涂宜強(qiáng)，簡(jiǎn)永利，高永安

(溫州科技職業(yè)學(xué)院，浙江溫州 325006)

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陜西省某羊場(chǎng)簡(jiǎn)陽(yáng)大耳山羊球蟲(chóng)感染情況調(diào)查及種類鑒定

涂宜強(qiáng)，簡(jiǎn)永利，高永安

(溫州科技職業(yè)學(xué)院，浙江溫州 325006)

摘要：為了解陜西省某簡(jiǎn)陽(yáng)大耳山羊場(chǎng)球蟲(chóng)種類和感染情況，采集不同年齡段簡(jiǎn)陽(yáng)大耳山羊新鮮糞便55份，用形態(tài)學(xué)方法并結(jié)合麥克馬斯特蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)法(McMaster's method)對(duì)該場(chǎng)簡(jiǎn)陽(yáng)大耳山羊球蟲(chóng)進(jìn)行種類鑒定和感染情況調(diào)查。結(jié)果表明，大耳山羊球蟲(chóng)總感染率為92.7%，其中3月齡～7月齡、10月齡～12月齡、3歲山羊球蟲(chóng)檢出率分別為100%、90%和86.7%，各年齡段平均OPG值為3 300、1 050、854。共鑒定出8種山羊球蟲(chóng)，其中阿氏艾美耳球蟲(chóng)(Eimeriaarloingi)、雅氏艾美耳球蟲(chóng)(E.ninakohlyakimovae)和艾氏艾美耳球蟲(chóng)(E.alijevi)為該羊場(chǎng)優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種。

關(guān)鍵詞：大耳山羊；球蟲(chóng)；種類;感染

山羊球蟲(chóng)病是由艾美耳科(Eimeriidae)艾美耳屬(Eimeria)球蟲(chóng)寄生于腸道上皮細(xì)胞內(nèi)而引起的一種寄生性原蟲(chóng)病[1]，也是山羊最為常見(jiàn)、危害最為嚴(yán)重的疾病之一?？筛腥旧窖虻那蛳x(chóng)種類眾多，分布廣泛。球蟲(chóng)種類的鑒定主要依據(jù)卵囊大小、形態(tài)、形狀指數(shù)等形態(tài)學(xué)特征[2]。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，已經(jīng)確定寄生于山羊的球蟲(chóng)有13個(gè)種[3]，其中致病力最強(qiáng)的為雅氏艾美耳球蟲(chóng)(Eimerianinakohlyakimovae)，其次為阿氏艾美耳球蟲(chóng)(E.arloingi)。有研究表明，山羊感染球蟲(chóng)后常出現(xiàn)消瘦、貧血、下痢、發(fā)育遲緩等癥狀，本病對(duì)羔羊的危害較大，1月齡～3月齡的羔羊最為易感，感染率高達(dá)100%，羔羊病死率可達(dá)58%[4-5]；成年羊多表現(xiàn)為慢性亞臨床感染狀態(tài)，但會(huì)持續(xù)不斷向外界環(huán)境散布大量球蟲(chóng)卵囊，成為重要的傳染源。此外，球蟲(chóng)的寄生與增殖常常使宿主腸道黏膜的完整性遭受?chē)?yán)重?fù)p傷，大大降低宿主免疫力，給其他病原微生物的感染創(chuàng)造了誘因。因而嚴(yán)重影響羊的產(chǎn)奶、肉品質(zhì)以及皮毛等生產(chǎn)性能[6]。對(duì)黑龍江、西藏、福建、陜西、廣西等地區(qū)進(jìn)行的山羊球蟲(chóng)的種類和感染情況調(diào)查研究[5,7-11]，結(jié)果顯示，不同地區(qū)山羊球蟲(chóng)感染種類、流行蟲(chóng)種和感染情況存在較大差異。因此，山羊球蟲(chóng)病嚴(yán)重制約著養(yǎng)羊業(yè)的健康發(fā)展。

簡(jiǎn)陽(yáng)大耳山羊是由進(jìn)口的努比亞山羊與四川簡(jiǎn)陽(yáng)本地山羊雜交形成的優(yōu)良山羊品種，具有耐粗食、體型大、繁殖力強(qiáng)、生長(zhǎng)速度快等特點(diǎn)，飼養(yǎng)量逐年增加。目前尚未見(jiàn)有關(guān)簡(jiǎn)陽(yáng)大耳山羊球蟲(chóng)感染情況的研究報(bào)道。因此，本研究以陜西省某羊場(chǎng)養(yǎng)殖的簡(jiǎn)陽(yáng)大耳山羊?yàn)檠芯繉?duì)象，采集不同年齡段的簡(jiǎn)陽(yáng)大耳山羊新鮮糞便55份，通過(guò)飽和鹽水漂浮法以及形態(tài)學(xué)方法明確簡(jiǎn)陽(yáng)大耳山羊球蟲(chóng)感染情況和球蟲(chóng)種類，以期為該羊場(chǎng)球蟲(chóng)病的有效防治提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1試劑飽和食鹽水溶液，25 g/L重鉻酸鉀溶液，生理鹽水。

1.1.2試驗(yàn)器材SHIMADZU-AUY220型電子天平，L-550低速臺(tái)式離心機(jī)(長(zhǎng)沙湘儀)，Motic AE31倒置顯微鏡，HH-B11型電熱恒溫培 養(yǎng)箱(上海醫(yī)療器械七廠)，60目銅篩，冰箱，鐵絲圈，離心管，三角瓶，載玻片，蓋玻片，計(jì)數(shù)器。

1.2方法

1.2.1樣品采集采集陜西省某大耳羊場(chǎng)不同年齡段大耳羊的新鮮糞便55份(3月齡～7月齡20份、10月～12月份20份、36月齡種羊15份)，分裝于15mL離心管并加入25 g/L重鉻酸鉀溶液，詳細(xì)標(biāo)記年齡、采集時(shí)間、糞便形態(tài)等信息，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2卵囊檢測(cè)與計(jì)數(shù)采用飽和鹽水漂浮法對(duì)糞便樣品進(jìn)行檢查，采用馬克馬斯特計(jì)數(shù)法測(cè)定每克糞便的球蟲(chóng)卵囊數(shù)(OPG)。

1.2.3卵囊的分離和培養(yǎng)卵囊的分離參照索勛等[12]描述的方法進(jìn)行。取大耳山羊新鮮糞樣5 g，加水研碎并充分混勻后經(jīng)80目銅篩過(guò)濾，濾液3 000 r/min離心10 min，棄上清，沉淀用飽和鹽水混勻后經(jīng)2 000 r/min離心10 min，取上清液并用5倍體積的純凈水稀釋，然后3 000 r/min離心10 min，并取少量沉淀進(jìn)行顯微鏡檢查。分離到的卵囊保存于25 g/L重鉻酸鉀溶液中，放入28℃溫箱培養(yǎng)72 h，期間每隔6 h吹打1次，待85%球蟲(chóng)卵囊孢子化后，于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.4球蟲(chóng)種類的鑒定孢子化球蟲(chóng)卵囊于400倍光學(xué)顯微鏡下觀察，隨機(jī)測(cè)量100個(gè)孢子化卵囊，根據(jù)卵囊的大小、形態(tài)、形狀指數(shù)、顏色、極帽、卵膜孔、卵囊殘?bào)w以及斯氏體等形態(tài)學(xué)特征結(jié)合測(cè)量數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)資料進(jìn)行球蟲(chóng)種類鑒定[5,8,10]。

2結(jié)果

2.1大耳山羊球蟲(chóng)感染情況

本次調(diào)查結(jié)果表明，球蟲(chóng)檢測(cè)出率為92.5%(51/55)，說(shuō)明本羊場(chǎng)球蟲(chóng)感染率較高。從表1可以看出，3月齡～7月齡小羊球蟲(chóng)感染率最高，達(dá)100%(20/20)，次之為10月齡～12月齡山羊，感染率為90.0%(18/20)，3歲種山羊的球蟲(chóng)感染率最低，為86.7%(13/15)。此外，根據(jù)各年齡段大耳山羊球蟲(chóng)感染強(qiáng)度的統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示，3月齡～7月齡山羊的OPG值為3 300，感染強(qiáng)度最大，且遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于OPG值為854的3歲種山羊。由此可見(jiàn)，羔羊?qū)η蛳x(chóng)的易感性最高，感染強(qiáng)度也最大，這與以前文獻(xiàn)資料報(bào)道相一致[4,9-10]。

2.2球蟲(chóng)種類鑒定

本研究對(duì)糞便中的球蟲(chóng)卵囊進(jìn)行分離、孢子化，然后通過(guò)形態(tài)學(xué)方法，初步鑒定出8種艾美耳球蟲(chóng)，分別為阿氏艾美耳球蟲(chóng)(E.arloingi) 、艾氏艾美耳球蟲(chóng)(E.alijevi)、羊艾美耳球蟲(chóng)(E.caprovina)、雅氏艾美耳球蟲(chóng)(E.ninakohlyakimovae)、克氏艾美耳球蟲(chóng)(E.christenseni)、家山羊艾美耳球蟲(chóng)(E.hirci)和約氏艾美耳球蟲(chóng)(E.jolchijevi)。山羊各種球蟲(chóng)卵囊特征和形態(tài)觀察結(jié)果見(jiàn)圖1和表2。通過(guò)隨機(jī)對(duì)100個(gè)孢子化卵囊觀察測(cè)量后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果表明本羊場(chǎng)大耳山羊的優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種為阿氏艾美耳球蟲(chóng)(32%)、雅氏艾美耳球蟲(chóng)(27%)及艾氏艾美耳球蟲(chóng)(23%)。

表1　各年齡段簡(jiǎn)陽(yáng)大耳山羊球蟲(chóng)感染情況

a. 阿氏艾美耳球蟲(chóng)；b. 艾氏艾美耳球蟲(chóng)；c. 山羊艾美耳球蟲(chóng)；d. 雅氏艾美耳球蟲(chóng)；e. 羊艾美耳球蟲(chóng)；f. 家山羊艾美耳球蟲(chóng)；g. 克氏艾美耳球蟲(chóng)；h. 約氏艾美耳球蟲(chóng)

a.E.arloingi；b.E.alijevi；c.E.caprina；d.E.ninakohlyakimovae；e.E.caprovina；f.E.hirci；g.E.christenseni；h.E.jolchijevi

圖1某羊場(chǎng)大耳羊8種孢子化的艾美球蟲(chóng)卵囊形態(tài)

Fig.1The morphology of eight species of sporulated oocysts in dear goats

表2　大耳山羊感染的球蟲(chóng)種類及形態(tài)學(xué)特征

注：“+”表示有；“-”表示無(wú)。

Note：“+”means positive；“-”means negative.

3討論

山羊球蟲(chóng)病呈世界性分布，迄今公認(rèn)寄生于山羊的艾美耳球蟲(chóng)有13種[3，12]。山羊球蟲(chóng)的感染種類、感染率以及優(yōu)勢(shì)種因地區(qū)不同而存在差異性。夏晨陽(yáng)等[8]報(bào)道西藏尼木縣山羊球蟲(chóng)感染率為91.16%，鑒別出9種艾美耳球蟲(chóng)，優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種為阿氏艾美耳球蟲(chóng)、山羊艾美耳球蟲(chóng)、雅氏艾美耳球蟲(chóng)、約氏艾美耳球蟲(chóng)；陶立等[10]則報(bào)道廣西地區(qū)山羊球蟲(chóng)感染率為86.68%，鑒別出10種球蟲(chóng)，優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種為阿氏艾美耳球蟲(chóng)、雅氏艾美耳球蟲(chóng)、阿普艾美耳球蟲(chóng)、克氏艾美耳球蟲(chóng)、約氏艾美耳球蟲(chóng)；Wang C R等[7]報(bào)道我國(guó)黑龍江地區(qū)山羊球蟲(chóng)感染率為87.9%，鑒別出5種球蟲(chóng)，克氏艾美耳球蟲(chóng)、艾氏艾美耳球蟲(chóng)和山羊艾美耳球蟲(chóng)為該地區(qū)優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種。本研究結(jié)果表明，該羊場(chǎng)大耳山羊球蟲(chóng)平均感染率為92.5%，初步鑒定出山羊艾美耳球蟲(chóng)8種，優(yōu)勢(shì)蟲(chóng)種是阿氏艾美耳球蟲(chóng)、雅氏艾美耳球蟲(chóng)和艾氏艾美耳球蟲(chóng)。

進(jìn)一步研究結(jié)果顯示，本場(chǎng)各年齡段大耳羊球蟲(chóng)均具有較高的感染率，且呈現(xiàn)多種球蟲(chóng)的混合感染狀態(tài)。相比較而言，3～7月齡羔羊無(wú)論是感染率(100%)還是感染強(qiáng)度(OPG值為3 300)都遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于3歲種山羊(感染率為86.7%， OPG值為854)，這與此前的相關(guān)報(bào)道相一致[4，9-10]。有研究表明， OPG值超過(guò)5 000時(shí)山羊才會(huì)表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀[4]，因此，本場(chǎng)羊只雖未出現(xiàn)明顯的球蟲(chóng)感染癥狀，但較高的感染率和感染強(qiáng)度，很可能是造成該場(chǎng)羊只瘦弱、采食不佳、體重增長(zhǎng)緩慢等情況的原因之一。

綜上所述，盡管山羊球蟲(chóng)感染較為普遍，但臨床多為隱性感染，這使在山羊的養(yǎng)殖過(guò)程中常常忽視了球蟲(chóng)病的防控，造成羊只體重增長(zhǎng)緩慢，生產(chǎn)性能降低，使養(yǎng)殖成本大大增加，從而影響了養(yǎng)羊業(yè)的健康發(fā)展。因此，建議該羊場(chǎng)應(yīng)該根據(jù)實(shí)際情況，制定相應(yīng)的驅(qū)蟲(chóng)計(jì)劃、科學(xué)合理使用抗球蟲(chóng)藥物、加強(qiáng)飼養(yǎng)管理以及提高動(dòng)物抵抗力，積極主動(dòng)預(yù)防控制球蟲(chóng)病的發(fā)生[5-6，14-15]。

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Investigation on Coccidian Infections and Identification on Species of Jianyang Daer Goats in a Goat Farm of Shaanxi Province

TU Yi-qiang, JIAN Yong-li, GAO Yong-an

(WenzhouVocationalCollegeofScienceandTechnology,Wenzhou，Zhejiang,325006,China)

Abstract:In order to investigate species and prevalence ofEimeriainfections in a Jianyang daer goat farm of Shaanxi province,55 fresh fecal samples were collected from different ages of Jianyang daer goats and examined by McMaster′s and morphology method for infection status and oocyst species. The results showed that the average infection rate of coccidia in goats was 92.7%,the prevalences of coccidian oocysts in 3-7 month goats,10-12month goats and 3years old goats were 100%,90% and 86.7%,respectively.The average numbers of oocysts per gramme feces (OPG) were 3 300,1 050 and 854 in the three age groups, respectively.Eight species were identified from oocyst-positive samples, the predominant species wereE.arloingi,E.ninakohlyakimovaeandE.alijeviin this goat farm.

Key words:Jianyang daer goat; coccidia; species;infection

收稿日期：2016-01-29

作者簡(jiǎn)介：涂宜強(qiáng)(1979-)，男，浙江溫州人，講師，碩士，主要從事動(dòng)物疫病防治與寄生蟲(chóng)學(xué)研究。

中圖分類號(hào):S852.723

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B

文章編號(hào):1007-5038(2016)06-0132-04