閻曉朋　楊學(xué)華　呂培杰　柴亞如

(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院 放射科　河南 鄭州　450052)

?

·論著·

兔肝腫瘤模型中CT能譜成像與灌注成像的相關(guān)性研究

閻曉朋楊學(xué)華呂培杰柴亞如

(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院 放射科河南 鄭州450052)

目的探討兔VX2肝癌模型中CT能譜成像參數(shù)與灌注參數(shù)及微血管密度(MVD)之間的相關(guān)性。方法選取24只種植VX2肝癌的大白兔，于種瘤后第14天行能譜及灌注一站式掃描，同時(shí)獲得CT灌注圖像和CT能譜圖像。對(duì)腫瘤周邊CT強(qiáng)化較明顯區(qū)域行CD34的免疫組化染色，根據(jù)CD34陽性結(jié)果計(jì)數(shù)測(cè)定MVD，采用Pearson相關(guān)分析能譜圖像腫瘤的碘基值與灌注參數(shù)值及MVD值的相關(guān)性。結(jié)果瘤組織動(dòng)脈期碘基值與BV、BF、HAF、PS及MVD值呈正相關(guān)(P均<0.05)，與MTT呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；瘤組織靜脈期碘基值與BV、BF、PS及MVD值呈正相關(guān)(P均<0.05)，與HAF、MTT無相關(guān)性(P均>0.05)。結(jié)論CT能譜圖像碘基值與灌注參數(shù)及MVD具有較好的相關(guān)性，可反映腫瘤的血供變化。

體層攝影術(shù)；X線計(jì)算機(jī)；VX2肝癌；兔；灌注；相關(guān)性

CT 灌注成像(computed tomography perfusion，CTP)雖然可以定量評(píng)估肝內(nèi)實(shí)質(zhì)性病灶的血流動(dòng)力學(xué)信息[1-2]，但是其高輻射劑量限制了其在臨床的推廣使用[1，3]。近年來發(fā)展的CT能譜成像(gemstone spectral imaging，GSI)通過物質(zhì)分離技術(shù)可獲得碘基物質(zhì)圖像，進(jìn)而可以獲得定量指標(biāo)碘基值[4]。CT能譜及灌注一站式掃描技術(shù)可一次掃描同時(shí)獲得能譜和灌注兩種圖像。本研究通過比較CT能譜及灌注一站式掃描獲得的能譜成像碘基值與灌注參數(shù)值和微血管密度(microvessel density，MVD)的相關(guān)性，探討CT能譜圖像碘基值能否反映肝腫瘤的血供變化。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種植肝VX2腫瘤的新西蘭大白兔30只，雌雄不限，體質(zhì)量2～3 kg，由河南省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.1.2器材和試劑

1.1.2.1試劑速眠新Ⅱ(0.2 ml/kg，吉林省華牧動(dòng)物保健品有限公司)，碘佛醇(320 mgI/ml，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司)。

1.1.2.2CT掃描儀美國(guó)GE公司寶石能譜CT(Discovery CT750 HD)。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1掃描方案于種瘤后第14天行CT能譜及灌注一站式掃描。掃描前準(zhǔn)備：禁食12 h，禁水4 h，麻醉好后，將其仰臥位放置于CT掃描床上，耳緣靜脈穿刺24 G留置針。先行全腹常規(guī)平描，根據(jù)平掃圖像選擇VX2肝轉(zhuǎn)移瘤灌注掃描層面，行能譜及灌注一站式掃描。掃描參數(shù)：管電壓80 kVp和140 kVp瞬間切換，管電流100 mA，層厚與層間距5 mm，掃描范圍4 cm，螺距0.984∶1，重建層厚及層間距：1.25 mm。注藥同時(shí)開始掃描，全程掃描50 s，每2 s掃描1次，共25個(gè)循環(huán)。對(duì)比劑：碘佛醇，劑量1.8 ml/kg，流率0.5 ml/s，加注5 ml生理鹽水。獲得5 mm原始圖像和1.25 mm灌注圖像(見圖A)；再根據(jù)個(gè)體差異選擇最佳的循環(huán)重建出1.25 mm的雙期能譜圖像(見圖B-E)。將原始圖像和重建圖像輸入ADW4.6工作站進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

注：A為灌注圖像：腫瘤邊緣呈高灌注，中央呈低灌注。B為能譜動(dòng)脈期圖像：腫瘤呈明顯強(qiáng)化(高密度)，邊界清晰。C為能譜動(dòng)脈期碘基圖像：腫瘤呈高密度，邊界清晰。D為能譜靜脈期圖像：腫瘤呈相對(duì)低密度，邊界尚清晰。E為能譜靜脈期碘基圖像：腫瘤呈低密度，邊界清晰。

圖1兔VX2腫瘤灌注圖像和雙期能譜圖像

1.2.2圖像后處理應(yīng)用能譜分析軟件測(cè)量能譜雙期掃描圖像腫瘤組織的碘基值。應(yīng)用perfusion 4D灌注軟件分析測(cè)量腫瘤組織的血容量(blood volume，BV)、血流量(blood flow， BF)、平均通過時(shí)間(mean transit time，MTT)、肝動(dòng)脈分?jǐn)?shù)(hepatic arterial fraction，HAF)、表面通透性(permeability surface，PS)、達(dá)峰時(shí)間(time to peak，TTP)、最大強(qiáng)化積分(positive enhancement integral，PEI)及平均上升斜率(mean slope of increase，MSI)。腹主動(dòng)脈和門靜脈主干或分支作為供血?jiǎng)用}和引流靜脈。腫瘤組織選取顯示病灶最大層面且邊緣強(qiáng)化最明顯的區(qū)域，所有數(shù)據(jù)均重復(fù)測(cè)量3次取平均值。

1.3免疫組化CT掃描后，處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，取腫瘤組織做免疫組化。以CD34抗體標(biāo)記樣本后，在低倍鏡下挑選最高的MVD區(qū)(在腫瘤基質(zhì)細(xì)胞邊緣或腫瘤間質(zhì)中尋找)，然后放大200倍，顯微鏡下計(jì)數(shù)5個(gè)滿視野的微血管數(shù)量，求平均值，即為腫瘤的平均微血管數(shù)。見圖2。

2　結(jié)果

2.1兔VX2肝癌的解剖結(jié)果24只實(shí)驗(yàn)兔子中共形成瘤結(jié)節(jié)33個(gè)，呈圓形或類圓形，有包膜，直徑約1.0～3.5 cm，切面呈灰白色或魚肉狀，部分中央有液化壞死。2.2能譜圖像碘基值與灌注參數(shù)的相關(guān)性能譜圖像組瘤組織動(dòng)脈期碘基值與BV、BF、HAF、PS呈正相

關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為0.617、0.778、0.850、0.738(P均<0.05)，與 MTT呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。能譜圖像瘤組織靜脈期碘基值與BV、BF、PS呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為0.625、0.510、0.719(P均<0.05)，與 HAF、MTT無相關(guān)性(P均>0.05)。見表1、2。

2.3能譜圖像碘基值與MVD值的相關(guān)性能譜圖像組腫瘤組織雙期碘基值與MVD值均呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r為0.869、0.706(P均<0.05)。見表1、2。

注：CD34染色，灰色條狀區(qū)域均為血管。

圖2　兔VX2腫瘤免疫組化圖像(200×)

表2　腫瘤組織能譜圖像靜脈期碘基值與CT灌注參數(shù)及MVD的相關(guān)性±s，n=33)

3　討論

能譜成像和灌注成像都屬于CT功能成像，已成為后多排螺旋CT時(shí)代新的發(fā)展方向[5]。CT灌注成像可以直接反映對(duì)比劑在組織內(nèi)的分布情況，并通過灌注參數(shù)的定量反映組織的血流灌注情況[6-7]，并已應(yīng)用于臨床，但是由于掃描范圍小、輻射劑量大的缺點(diǎn)，限制了其臨床推廣[3]。CT能譜成像通過物質(zhì)分離技術(shù)和單能量成像技術(shù)使CT有解剖成像發(fā)展到功能成像，并由基物質(zhì)圖像獲得定量參數(shù)碘基值[4]。CT能譜及灌注一站式成像結(jié)合了能譜成像和灌注成像的雙重優(yōu)點(diǎn)，具有一次掃描同時(shí)獲得能譜和灌注兩種圖像的優(yōu)勢(shì)。本研究通過CT能譜及灌注一站式成像技術(shù)排除了掃描時(shí)間差異、個(gè)體循環(huán)差異和對(duì)比劑注射速率差異造成的影響。

本研究發(fā)現(xiàn)，能譜圖像腫瘤組織動(dòng)脈期碘基值與BV、BF、HAF、PS及MVD值均具有好的相關(guān)性，靜脈期碘基值與BV、BF、PS及MVD值均具有相關(guān)性，這與Zhang等[3]研究結(jié)果一致；能譜圖像腫瘤組織動(dòng)脈期碘基值與MTT呈負(fù)相關(guān)，這與雷振、魏強(qiáng)等[8-9]研究結(jié)果一致；靜脈期與MTT無相關(guān)性。大量研究證實(shí)CT灌注成像可通過血流灌注參數(shù)定量分析組織的血流動(dòng)力學(xué)變化，反映組織新生血管情況[10-11]；微血管密度(MVD)直接反映組織新生血管的多少。能譜CT碘基值與血流灌注參數(shù)及MVD值均具有很好的相關(guān)性，說明能譜CT碘基值也具有定量反映組織血流動(dòng)力學(xué)變化及新生血管情況的能力。

本研究的不足：CT能譜及灌注一站式掃描技術(shù)作為一項(xiàng)新的技術(shù)尚處于初步研究階段，且研究對(duì)象單一，樣本量較小。這些不足之處有待于在以后的研究中不斷完善。

總之，本研究發(fā)現(xiàn)能譜成像碘基值與灌注參數(shù)及MVD具有較好的相關(guān)性，能譜成像可作為常規(guī)檢查檢測(cè)組織血供變化，并具有潛在的評(píng)估抗腫瘤治療療效的能力。

[1]Se H K,Aya K,Jürgen K W,et al.CT perfusion of the liver:principles and applications in oncology[J].Radiology,2014,272(2):322-344.

[2]Jordi B,Henk A M,Ludo F M B,et al.Effect of Extended CT perfusion acquisition time on ischemic core and penumbra volume estimation in patients with acute ischemic stroke due to a large vessel occlusion[J].PloS one,2015,10(3):e0119409.

[3]Zhang L J,Wu S Y,Lu G M,et al.Quantitative dual energy CT measurements in rabbit VX2 liver tumors:comparison to perfusion CT measurements and histopathological findings[J].Eur J Radiol,2012,81(8):1766-1775.

[4]林曉珠,沈云,陳克敏.CT能譜成像的基本原理與臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中華放射學(xué)雜志,2011,45(8):798-800.

[5]Zhou Y,Wang M Y,Gao J B,et al.Evaluation of efficacy of anti-angiogenesis therapy for VX2 hepatic tumors in rabbits by spectral CT and CT perfusion imaging[J].World Chinese Journal of Digestology,2014,22(31):4726-4733.

[6]姜慧杰,徐克,張慧博,等.多層螺旋CT灌注成像活體評(píng)價(jià)肝VX2移植瘤新生血管生成[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù),2007,23(7):967-970.

[7]劉玉林,孔祥泉,陳憲,等.VX2腫瘤MSCT灌注與血管生成的關(guān)系[J].放射學(xué)實(shí)踐,2010,25(6):600-604.

[8]雷振,徐娜,伍建林,等.兔VX2乳腺癌CT灌注成像與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的相關(guān)性研究[J].中華放射學(xué)雜志,2010,44(5):527-530.

[9]魏強(qiáng),雷振,馮國(guó)全,等.兔門靜脈種植VX2癌栓CT灌注參數(shù)與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的相關(guān)性[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志,2014,(9):650-654.

[10]Jung I,Kim H J,Lee Y J,et al.Multiparametric monitoring of early response to antiangiogenic therapy:a sequential perfusion CT and PET/CT study in a rabbit VX2 tumor model[J]. Scientific World Journal,2014,2014:701954.

[11]馮國(guó)全,雷振,徐娜,等.MSCT灌注成像評(píng)價(jià)恩度抗兔門靜脈VX2癌栓新生血管生成的實(shí)驗(yàn)研究[J].實(shí)用放射學(xué)雜志,2013,29(4):651-654,670.

The correlation between spectral CT parameters and perfusion parameters in rabbit liver tumor model

Yan Xiaopeng, Yang Xuehua, Lv Peijie, Chai Yaru

(DepartmentofRadiology,theFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China)

ObjectiveTo assess the correlation between spectral CT parameters and perfusion parameters in rabbit VX2 liver tumor model. Methods24 rabbits with VX2 liver tumor underwent GSI perfusion one-stop CT scan to generate spectral images and perfusion images. The enhanced borders of tumors were stained immunohistochemically with CD34, MVD was shown by anti-CD34. The correlation of iodine concentration of tumor with perfusion parameters and MVD were analyzed by using Pearson’s correlation analysis. ResultsThe tumor iodine based in value of arterial phase had an positive correlation with BV, BF, HAF, PS and MVD(allP<0.05), and had a negative correlation with MTT(P<0.05). The tumor iodine based value of venous phase had an positive correlation with BV, BF, PS and MVD(allP<0.05)，and had no correlation with HAF，MTT. ConclusionThe tumor iodine based value obtained from spectral CT images correlates strongly with perfusion parameters and MVD, which can reflect tumor blood supply changes.

tomography；X-ray computed；VX2 liver tumor；rabbit；perfusion；correlation

國(guó)家自然科學(xué)青年基金(81301220)；河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)

楊學(xué)華，E-mail：yangxuehua208@126.com。

R 445

10.3969/j.issn.1004-437X.2016.08.002

2015-12-24)

計(jì)劃普通項(xiàng)目(201403016)；鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院青年創(chuàng)新基金([2012]233號(hào))。