈注射劑量為2 mL/kg。2 min(T2)和10 min(T10)后靜脈取血50 μL，按1∶150比例稀釋至1.0 g/L Na2CO3溶液中，600 nm波長處測OD值，1.0 g/L Na2CO3溶液為空白對照。取肝臟和脾臟稱重，按如下公式計算碳廓清指數(shù)K值和吞噬指數(shù)a值。

碳廓清指數(shù) K=(lg OD2-lg OD10)/(t2-t1)

吞噬指數(shù) a=體重/(肝重+脾重)×K1/3

其中,OD2表示 2 min 時測得的光密度值；OD10表示 10 min 時測得的光密度值。

1.2.4脛骨特性血清樣品的采集及處理：試驗第42天，每個處理組中隨機抽取6只雞，翅靜脈采血10 mL， 4℃、3 000 r/min離心制備血清，置-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

脛骨樣品的采集及處理：試驗第42天，每個處理組中隨機抽取6只雞，摘取左側(cè)脛骨并剔除其上的筋膜、肌肉等組織，保存骨膜和軟骨帽完整無損后，分裝，置-20℃保存。測脛骨鮮重、長度、直徑、體積、脫脂干骨重和脛骨粗灰分。脛骨鮮重：生理鹽水清洗，濾紙吸干脛骨表面水分，脛骨稱量。

脛骨脫脂重：用骨鉗將骨樣(未解凍的鮮樣)從中間1/2處剪開，使骨髓外露，用脫脂紗布包裹脛骨，浸泡于酒精和苯(2∶1)溶液中96 h，待酒精和苯完全揮發(fā)后，放入105℃烘箱中，烘干至恒重，得到脛骨脫脂重。粗灰分含量: 指粗灰分重占脫脂干重的百分比。

1.2.5新城疫抗體檢測翅下靜脈采血3 mL～5 mL，制成1%的紅細胞懸液。生理鹽水將抗原倍比稀釋至第11孔后，將紅細胞懸液加入96孔板(12孔為對照，無抗原)，37℃靜置30 min后觀察結(jié)果，選取合適的抗原血凝效價。25 μL生理鹽水將血樣倍比稀釋至第10孔后，將4單位抗原加入96孔板(1至11孔)，微量振蕩器上振蕩2 min，37℃靜置30 min，然后在96孔板第1至12孔中分別加入25 μL紅細胞懸液，靜置30 min，觀察結(jié)果。

1.2.6血液生化指標測定試驗動物空腹翅靜脈采血2 mL～3 mL，3 800 r/min離心20 min，制備血清，全自動生化分析儀測定血漿各項生化指標。

1.2.7數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學處理，數(shù)據(jù)用“平均值±標準差”表示，應(yīng)用ANOVA進行方差分析統(tǒng)計，顯著水平為P<0.05。

2結(jié)果

2.1肉雞生長性能的測定

由表1、2可知，B組的日增重、日采食量和肉料比均比其他各組的高，說明B組飼喂方式下雞攝入的維生素量較合適。由表2可知，B組的雞生長最好。A組前期生長好，后期由于維生素補充過多，造成維生素中毒，因此至后期體重增長越來越緩慢，生長最差。C組生長情況略優(yōu)于D組。

2.2雞免疫器官指數(shù)的測定

由表3可知，復合液體維生素對雞的肝臟指數(shù)無顯著影響；復合液體維生素對雞的脾臟指數(shù)無顯著影響，但B組與E組之間差異顯著(P<0.05)；復合液體維生素對法氏囊指數(shù)有影響，E組與A組、B組、C組之間均差異顯著，且法氏囊指數(shù)隨雞維生素攝入量的增加而降低。表3說明，復合液體維生素對雞免疫器官指數(shù)有一定程度的影響，但均未達到顯著水平。法氏囊是鳥類特有的中樞免疫器官[5]。由表3可知，C組雞免疫器官發(fā)育較好。

表1　復合液體維生素對42 d雞體重的影響

表2　復合液體維生素對42 d雞生長性能的影響

表3　復合液體維生素對雞免疫器官指數(shù)的影響

2.3雞單核-巨噬細胞吞噬指數(shù)

A～E組的吞噬指數(shù)分別為7.25±0.22、14.05±2.19、10.48±2.10、10.34±0.42、7.99±1.74。由以上數(shù)據(jù)可知，復合液體維生素對雞單核-巨噬細胞吞噬指數(shù)有顯著影響，B組、E組與A組之間存在顯著差異(P<0.05)。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因可能是A組雞維生素攝入過量，出現(xiàn)一定程度的中毒癥狀。C組與D組之間無顯著性差異。

2.4雞脛骨特性

由表4可知，B組(隔天組)與其余四組相比，脛骨鮮重、脫脂干骨重、脛骨體積、直徑和長度均有明顯提高，說明復合液體維生素對雞脛骨鮮重、脫脂干骨重、脛骨體積、直徑和長度均有促進作用。

2.5新城疫抗體檢測

A～E組的抗體效價分別為6.44±1.01、7.33±1.32、6.22±1.99、7.67±1.58、7.22±1.20。新城疫病毒屬于副黏病毒科中的禽腮腺炎病毒屬[6]。由此可知，B組和D組的抗體效價相對較高，說明復合液體維生素ADE提高了B組、D組雞產(chǎn)生抗體的濃度，提高了雞的免疫能力。

2.6血液生化指標測定

由表5可知，就谷丙轉(zhuǎn)氨酶而言，A組與B組之間差異顯著(P<0.05)；B組和E組之間差異極顯著(P<0.01)。就谷草轉(zhuǎn)氨酶而言，B組與C組之間差異顯著(P<0.05)；B組與D組之間差異顯著(P<0.05)；B組與E組之間差異極顯著(P<0.01)。而各組堿性磷酸酶之間沒有顯著差異。當組織細胞受損時，細胞膜通透性增大，組織中酶釋放進入血液導致血清酶活升高[7]。由表5可知，A組雞組織細胞受損，攝入維生素過量。就乳酸脫氫酶而言，A組與C組之間差異顯著(P<0.05)；A組與E組之間差異極顯著(P<0.01)；B組與C組之間差異顯著(P<0.05)；B組與E組之間差異極顯著(P<0.01)；D組與E組之間差異顯著(P<0.05)。

由表6得知，各組總蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比和總膽固醇之間均有差異，但差異不顯著。其中，B組白蛋白和總蛋白含量均比其他組高，說明B組雞攝入維生素的量并未引起雞的不適，為雞補充了維生素和氨基酸。研究認為營養(yǎng)不良時，血液總蛋白和白蛋白會降低，本試驗中B組雞攝入維生素量為雞提供了充足的營養(yǎng)。就尿素而言，A組和C組之間差異顯著(P<0.05)；A組與E組之間差異極顯著(P<0.01)。就尿酸而言，A組與C組之間差異極顯著(P<0.01)；B組與C組之間差異極顯著(P<0.01)；B組與D組之間差異顯著(P<0.05)；C組與D組之間差異極顯著(P<0.01)；C組與E組之間差異顯著(P<0.05)；D組與E組之間差異極顯著(P<0.01)。

3討論

3.1復合液體維生素對雞脛骨特性的影響

體尺性狀是動物活體測定的數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)準確且操作簡單方便，各性狀在一定的日齡內(nèi)比較穩(wěn)定[8]，體尺性狀是否可作為家禽體內(nèi)鈣營養(yǎng)狀況的反應(yīng)指標還未見報道，但已有研究表明體尺性狀與生產(chǎn)性能、屠體性狀等都有很大的相關(guān)性[9-11]。藥物的劑量是決定療效的重要條件之一，劑量不同，產(chǎn)生的效果也有差異[12]。大量研究表明：維生素ADE缺乏或過量均會導致動物生產(chǎn)性能下降。Scott M L等[13]指出，過多攝入維生素A的癥狀之一就是生長速度減慢，體重降低。但A組的脛骨鮮重、脫脂干骨重、脛骨體積、直徑和長度均比其他組低，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因為A組雞復合維生素攝入量過多，出現(xiàn)一定程度的中毒癥狀。

表4　復合液體維生素對42 d雞體尺性狀的影響

表5　復合液體維生素對雞血漿酶活性的影響

表6　復合液體維生素對雞血漿有機物含量的影響

3.2復合液體維生素對雞血液生化指標的影響

血清生化指標能反映出動物機體代謝功能等的狀態(tài)，一般情況下，動物機體自身可以進行自我調(diào)節(jié)，從而保持其指標的穩(wěn)定。如果組織細胞的通透性改變或者動物機體的新陳代謝機能改變，將直接導致血液生化指標的改變[14]。ALT、AST主要存在于組織細胞內(nèi)，且心臟、肝臟中活性最高，是反映肝臟和心臟機能的重要指標[15]。谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶參與機體內(nèi)轉(zhuǎn)氨基作用，其活性的高低反映了蛋白質(zhì)合成和分解代謝的狀況[16]。在正常情況下，血清中正常轉(zhuǎn)氨酶活性值較小。當組織中毒發(fā)生病變或者受損傷的組織范圍較大，可引起血清中這兩種酶的濃度上升或活性突然持續(xù)性增強。由表5可知，A組雞攝入維生素過量，出現(xiàn)中毒癥狀。

乳酸脫氫酶(LDH)能可逆的催化乳酸與丙酮酸之間的轉(zhuǎn)化，還是機體抗應(yīng)激能力的指標。在相同應(yīng)激作用下，個體 LDH水平越高，表明肌肉代謝水平越高，抗應(yīng)激能力就越弱[13]。血液ALP活性高低反映了動物的生長狀況，因其為具有遺傳標記的同工酶，其活性高低可以反映生長速度和生產(chǎn)性能[17]。血清中堿性磷酸酶主要由成骨細胞產(chǎn)生并釋放，與骨組織的生長密切相關(guān)，一方面反映成骨細胞活性及骨的生成狀況，另一方面反映鈣、磷代謝情況。 此外，它還參與脂肪代謝，因此堿性磷酸酶活性可部分反映動物的生長狀況[18]。由表5可知，A組與C組堿性磷酸酶高于其余各組，說明前期補充維生素對雞的生長還是具有促進作用的。血清總蛋白含量與機體健康狀況密切相關(guān)，是衡量機體免疫功能的重要指標。血清總蛋白含量降低表明肝功能發(fā)生障礙[19]。由表6可知，B組總蛋白含量最高，E組最低，說明維生素ADE提高了雞的免疫功能。尿酸(UA)是禽類嘌呤代謝的終產(chǎn)物，其含量的多少與禽肝腎功能正常有直接關(guān)系。尿酸含量過高，則肝腎功能異常。由表6可知，C組肝腎功能異常。

本研究中使用的藥物晶維他采用自乳化技術(shù)研制而成。自乳化藥物傳遞系統(tǒng)是指在胃腸道內(nèi)或在環(huán)境溫度(通常指體溫37℃)及溫和攪拌的情況下乳劑的藥物遞給方式。通常形成粒徑小于5 μm的微乳。目前復合維生素多以固體小顆粒形式摻于基礎(chǔ)日糧中，既難保證各維生素之間混合均勻，又難保證基礎(chǔ)日糧和復合維生素混合均勻。而晶維他復合液體維生素則克服了這些缺點，復合液體維生素不僅使用方便、吸收好，而且因其使用自乳化技術(shù)在體內(nèi)吸收快。本試驗中所飼喂的復合液體維生素均是現(xiàn)用現(xiàn)配，此方法避免了維生素因各種因素所引起的降解以及實驗動物攝入量的不準確。飲水中添加復合液體維生素ADE對各組雞生長性能、免疫器官指數(shù)、單核-巨噬細胞吞噬指數(shù)、脛骨特性、新城疫抗體、血液生化指標均有不同程度的影響，但以隔天給藥效果最明顯，說明合理飼喂晶維他可提高雞的理化特性。

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Effects of Zoo Vita Plus Multivitamin on Physiological and Biochemical Properties of Boilers

LU Jin-xia1, WANG Jin-hui1, ZHOU Qian-yu2, ZHU Xiu-chun3, ZHANG Yu-yan3, ZHOU Xue-zhang1.3

(1.CollegeofLifeScience,KeylabofMinistryofEducationforProtectionandUtilizationofSpecialBiologicalResourcesinWesternChina,NingxiaUniversity,Yinchuan,Ningxia, 750021,China；2.CollegeofAnimalScience,FujianAgricultureandForestryUniversity,Fuzhou,Fujian,350000,China；3.NingxiaZoohanceBiotechCo,Ltd. ,Yinchuan,Ningxia, 750021,China)

Abstract:This experiment was to study the effects of compound liquid vitamins on immune ability, growth indexes, Newcastle disease antibodies, blood biochemical indexes and body measurements of broilers. 200 one-day old broilers were randomly divided into five groups, each group 40, respectively in group A( taking drug 42 days) and group B(taking drug every other day), group C(taking drug first 21 days), group D (taking drug last 21 days) and normal group E(only drinking water), trial period for 6 weeks. The chicks in A, B, C and D groups were given with Zoo Vita Plus Multivitamin of different concentrations in the water. The results showed that compered to group A and group E, all the indexes in group B, group C and group D were higher, however, these indexes in group B are the best. The results illustrated that long-term vitamin supplements can affect the development of chicks,leading to lower immunity,and proper usage and dosage are recommended.

Key words:compound liquid vitamins; broiler; immune organ indexes

收稿日期：2015-11-30

基金項目：大學生創(chuàng)新項目(2015SK04)

作者簡介：盧金霞(1990-)，女，河南商丘人，碩士研究生，主要從事營養(yǎng)與免疫調(diào)控研究。 *通訊作者

中圖分類號:S852.2

文獻標識碼:A

文章編號:1007-5038(2016)06-0063-05