劉冰 劉全科 周揚(yáng) 朱曉英 譚慧

（湖北省農(nóng)藥檢定管理所　武漢　430070）

QuEChERS/LC-MS-MS快速測(cè)定蔬菜水果中31種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留

劉冰 劉全科 周揚(yáng) 朱曉英 譚慧

（湖北省農(nóng)藥檢定管理所武漢430070）

采用液相色譜—電噴霧電離串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)定性定量檢測(cè)了蔬菜水果中31種農(nóng)藥殘留，試樣采用QuEChERS進(jìn)行前處理，外標(biāo)法定量，31種分析物在兩種基質(zhì)中的添加回收率在72%～128%之間，RSD為4.2%～9.9%，能夠滿足同時(shí)檢測(cè)多種農(nóng)藥殘留的要求，該方法步驟簡(jiǎn)便、可靠、穩(wěn)定，目前已廣泛應(yīng)用于果蔬中多種農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)中。

QuEChERS；農(nóng)藥殘留；蔬果；液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜

農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留分析是農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)的主要內(nèi)容。近年來(lái)，氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）、液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS/ MS）等分析技術(shù)已經(jīng)成為當(dāng)前主要的農(nóng)藥殘留分析技術(shù)?，F(xiàn)代檢測(cè)技術(shù)對(duì)樣品的前處理提出了更高的要求，因此，快速、準(zhǔn)確、安全、高效的樣品前處理新技術(shù)的開(kāi)發(fā)需求也日益迫切。

2003年，美國(guó)農(nóng)業(yè)部Anastassiades教授等開(kāi)發(fā)了一種新的樣品前處理技術(shù)—QuEChERS方法，較好地解決了這個(gè)問(wèn)題。自QuEChERS方法出現(xiàn)以來(lái)，引起了農(nóng)殘工作者的普遍關(guān)注，也逐漸對(duì)它進(jìn)行了方法改進(jìn)，使其在各領(lǐng)域樣品中的農(nóng)藥殘留的檢測(cè)應(yīng)用更加可靠。

本文研究了改進(jìn)后的QuEChERS法前處理結(jié)合LC-MS-MS檢測(cè)蔬菜、水果中31種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)，該方法具有操作簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好、靈敏度高的特點(diǎn)，能夠滿足對(duì)蔬菜水果中農(nóng)藥多殘留的檢測(cè)要求。

1　材料和方法

1.1儀器與試劑

LC-MS-MS液質(zhì)聯(lián)用儀（Agilent 6410A）；ZOBAX SB-C18色譜柱（2.1*150mm*3.5m，美國(guó)安捷倫公司）；離心機(jī)（型號(hào)23K15、公司sigma）10mL、50mL聚乙烯離心管，氮吹儀（型號(hào)OASYS、公司Organomation Associates），乙腈、正己烷（色譜純，美國(guó)Tedia公司），PSA吸附劑（美國(guó)安捷倫公司），無(wú)水醋酸鈉、無(wú)水硫酸鎂（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）

31種農(nóng)藥標(biāo)樣，由農(nóng)業(yè)部環(huán)保所提供；黃瓜和柑橘基質(zhì)，中百超市，檢測(cè)樣品來(lái)自湖北省內(nèi)抽檢。

1.2樣品前處理

1.2.1提取

取15g樣品放置于50mL的離心管內(nèi)，加入15mL含醋酸1%的乙腈，密封勻質(zhì)60s，加入不同量的無(wú)水硫酸鎂，1.5g無(wú)水醋酸鈉，超聲5min，5 000轉(zhuǎn)下離心8min。

1.2.2凈化

表1　黃瓜添加回收試驗(yàn)結(jié)果

表2　柑橘添加回收試驗(yàn)結(jié)果

取5mL上層提取液，加入到10mL離心管中，加入0.25g PSA，0.75g無(wú)水硫酸鎂，勻質(zhì)1 min，12 000轉(zhuǎn)離心5min，取1mL上清液過(guò)0.22m微孔濾膜裝瓶上機(jī)。

1.3儀器條件

色譜條件：色譜柱柱溫：40℃

ESI源參數(shù)：干燥氣溫度350℃，干燥氣流量11L/min，噴霧口壓力35 psi；

流動(dòng)相：0-2min：乙腈+水=5+95；2.01-6 min：乙腈+水=5+95；6.01-14.5 min：乙腈+水=95+ 5；14.51-20min：乙腈+水=5+95；流速為0.3ml/min；進(jìn)樣量為5L。

質(zhì)譜檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)離子掃描

表3　31種農(nóng)藥的保留時(shí)間和定性定量離子

1.4基質(zhì)標(biāo)樣的配制

取空白基質(zhì)按“1.2”方法處理后加入混合標(biāo)樣，配制成上機(jī)所需濃度。

2　試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1提取方法的選擇

本文所檢測(cè)的農(nóng)藥有多種殺蟲劑和殺菌劑，其極性有區(qū)別，因此選擇用1%乙酸-乙腈和醋酸鈉的緩沖體系作為提取劑，同時(shí)加入硫酸鎂以除水，但是硫酸鎂的加入會(huì)放熱，如果添加量過(guò)多溫度升高太快會(huì)影響一些遇熱易分解農(nóng)藥的提取效果。本次實(shí)驗(yàn)考察了硫酸鎂的加入量對(duì)結(jié)果的影響，結(jié)果表明硫酸鎂加入量為1.5g時(shí)，添加回收效果最好。

2.2凈化劑的選擇

QuEChERS方法中凈化劑PSA的用量對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響非常大，而且PSA相對(duì)價(jià)格也比較高，因此選擇合適的PSA用量對(duì)樣品的檢測(cè)意義重大，本實(shí)驗(yàn)選擇了5個(gè)PSA變量，分別為0.10g、0.15g、0.20g、0.25g、0.30g，確定了最佳PSA的加入量為0.25g。

2.3檢測(cè)方法的確證

本文采用選擇離子監(jiān)測(cè)模式采集數(shù)據(jù)，根據(jù)每種農(nóng)藥全掃得到的質(zhì)譜圖，選擇3個(gè)合適的離子作為特征離子，其中一個(gè)為定量離子，另外兩個(gè)位定性離子，31種農(nóng)藥的保留時(shí)間和所選離子見(jiàn)表1。

2.4方法檢出限、回收率和精密度

本文采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液-外標(biāo)法定量，應(yīng)用QuEChERS方法前處理，選擇黃瓜和柑橘作中添加31種農(nóng)藥，進(jìn)行添加回收試驗(yàn)，添加水平分別為0.05、0.1和0.5 mg/kg，每個(gè)添加回收5個(gè)平行，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

試驗(yàn)結(jié)果表明，該兩種基質(zhì)的三種濃度平均添加回收率在72%～128%之間，RSD為4.2%～9.9%，能夠滿足同時(shí)檢測(cè)多種農(nóng)藥殘留的要求，同時(shí)，利用該方法對(duì)于所抽檢的176個(gè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果可靠。

3　結(jié)論

本文將方便快速的QuEChERS方法與LCMS-MS聯(lián)用結(jié)合應(yīng)用于蔬菜水果中31種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)中，檢測(cè)結(jié)果令人滿意。此方法步驟簡(jiǎn)單，有機(jī)試劑消耗少，對(duì)人體傷害小，同時(shí)具有檢出限低，準(zhǔn)確度高，精密度好的特點(diǎn)，應(yīng)用于日常的檢測(cè)工作，可以降低檢測(cè)成本，提高檢測(cè)效率。

［1］徐娟，陳捷，葉弘毅等.QuEChERS提取與高效液相色譜-電噴霧電離串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)茶葉中的19種農(nóng)藥殘留［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2011，30：990-995.

［2］劉滿滿，康澍，姚成.QuEChERS方法在農(nóng)藥多殘留檢測(cè)中的應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2013，1（1）：8-22.

［3］徐娟，陳捷，王嵐等.QuEChERS提取與超高效液相色譜-電噴霧電離串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)果蔬中的230種農(nóng)藥殘留［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2013，3：293-301.

［4］Lukasz Rajski，Ana Lozano，Ana Uclés etc，Determination of pesticideresiduesin highoil vegetal commoditiesbyusingvarious multi-residue methods and clean-ups followed by liquid chromatography tandem mass spectrometry［J］.Journal of Chromatography A，2013，1304：109-120.

［5］孫亞真，鞏衛(wèi)東，張淑霞等.色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在食品農(nóng)藥多殘留檢測(cè)中的應(yīng)用與前景［J］.農(nóng)產(chǎn)品加工學(xué)刊，2012，2：89-92.

［6］王連珠，周昱，陳泳等.QuEChERS樣品前處理-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中66種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量方法評(píng)估［J］.色譜，2012，30（2）：146-153.

［7］黃霞，宋瑩，張耀海等.QuEChERS-GC/MS快速檢測(cè)柑橘中50種農(nóng)藥殘留［J］.食品科學(xué)，2011，18：268-271.

S481+8

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1005-6114（2016）04-031-004

2016-04-25

劉冰，女，助理工程師，主要從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)。E-mail：270980575@qq.com，Tel：18672325838