閻曉紅
摘要 雞的采血是動物防控人員必備的一項專業(yè)技能,采血質(zhì)量及處理的好壞直接關(guān)系到檢疫結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。本文介紹雞常用的幾種采血技術(shù)及血樣處理方法,以供參考。
關(guān)鍵詞 雞;采血技術(shù);血樣處理
中圖分類號 S858.31 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-5739(2016)06-0261-01
近年來,雞的抗體檢測和疫情監(jiān)測已成為評估疫情最直接、有效的方法,它可為重大動物疫情的防控提供權(quán)威和科學(xué)的依據(jù)[1]。血樣的采集與處理是實(shí)驗室檢驗中常規(guī)性和前提性工作,血液的質(zhì)量好壞直接影響檢疫結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,所以采血技術(shù)已成為動物疫病防控人員必備的一項專業(yè)技能。現(xiàn)結(jié)合實(shí)際介紹雞的幾種常用采血技術(shù)及血樣處理方法,以供參考。
1 采血要求
一是雞只采血時需空腹。二是必須保證一定的檢測數(shù)量,每群雞采血樣本數(shù)量不低于23份,才能保證檢出結(jié)果具有95%的可信度[2]。三是懷疑有傳染病時,采血過程一定要防止對周圍環(huán)境的污染,檢驗后殘留的血液及用具必須徹底消毒處理。四是血液標(biāo)本需用保溫瓶或保溫杯保存。五是工作人員避免被采血動物傷害、針頭刺傷等,做好自身防護(hù)。
2 采血方法
雞只采血時應(yīng)根據(jù)個體大小和檢測項目選擇不同的采血方法[3]。
2.1 雞冠采血
2.1.1 方法。多用于需血量較少的成年雞采血,如雞白痢平板凝集試驗。雞只保定好,先用75%酒精棉消毒雞冠,待酒精揮發(fā)干燥后,用滅菌針頭刺破雞冠吸取血液或用剪刀剪去一小片冠尖也可。第1滴用棉球吸去,第2滴作為血樣,吸取血液時需用手?jǐn)D壓雞冠。此法操作簡單,采血后注意止血和防止傷口感染。
2.1.2 注意事項。采血環(huán)境要求光線充足;所用注射器、采血針等器具必須進(jìn)行滅菌、干燥;為防止傷口的感染[4],需用碘伏涂擦采血部位;采血過程做到無菌操作;采血者要做好自我防護(hù)。
2.2 心臟采血
2.2.1 成年雞心臟采血。雞右側(cè)臥保定,助手左手抓緊雞的兩腿,右手緊抓兩側(cè)翅膀根部,右手中指控制雞的頭部。采血部位在胸骨脊前端至背部凹陷處連線的1/2處,用碘伏螺旋式消毒后,采血者用9#采血針在穿刺部位與皮膚垂直進(jìn)針2~3 cm深,回抽有回血時,用左手食指和中指夾持針管下部,緩慢抽取心臟血液2~3 mL,之后用干棉球按壓采血部位。
2.2.2 雛雞心臟采血。左手抓雞,局部消毒,右手持采血針,平行于頸椎從胸腔前口插入,回抽有回血時,即可將注射器拉桿向外牽拉使血液流入采血針管內(nèi)[5]。
2.2.3 注意事項。該方法用于多量血液采集,但不宜多次、連續(xù)采集,否則影響心臟恢復(fù),尤其對于雛雞心臟損傷較重,甚至引起雞只死亡。當(dāng)采血針頭刺入心臟時,操作者脫手可見針管隨心跳而擺動,此時可調(diào)節(jié)針頭深淺即可采出血液。若針管不擺動或擺動不明顯,需重新調(diào)整針頭[6]。心臟采血時動作要迅速,縮短采血針在心臟內(nèi)的停留時間,防止凝血。
2.3 翅靜脈采血
2.3.1 方法。助手將雞只仰臥保定,使雞翅內(nèi)側(cè)暴露,采血者先拔掉阻擋靜脈血管的羽毛,用碘伏棉球螺旋式消毒,左手拇指壓迫近心端,血管怒張后,右手持7#~9#采血針以15~30°的角刺入血管內(nèi),回抽采血器拉桿,見有少量回血時,放松對近心端的按壓,采血人員將采血針另一端插入真空管收集血液。如果用注射器采血時,要慢慢抽取血液以防止靜脈塌陷和出現(xiàn)氣泡。采血完畢后,用干棉球按壓局部30 s以上,再放開雞只。
2.3.2 注意事項。抽取血液時,速度不宜過快,否則血管易塌陷遮擋針口吸不出血液;采血完畢退出針頭時要用干棉球按壓止血30 s,以防出血。
2.4 頸靜脈采血
2.4.1 方法。常用于15~45日齡雛雞的采血,因右側(cè)靜脈較左側(cè)粗,所以多在右側(cè)靜脈采血。采血者左手食指和中指夾住雞頭部,并使頭部偏向一側(cè),拇指按壓頸椎使頸靜脈怒張,手掌和其他手指保定住雞只。右手持注射器,將針頭沿血管方向以45°的角刺入頸部皮膚及血管,在與血管平行進(jìn)針0.2~0.5 cm抽取血液,采血完畢后用干棉球按壓采血部位并退出針頭,防止出血。
2.4.2 注意事項。成年雞采血時需助手保定;皮膚顏色深的雞只采血時較困難。
3 血樣處理
3.1 全血處理
采血時先在采血管內(nèi)加抗凝劑,并旋轉(zhuǎn)使內(nèi)壁濕潤,采集的血液直接滴入加有抗凝劑的采血管內(nèi),立即搖動充分混合,根據(jù)需檢測的項目置于4~6 ℃冷藏備用,不能凍結(jié)[7]。
3.2 血清制備
若制備血清,采血時不需加抗凝劑。
3.2.1 方法一。采集好的血液滴入試管,將試管傾斜放置,置于室溫,2~4 h后,血液凝固,血清析出,用無菌剝離針剝離血凝塊,即可收集到血清。
3.2.2 方法二。若是用真空管收集的血液直接將真空管放入離心機(jī)進(jìn)行分離,如果兩端不對稱時,將空的離心管裝上與血液等量的水蓋緊代替進(jìn)行離心。當(dāng)離心機(jī)離心5~8 min后關(guān)閉電源,待離心機(jī)完全停止轉(zhuǎn)動時取出離心管進(jìn)行血清分離,即可得到血清。
總之,在雞血液的采集和處理過程中,既要注意節(jié)約人力及財力成本,又要減少對雞只的傷害和應(yīng)激反應(yīng),采血人員需多次勤加練習(xí),提高采血速度和質(zhì)量。
4 參考文獻(xiàn)
[1] 劉世榜.畜禽采樣常用的方法及注意事項[J].福建畜牧獸醫(yī),2013(6):54-55.
[2] 王葉錄.雞血樣的采集要求和方法[J].中國畜禽種業(yè),2013(7):135.
[3] 齊德林.禽的采血技術(shù)及注意事項[J].畜禽業(yè),2015(8):89-90.
[4]許勇團(tuán).雞的采血和病料的采集[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘,2014(6):50-51.
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[6] 簡玉洪,呂玉新,張祖勇,等.雞翅靜脈、心臟采血技術(shù)要點(diǎn)[J].貴州畜牧獸醫(yī),2015(2):62-63.
[7] 潘潔.動物防疫與檢疫技術(shù)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)出版社,2014:89.