陶金金, 賈春梅, 劉開運, 楊俊峰

(1.包頭醫(yī)學(xué)院研究生院，內(nèi)蒙古包頭 014060；2.包頭市第四醫(yī)院)

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槐杞黃顆粒對哮喘患兒白細(xì)胞介素-12的影響

陶金金1, 賈春梅2, 劉開運2, 楊俊峰2

(1.包頭醫(yī)學(xué)院研究生院，內(nèi)蒙古包頭 014060；2.包頭市第四醫(yī)院)

目的：通過觀察哮喘患兒血清白細(xì)胞介素-12(interleukin-12,IL-12)的血液濃度變化來判斷槐杞黃顆粒對哮喘患兒的治療作用。方法：選取哮喘患兒96例，分為觀察組及對照組，對照組給予糖皮質(zhì)激素和支氣管擴(kuò)張劑霧化吸入及口服白三烯受體拮抗劑治療。觀察組在對照組基礎(chǔ)上加用槐杞黃顆粒治療。選取健康體檢兒童30例作為健康兒童組。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)方法檢測觀察組及對照組患兒治療前后及健康兒童血清IL-12的水平。結(jié)果：觀察組治療前與對照組治療前相比以及它們與健康兒童組相比較，觀察組和對照組治療前相比較IL-12水平無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，兩組治療前IL-12水平均低于健康兒童組(P<0.05)。觀察組治療后與對照組治療后相比較以及它們與健康兒童組相比較，觀察組治療后IL-12升高水平較對照組明顯(P<0.05)，觀察組治療后及對照組治療后IL-12低于健康兒童組(P<0.05)。結(jié)論：IL-12可能參與哮喘的發(fā)病，使用槐杞黃顆粒可能通過提高IL-12水平達(dá)到對哮喘的治療作用。

哮喘；槐杞黃顆粒；白細(xì)胞介素-12；兒童

哮喘是兒童常見的慢性疾病，是一種異質(zhì)性疾病，常以慢性氣道炎癥為主要特征。且近年來發(fā)病呈上升趨勢，嚴(yán)重危害世界兒童的健康，其發(fā)病率為1 %～18 %。目前認(rèn)為Th1/Th2平衡失調(diào)，從而導(dǎo)致機體正常的免疫耐受功能受損，是哮喘發(fā)病的重要基礎(chǔ)。白細(xì)胞介素-12(interleukin-12,IL-12)為Th1細(xì)胞因子，近年來研究發(fā)現(xiàn)IL-12可能通過各個免疫環(huán)節(jié)參與哮喘的發(fā)病。槐杞黃顆粒近幾年廣泛用于免疫調(diào)節(jié)及呼吸道感染方面的治療。本研究旨在通過給予口服槐杞黃顆粒及常規(guī)治療后測定血清IL-12的濃度變化觀察槐杞黃顆粒對哮喘患兒的治療作用。

1 對象與方法

1.1 對象 選擇2014年8月至2015年9月就診于包頭市第四醫(yī)院的哮喘患兒88例，患兒均符合第8版實用兒科學(xué)哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)，隨機分為觀察組及對照組，觀察組43例，男30例、女13例，年齡(4.8±2.67)歲。對照組45例，男29例、女16例，年齡(4.96±2.74)歲。選取同期包頭市第四醫(yī)院兒科門診及健康體檢的兒童30例作為健康兒童組，其中男17例、女13例，年齡(4.48±1.26)歲。

1.2 方法

1.2.1 臨床用藥及檢查 兩組患兒均給予常規(guī)治療，對照組給予布地奈德霧化吸入及口服白三烯受體拮抗劑治療，觀察組加口服槐杞黃顆粒(啟動蓋天力藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號B20020074)，<3歲者5 g/d，>3歲者10 g/d，口服3個月。治療3個月后取血2 mL備檢，血樣-20 ℃冰箱保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)方法檢測血清IL-12水平。

2 結(jié)果

2.1 3組患兒治療前后IL-12水平比較 觀察組治療前、對照組治療前相比較以及它們與健康兒童組相比較，觀察組治療前及對照組治療前IL-12水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；兩組治療前較健康兒童組低(P<0.05)。觀察組治療后、對照組治療后相比較以及它們與健康兒童組相比較，觀察組治療后IL-12水平較對照組治療后高(P<0.05)，兩組治療后均低于健康兒童組(P<0.05)。見表1,表2。

表1 兩組患兒治療前與健康兒童組比較IL-12水平的變化

a為與健康兒童組比較P<0.05

表2 兩組患兒治療后與健康兒童組比較IL-12水平的變化

a為與健康兒童組比較P<0.05,b為與對照組治療后比較P<0.05

2.2 不良反應(yīng) 全部病例未見明顯不良反應(yīng)。

3 討論

哮喘是兒童最常見的慢性疾病，近年來發(fā)病呈上升趨勢，嚴(yán)重危害公共健康，引起了社會及學(xué)者的廣泛關(guān)注。它是一種多種細(xì)胞及細(xì)胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病，Th1/Th2細(xì)胞失衡在哮喘的發(fā)病中起重要作用。其主要特征是氣道慢性炎癥和部分可逆性的氣流受限。氣道重塑是支氣管哮喘重要的病理特征之一。常見的支氣管哮喘氣道重塑表現(xiàn)為上皮細(xì)胞損傷、杯狀細(xì)胞增生、黏液分泌增加、上皮下纖維化、基底膜增厚、平滑肌細(xì)胞增生，血管重建等。

正常人體細(xì)胞IL-12主要為單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、表皮內(nèi)朗罕細(xì)胞產(chǎn)生。IL-12在調(diào)節(jié)Th1/Th2的平衡過程中占重要作用。研究表明哮喘患者體內(nèi)IL-12的產(chǎn)生、分泌不足。IL-12可以加強Th1細(xì)胞的免疫應(yīng)答反應(yīng)，可以刺激Th1細(xì)胞因子干擾素的產(chǎn)生，抑制嗜酸性粒細(xì)胞聚集及減輕氣道的炎癥反應(yīng)。哮喘患兒樹突狀細(xì)胞功能不足，影響血清IL-12的分泌水平。有研究表明哮喘患兒經(jīng)脂肪酶刺激后外周單個核細(xì)胞可以產(chǎn)生少量IL-12[1]。動物實驗表明IL-12可以加重炎癥反應(yīng)[2]。IL-12能有效糾正哮喘小鼠Th細(xì)胞失衡，控制氣道炎癥，且能有效地抑制Th2細(xì)胞型免疫應(yīng)答反應(yīng)和氣道炎癥,同時可以降低IL-4信使核糖核酸的表達(dá)水平[3]。給予哮喘小鼠重組IL-12發(fā)現(xiàn)能夠在明顯改善哮喘小鼠氣道炎癥反應(yīng)的同時上調(diào)干擾素-γ的表達(dá)水平，抑制Th2型細(xì)胞的分化和增殖功能。

槐杞黃顆粒是由槐耳菌質(zhì)配伍枸杞子、黃精制成的顆粒劑?；辫近S顆粒的主要成分為槐耳菌質(zhì)?；倍缓倍|(zhì)多糖,具有很高的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)功能,能夠激發(fā)機體免疫反應(yīng)中諸多環(huán)節(jié),從而提高機體的免疫力。目前臨床上槐杞黃顆粒主要用于以下兩方面：(1)反復(fù)呼吸道感染：作用機制可能通過調(diào)節(jié)胰島素樣生長因子-1及提高機體免疫球蛋白A、G水平來發(fā)揮作用。在反復(fù)呼吸道感染患兒確實存在胰島素樣生長因子-1水平降低，表明其水平降低參與反復(fù)呼吸道感染的發(fā)病機制。對口服槐杞黃顆粒的患兒血清免疫球蛋白A、G、M及CD細(xì)胞系列水平進(jìn)行測定，患兒血清免疫球蛋白A、G、M有一定程度增高，CD3+、CD4+增高，尤其以CD4+增高明顯，CD4+/CD8+比值增高。結(jié)果表明槐杞黃顆?？赡芡ㄟ^調(diào)節(jié)T、B淋巴細(xì)胞的功能從而改善免疫功能[4]。反復(fù)呼吸道感染患兒使用槐杞黃顆?？梢酝ㄟ^降低炎癥反應(yīng)而使病情好轉(zhuǎn)。臨床使用過程中觀察到偶可見惡心及腹瀉不良反應(yīng)，未見其他嚴(yán)重不良反應(yīng)。(2)蛋白尿：槐杞黃能減輕阿霉素腎病大鼠模型的蛋白尿。推測槐杞黃顆粒治療腎病蛋白尿的機制可能是減少炎細(xì)胞的浸潤及纖維素增生，減少腎小球足細(xì)胞損害、抑制足細(xì)胞相關(guān)分子nephrin及podocin表達(dá)的減少,并通過改善足細(xì)胞相關(guān)分子nephrin及podocin的分布異常,從而達(dá)到穩(wěn)定腎小球裂孔隔膜分子屏障及電荷屏障,保持足突形態(tài)及功能、減少尿蛋白的療效[5]。各種研究表明槐杞黃顆粒副反應(yīng)甚微，且未見過敏、肝功能損害、骨髓抑制等嚴(yán)重不良反應(yīng)，同時具有保護(hù)腎臟的作用，可以作為蛋白尿的輔助治療藥物。

本研究中發(fā)現(xiàn)觀察組和對照組治療前IL-12水平較健康兒童低，推測IL-12可能參與哮喘的發(fā)病。且有研究表明哮喘患兒發(fā)作期及緩解期均存在IL-12水平較健康兒童低。觀察組及對照組治療后IL-12水平升高，觀察組治療后升高較對照組明顯，推測槐杞黃顆粒通過調(diào)節(jié)IL-12的水平對哮喘的治療可能發(fā)揮作用。有研究表明長期使用槐杞黃顆?？赏ㄟ^逆轉(zhuǎn)Th1和Th2細(xì)胞的免疫失衡達(dá)到對哮喘的早期干預(yù)作用，提高哮喘治愈率。動物實驗表明給予槐杞黃顆組低粒聯(lián)合霧化吸入治療，可以明顯提高巨噬細(xì)胞的吞噬能力，同時可以逆轉(zhuǎn)Th1/Th2細(xì)胞失衡，以及減輕氣道炎癥反應(yīng)。經(jīng)過槐杞黃顆粒治療3個月后測得免疫球蛋白A、G、M有一定程度升高,CD4和CD3增高,尤以CD4增高明顯,CD4/CD8增高。

本實驗結(jié)果顯示與對照組相比，觀察組患兒血清IL-12水平升高。由此推測槐杞黃顆粒可能通過對Th1/Th2型細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)，即上調(diào)IL-12的水平，改善失衡的Th1/Th2細(xì)胞功能。這可能是槐杞黃顆粒在哮喘的發(fā)病過程中發(fā)揮有效治療的作用機制之一。且槐杞黃顆粒臨床應(yīng)用后效果良好，未發(fā)現(xiàn)明顯副作用，值得在兒科臨床推廣應(yīng)用。

[1] Falcai A,Soeiro-Pereira PV,Kubo CA,et al.Peripheral blood mononuclear cells from severe asthmatic children release lower amounts of IL-12 and IL-4 after LPS stimulation[J].Allergol Immunopathol(Madr),2015,43(5):482-486.

[2] Smith T,Hewson AK ,Kingsley CI,et al.Interleukin-12 induces relapse in experim ental autoimmune encephalomyelitis in the Lewis rat[J].Am J Pathol,1997,150(6):1909-1917.

[3] 徐慧,申昆玲,殷菊,等.IL-12對小鼠哮喘模型Th亞群和氣道炎癥的影響[J]。臨床兒科雜志,2008,26(9):798-802.

[4] 韓志英.槐杞黃顆粒治療小兒反復(fù)呼吸道感染50例[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2004,24(6)：563-567.

[5] 孫雯，朱智，俞建，等.槐杧黃顆粒對阿霉素腎病大鼠腎組織nephrin和podocin表達(dá)的影響[J].中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報,2011, 9(5):546-552.

Effects of Huaiqihuang granule on IL-12 levels of children with asthma

TAO Jinjin，JIA Chunmei,LIU Kaiyun,YANG Junfeng

(1.GraduateSchoolofBaotouMedicalCollege，014060Baotou,China;2.TheFourthHospitalofBaotou，014030Baotou,China)

Objective:To evaluate the clinical effect of Huaiqihuang granule in the treatment of asthma in children by observing their blood concentration changes of serum interleukin-12 (IL-12). Methods: 96 cases of children with asthma were selected and divided into experimental group and control group. The patients in the control group received glucocorticoid and bronchodilators inhalation, combined with oral leukotriene receptor antagonist treatment. The children in the experimental group were treated with additional Huaiqihuang granule on the basis of treatment in the control group. 30 cases of healthy children were selected as healthy children group. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was adopted to detect the serum IL-12 levels of children in the experimental and control group before and after the treatment as well as of healthy children. Results:Before treatment there was not significant difference between the IL-12 levels in the experimental group and control group (P>0.05); The IL-12 levels in the two groups before treatment were lower than that in the healthy children group (P<0.05). After treatment the IL-12 levels in the experimental group increased higher than that in the control group (P<0.05) and the IL-12 levels in the two groups were lower than that in the healthy children group (P<0.05). Conclusion:IL-12 may be involved in the pathogenesis of asthma，and the use of Huaiqihuang granule may increase IL-12 level to achieve a therapeutic effect on asthma.

Asthma; Huaiqihuang granule; IL-12; Children

賈春梅

2015-09-04)