戎青陸棟徐志榮盧焰陳靖

（1，江蘇省靖江市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 214500；2，江蘇省靖江市畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心 214500）

為做好生豬重大疫病強(qiáng)制免疫工作，有效降低生豬強(qiáng)制免疫勞動(dòng)強(qiáng)度，提高生豬免疫密度和免疫質(zhì)量，探索新的、便捷高效的生豬強(qiáng)制免疫方式，推進(jìn)動(dòng)物防疫工作技術(shù)創(chuàng)新，靖江市于2016年5月～2017年9月組織開展了生豬口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病強(qiáng)制免疫 “三針同免”技術(shù)試驗(yàn)，至2017年9月底試驗(yàn)項(xiàng)目已實(shí)施結(jié)束?，F(xiàn)將本試驗(yàn)報(bào)告如下。

1 試驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)施背景

目前靖江市生豬年常年存欄18萬頭，其中能繁母豬1.85萬頭，年上市壯豬15萬頭，出欄苗豬20萬頭。在對(duì)生豬實(shí)際免疫過程中，實(shí)行28日齡首免豬高致病性藍(lán)耳病、35日齡二免（將豬瘟、豬口蹄疫分點(diǎn)免疫注射）和30d后三免的方式。根據(jù)現(xiàn)行免疫程序，每頭商品豬從出生到出售需強(qiáng)制免疫7針次、每頭苗豬需免疫5針次，每頭能繁母豬每年至少免疫8針次。

本試驗(yàn)計(jì)劃采用豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病活疫苗混合稀釋后一次性注射到豬耳后頸部一側(cè)肌肉，另外一側(cè)注射豬口蹄疫疫苗，即通過 “三針同免”的方式進(jìn)行免疫，每頭苗豬免疫減少1針次，基層動(dòng)物防疫人員到戶次數(shù)減少1次以上。如果免疫效果能達(dá)標(biāo)，推廣運(yùn)用后，防疫員工作量將減少30.9%。

2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與操作

2.1 試驗(yàn)地點(diǎn)

經(jīng)過篩選，全市共選取6個(gè)試點(diǎn)村進(jìn)行 “三針同免”免疫試驗(yàn)。

試點(diǎn)村分別為馬橋鎮(zhèn)白衣（東）村、斜橋鎮(zhèn)筱山村、孤山鎮(zhèn)樂稼村、生祠鎮(zhèn)漲公、地藏村、季市鎮(zhèn)星光村等六個(gè)村共計(jì)欄存生豬5860頭，生豬飼養(yǎng)戶224戶，其中100頭以上24戶、50～100頭34戶、50頭以下166戶；以上6個(gè)村生豬規(guī)模場較少，散養(yǎng)戶比例較大，近幾年從未發(fā)生過生豬重大疫情，符合試點(diǎn)條件。

2.2 試前準(zhǔn)備

2.2.1 受試豬選擇

本試驗(yàn)選取健康狀況良好，近期未注射豬瘟、豬口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病疫苗的養(yǎng)殖生豬。其他生豬按原來的免疫程序進(jìn)行免疫。

2.2.2 疫苗選擇

免疫試驗(yàn)所采用的疫苗是政府采購中標(biāo)疫苗，豬瘟苗（耐熱細(xì)胞苗，北京獸醫(yī)生物制藥廠，批號(hào)：161310）、高致病性豬藍(lán)耳病苗（江西弱毒苗，揚(yáng)州威克生物制藥廠，批號(hào)：0116025、0116046）、豬口蹄疫苗（合成肽苗、上海申聯(lián)生物制藥廠，批號(hào)：20160707、20161103）。

2.2.3 試驗(yàn)器材

已消毒的20ml注射器和12×25、12×20號(hào)注射針頭及工作服、雨鞋、消毒藥等。

3 免疫注射

3.1 免疫日齡

28日齡用高藍(lán)弱毒苗、豬瘟苗、O型口蹄疫免疫；56日齡用豬瘟、O型口蹄疫疫苗加強(qiáng)免疫。

3.2 注射方法及免疫劑量

豬瘟活疫苗、高致病性豬藍(lán)耳病活疫苗用一種稀釋液同等份混合稀釋后一次性注射到豬耳后頸部一側(cè)肌肉，另外一側(cè)肌肉注射豬口蹄疫疫苗。劑量按照疫苗說明書使用劑量進(jìn)行，每頭豬免疫劑量為1頭份。

在免疫后及時(shí)觀察有無明顯的臨床免疫副反應(yīng)，及時(shí)做好免疫記錄（含免疫時(shí)間、免疫劑量、免疫頭數(shù)、疫苗生產(chǎn)廠家、生產(chǎn)批號(hào)、耳標(biāo)號(hào)碼等）及副反應(yīng)記錄。

免疫過程未發(fā)現(xiàn)異常情況。

3.3 試點(diǎn)村免疫注射情況

2017年3月～6月共免疫生豬265戶4505頭次。其中馬橋鎮(zhèn)免疫112戶，首免1155頭，二免720頭；斜橋鎮(zhèn)57戶，首免635頭，二免407頭；孤山鎮(zhèn)45戶，免549頭，二免315頭；生祠鎮(zhèn)10戶，首免125頭，二免86頭；季市鎮(zhèn)41戶，首免385頭，二免128頭。

4 樣品采集

2017年6月15日組織人員對(duì)每個(gè)試點(diǎn)村進(jìn)行采樣，采樣對(duì)象為第二次免疫注射28d后的生豬，采樣方法為前腔靜脈采血，共計(jì)采集樣本110份。各鎮(zhèn)采樣數(shù)如下：馬橋鎮(zhèn)20份，斜橋鎮(zhèn)25份，孤山鎮(zhèn)23份，生祠鎮(zhèn)16份，季市鎮(zhèn)26份。

5 檢測結(jié)果

5.1 檢測試劑盒及檢測方法

豬瘟檢測：北京愛德士元亨生物科技，豬瘟病毒抗體檢測試劑盒，阻斷ELISAII法。

高藍(lán)檢測：韓國LSA，豬繁殖和呼吸綜合征抗體檢測試劑盒，間接ELISA法。

豬口蹄疫檢測：上海優(yōu)耐特生物，豬口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體酶聯(lián)免疫吸附診斷試劑盒，ELISA法。

5.2 抗體檢測結(jié)果

共檢測110份，豬瘟抗體合格91份，各鎮(zhèn)抗體檢測合格數(shù)及合格率分別為馬橋20份、100%，斜橋21份、84%，孤山21份、91%，生祠16份、100%，季市13份、50%，總合格率83%；豬藍(lán)耳病抗體合格106份，其中馬橋、斜橋、孤山、生祠合格率均為100%，季市合格22份，合格率85%，總合格率96%；豬口蹄疫抗體合格110份，總合格率100%。

5.3 同期原免疫方法群體檢測結(jié)果

同時(shí)對(duì)鄰近試點(diǎn)村同一防疫員防疫的其他生豬免疫情況進(jìn)行了檢測，以此作為對(duì)照。共檢測150份，各鎮(zhèn)分別檢測30份樣本。其中豬瘟抗體合格129份，各鎮(zhèn)抗體檢測合格數(shù)及合格率分別為馬橋29份、97%，斜橋19份、63%，孤山28份、93%，生祠30份、100%，季市23份、77%，總合格率86%；豬藍(lán)耳病抗體合格140份，其中馬橋29份、97%，斜橋28份、93%，孤山27份、90%，生祠30份、100%，季市26份、87%，總合格率93%；豬豬口蹄疫抗體合格146份，馬橋、斜橋、孤山、生祠四鎮(zhèn)合格率100%，季市26份，87%，總合格率97%。

6 試驗(yàn)結(jié)果分析

6.1 “三針同免”抗體水平高于上級(jí)免疫抗體檢測標(biāo)準(zhǔn)，免疫效果較好

從檢測結(jié)果看，此次 “三針同免”抗體結(jié)果與原免疫方案（對(duì)照組）的豬抗體水平相比豬瘟低3%，豬藍(lán)耳病高3%，豬口蹄疫高3%。從檢測結(jié)果可以看出 “三針同免”的三種疫苗群體抗體水平都在80%以上，超過了上級(jí)免疫檢測群體抗體合格率達(dá)到80%的標(biāo)準(zhǔn)。從整體結(jié)果分析，各試點(diǎn)村的免疫抗體水平與對(duì)照組相比，沒有明顯差異。

季市鎮(zhèn)星光村采集的樣品豬瘟抗體合格率明顯偏低（合格率為50%），其主要原因是該村防疫員將本應(yīng)冷藏保存的豬瘟耐熱疫苗錯(cuò)誤地進(jìn)行了冷凍保存，從而影響豬瘟疫苗的免疫效果。

6.2 免疫工作效率提高，社會(huì)效益明顯

從 “三針同免”的可行性看，生豬重大疫病 “三針同免”，可一次性將三種國家要求的強(qiáng)制免疫疫苗同時(shí)注射，達(dá)到比較滿意的免疫效果，有效降低生豬強(qiáng)制免疫工作強(qiáng)度，提高免疫工作效率和工作質(zhì)量。

從養(yǎng)殖戶的角度來看，“三針同免”非常適合進(jìn)行春秋兩季集中免疫的開展，“三針同免”同時(shí)也減少了生豬對(duì)養(yǎng)殖戶的勞動(dòng)量，降低了免疫對(duì)生豬的應(yīng)激，更容易被散養(yǎng)戶所接受，有較大的社會(huì)效益，有利于以后的全面推廣。

7 幾點(diǎn)建議

7.1 應(yīng)用范圍

“三針同免”適宜于散養(yǎng)生豬。防疫時(shí)注意避免孕、弱、病豬的免疫。同時(shí)建立適時(shí)補(bǔ)免制度，適時(shí)對(duì)新生、補(bǔ)欄、康復(fù)、漏免的生豬進(jìn)行補(bǔ)免，確保免疫密度及免疫保護(hù)力。

對(duì)于規(guī)模豬場，免疫病種較多，不同病種免疫抗體水平要求高，應(yīng)制定適合本場的免疫程序。

7.2 疫苗使用

疫苗選擇。本次試驗(yàn)是采用政府采購中標(biāo)疫苗進(jìn)行免疫。如采用其他種類疫苗，應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn)。

運(yùn)輸、保管。疫苗運(yùn)輸、保存過程中一定要確保嚴(yán)格按照該品種疫苗的保存要求運(yùn)輸、保存。運(yùn)輸過程中一定要確保冷鏈到位，確保免疫用疫苗不失效。

正確稀釋疫苗。使用一種稀釋液按1：1先后稀釋相同頭份數(shù)的豬瘟、高藍(lán)活疫苗，保證1毫升混合疫苗中有豬瘟、高藍(lán)疫苗各1頭份。

7.3 免疫過程

免疫注射要科學(xué)、規(guī)范、安全操作。免疫時(shí)使用不同的注射器，應(yīng)做好區(qū)分，防止注射器交叉使用。

將豬瘟、高藍(lán)疫混合疫苗與豬口蹄疫疫苗于豬耳后頸部分兩側(cè)注射。免疫過的生豬要做好標(biāo)記，防止漏免和重復(fù)免疫。