張瑩瑩

（沈陽(yáng)工學(xué)院生命工程學(xué)院，遼寧 撫順　113122）

玉米蛋白粉、DDGS、玉米胚芽中嘔吐毒素的增長(zhǎng)速度研究

張瑩瑩

（沈陽(yáng)工學(xué)院生命工程學(xué)院，遼寧 撫順113122）

為研究不同飼料原料中嘔吐毒素（脫氧雪腐鐮刀菌西醇）在常溫和低溫干燥條件下的增長(zhǎng)速度，選取同質(zhì)量的玉米蛋白粉、DDGS、玉米胚芽進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)。試驗(yàn)時(shí)間為42 d，每個(gè)樣品共稱取60 g，平均分為3組，每組兩個(gè)重復(fù)，在低溫干燥的條件下，每周測(cè)量1次，記錄每組培養(yǎng)皿中的嘔吐毒素的含量，且控制外界條件相同。試驗(yàn)結(jié)果表明，在低溫干燥的狀態(tài)下，玉米蛋白粉、DDGS、玉米胚芽中的嘔吐毒素隨著時(shí)間的增加幾乎不生長(zhǎng)繁殖；在常溫的條件下玉米蛋白粉、DDGS、玉米胚芽隨著時(shí)間的增加，嘔吐毒素快速增長(zhǎng)，且增長(zhǎng)速度也不相同。

玉米蛋白粉；DDGS；玉米胚芽；嘔吐毒素；增長(zhǎng)速度

1　嘔吐毒素的危害

1.1對(duì)免疫功能的影響

研究表明，嘔吐毒素（DON）可能會(huì)對(duì)免疫系統(tǒng)有很大的影響，并且會(huì)對(duì)胚胎有一定的毒性及致畸作用，很可能會(huì)有遺傳毒性，但是沒(méi)有致癌、致突變作用。DON對(duì)人和動(dòng)物危害較大，各國(guó)普遍重視嘔吐毒素的危害性［1-4］。嘔吐毒素污染飼料以及谷物的情況也是相當(dāng)普遍的［5-6］。嘔吐毒素對(duì)免疫功能的影響也受到了醫(yī)學(xué)工作者的重視。且試驗(yàn)研究表明，不同種類的動(dòng)物對(duì)DON的敏感程度以及耐受力也是不同的，敏感程度的順序是豬＞小鼠＞大鼠＞家禽和反芻動(dòng)物。

1.2對(duì)細(xì)胞的毒性

DON對(duì)原核細(xì)胞、真核細(xì)胞、植物細(xì)胞等均具有很強(qiáng)的毒性作用，并且是通過(guò)不同的方式對(duì)原核細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用，滲透亞細(xì)胞磷脂雙層；與細(xì)胞膜的相互作用；自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化作用。DON對(duì)生長(zhǎng)較快的細(xì)胞均有很強(qiáng)的毒性作用，而且可以抑制蛋白質(zhì)的合成。DON對(duì)細(xì)胞的毒性通過(guò)3種方式，抑制豬的卵母細(xì)胞成熟、使豬子宮內(nèi)膜細(xì)胞減少、一些細(xì)胞出現(xiàn)了線粒體腫脹、細(xì)胞膜破裂和細(xì)胞漿空泡化等細(xì)胞死亡的表現(xiàn)。

1.3對(duì)糧食的污染

霉變玉米中，嘔吐毒素也叫脫氧雪腐鐮刀菌烯酮，與玉米赤霉烯酮同時(shí)存在的，是最常見(jiàn)的污染糧食、飼料的毒素之一，由于糧食谷物被嘔吐毒素的大量污染，因此也對(duì)嘔吐毒素進(jìn)行了大量的調(diào)查。嘔吐毒素主要是感染赤霉病的谷類作物，由鐮刀菌產(chǎn)生。嘔吐毒素、赤霉烯酮都是田間毒素，喜歡低溫、潮濕氣候，當(dāng)水分含量為22%，濕度約85%，溫度為20℃時(shí)，兩種毒素大量產(chǎn)生。由于保管儲(chǔ)存方式不正確也會(huì)引起玉米霉變的加劇，嘔吐毒素也會(huì)大量的產(chǎn)生［7-10］。

為研究不同飼料原料中嘔吐毒素在常溫下和低溫干燥條件下的生長(zhǎng)速度，本試驗(yàn)選取了玉米蛋白粉、DDGS、玉米胚芽進(jìn)行培養(yǎng)試驗(yàn)，以期為減少飼料原料中的嘔吐毒素提供根據(jù)。

2　材料與方法

2.1試驗(yàn)原料以及藥品

本試驗(yàn)在沈陽(yáng)波音飼料有限公司化驗(yàn)室進(jìn)行，選取可在市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)的飼料原料玉米蛋白粉，玉米胚芽以及DDGS。試驗(yàn)期為42 d。試劑盒為北京安易世紀(jì)貿(mào)易有限責(zé)任公司的嘔吐毒素（脫氧雪腐鐮刀菌烯醇）檢測(cè)試劑盒。

2.2試驗(yàn)分組和處理

將樣品玉米蛋白粉、DDGS、玉米胚芽樣品各分為3組（玉米蛋白粉為A組，DDGS為B組，玉米胚芽為C組），每組常溫條件下兩個(gè)重復(fù)，對(duì)照組在干燥低溫條件下進(jìn)行。

每種樣品稱取60 g，再將每種樣品平均分為3份。其中1份放置低溫環(huán)境中編號(hào)1號(hào)，另兩份放置于常溫條件下分別編號(hào)2號(hào)、3號(hào)。每組1號(hào)樣品放于同一冰箱中，冰箱溫度設(shè)置4℃，每組2號(hào)、3號(hào)樣品放置于生化培養(yǎng)箱設(shè)置20℃。每種樣品置于相同的環(huán)境中，控制外界的條件相同，觀察每種樣品的嘔吐毒素的生長(zhǎng)速度。每周檢測(cè)嘔吐毒素的生長(zhǎng)速度，試驗(yàn)期42 d。

2.3試驗(yàn)測(cè)試指標(biāo)及檢測(cè)方法

開(kāi)始試驗(yàn)前要求試劑樣品萃取液達(dá)到室溫，取適量的孔條固定在微孔板架上，加入酶標(biāo)記物50 μL到微孔，加入樣品及標(biāo)準(zhǔn)品50 μL到相應(yīng)的孔中，注意使用一次性吸頭防止交叉污染。加入50 μL抗體溶液到微孔中，輕微震蕩微孔板。室溫下放置10 min。倒掉微孔中的溶液，微孔中注滿清洗液，然后倒掉重復(fù)4次，共5次洗板，最后1次清洗完，倒掉孔中的溶液，然后翻轉(zhuǎn)微孔板在吸水紙上拍干。每孔中加入100 μL底物溶液。室溫下放置5 min。每孔中加入100 μL停止液，最后在450 nm酶標(biāo)儀讀取吸光值。在skanit for MuItiskan pc3.1顯示出初始數(shù)據(jù)，再用安易世紀(jì)軟件計(jì)算得出最終數(shù)據(jù)。

3　結(jié)果與分析

3.13種原料在低溫條件下嘔吐毒素的生長(zhǎng)速度

試驗(yàn)結(jié)果表明，3種原料在低溫干燥的冰箱中幾乎沒(méi)有生長(zhǎng)，所以只考慮常溫下3種原料的嘔吐毒素的生長(zhǎng)速度。

3.23種原料在常溫下嘔吐毒素的生長(zhǎng)速度

3種飼料原料1～6周在常溫下，嘔吐毒素的生長(zhǎng)速度情況見(jiàn)附圖。

附圖　3種飼料原料1～6周的嘔吐毒素增長(zhǎng)速度

由附圖可知，在常溫且控制外界環(huán)境條件相同的情況，玉米蛋白粉、DDGS及玉米胚芽在42 d中的平均增長(zhǎng)速度分別為0.52、0.56和0.45。即3種飼料原料中，DDGS中的嘔吐毒素增長(zhǎng)的速度最快，其次是玉米蛋白粉，最后是玉米胚芽。

4　討論

隨著時(shí)間的增長(zhǎng)，飼料原料中的嘔吐毒素在低溫干燥的環(huán)境條件下幾乎不生長(zhǎng)繁殖。在低溫干燥的條件下，數(shù)據(jù)上下浮動(dòng)，可能屬于試驗(yàn)誤差。

在常溫的條件下，由于溫度適宜，給嘔吐毒素提供了適宜生長(zhǎng)的環(huán)境，因此嘔吐毒素大量繁殖生長(zhǎng)。其中玉米蛋白粉、DDGS、玉米胚芽3種原料中的嘔吐毒素的生長(zhǎng)速度不同。在試驗(yàn)期間，DDGS的嘔吐毒素生長(zhǎng)的平均速度最快為0.56；玉米蛋白為0.54；玉米胚芽為0.45。DDGS水分含量高，霉菌容易生長(zhǎng)，但嘔吐毒素的增長(zhǎng)量不穩(wěn)定，在1～2周內(nèi)大量增長(zhǎng)，隨后增長(zhǎng)緩慢。該結(jié)果可能是在試驗(yàn)過(guò)程中，操作不當(dāng)以及未控制好外界條件引起的。玉米蛋白粉和玉米胚芽中的嘔吐毒素的增長(zhǎng)速度逐漸增加，玉米蛋白粉中嘔吐毒素增長(zhǎng)速度較快。

DON主要存在于無(wú)法避免的污染糧食作物中，在研磨和加工過(guò)程中很難被降解，潛在的造成人和動(dòng)物中毒。不同動(dòng)物對(duì)DON的敏感性不同，豬、犬、貓敏感，家禽、牛和羊相對(duì)不敏感，＞5 mg·kg-1才能引起雞的有害效應(yīng)［11-12］。DON具有影響消化系統(tǒng)、細(xì)胞毒性、免疫毒性、神經(jīng)毒性以及致癌、致畸、致突變作用［13-15］。

隨著對(duì)DON研究的不斷深入，DON對(duì)動(dòng)物的毒害作用及作用機(jī)理有更多的闡明，但仍存在很多問(wèn)題待解決。包括DON的神經(jīng)毒性機(jī)理還不清楚；DON對(duì)免疫系統(tǒng)損害的機(jī)理還有待于深入研究；在不同動(dòng)物上DON的作用劑量仍未得到一致認(rèn)可；DON與其他毒素之間的關(guān)系還有待于進(jìn)一步研究等。

5　結(jié)論

本試驗(yàn)研究表明，不同的飼料原料，即玉米蛋白粉、DDGS、玉米胚芽在同一常溫條件下，嘔吐毒素的的增長(zhǎng)速度是不同的。DDGS中的嘔吐毒素生長(zhǎng)速度最快，其次玉米蛋白粉，最后是玉米胚芽。

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The Growth Speed of Mycotoxin in Corn Protein Powder,DDGS and Corn Germ

ZHANG Yingying
（College of Life Engineering，Shenyang Institute of Technology，F(xiàn)ushun 113122，Liaoning China）

In order to study the growth rate of the vomiting toxin different raw materials of feed in normal tem?perature or low temperature and dry，the quality of the corn protein powder，DDGS，corn germ were selected.To test?ed for 42 days，each sample was 60 g divided into three groups with two repeat，measured once a week in cool and dry conditions，recorded the emetic toxin content in each culture dish，controled the same external conditions.The results showed that in low temperature and dry condition，toxin content of corn protein powder，DDGS，corn germ had no growth and reproduction；in room temperature conditions，toxin content of corn protein meal，DDGS，corn germ grew very fast，and the growth rate of the emetic toxin was not same.

corn gluten meal；DDGS；corn germ；vomiting toxin；growth rate

S816.8；S859.87

A

1001-0084（2016）07-0037-03

2016-03-22

張瑩瑩（1985-），女，遼寧鞍山人，碩士研究生，研究方向?yàn)閯?dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)。