豬瘟免疫程序優(yōu)化及免疫效果評價(jià)

季文亞（江蘇省常熟市海虞動物防疫站 215500）

豬瘟（Classical Swine Fever，CSF）是一種急性，發(fā)熱，高度接觸性傳染病，發(fā)病不分年齡和豬種，嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展。該病的毒株多樣，亞型復(fù)雜[1]。病豬為主要的傳染源，豬瘟病毒經(jīng)過豬的糞便，尸體和分泌物等傳播。被污染的墊草，料槽，飲用水等也是主要傳播途徑。該病的潛伏期為5～7d，根據(jù)臨床癥狀的不同可將此病分為最急性型、急性型、慢性型和溫和型4種類型。該病的主要預(yù)防措施是免疫接種，可以使用的疫苗有乳兔苗，細(xì)胞苗和淋脾苗。在發(fā)生疫情時(shí)，應(yīng)及時(shí)做出診斷，并向上級相關(guān)部門報(bào)告，及時(shí)采取處理措施淘汰掉病死豬。平日飼養(yǎng)管理中加強(qiáng)豬場的衛(wèi)生管理，以減少豬瘟病毒的侵襲。雖然我國目前對豬瘟采取強(qiáng)制免疫措施，對防止該病爆發(fā)性流行有積極意義。但部分豬場仍然存在非典型豬瘟，嚴(yán)重影響豬場經(jīng)濟(jì)效益和生物安全。豬瘟是否發(fā)生與豬瘟疫苗的免疫效果有很大關(guān)系，而豬瘟疫苗免疫效果受免疫程序影響。定期對豬場抗體水平進(jìn)行監(jiān)測，能更好的了解豬群抵抗力，以便及時(shí)采取措施，增強(qiáng)豬群抵抗力。本試驗(yàn)通過對江蘇常熟某規(guī)模化豬場的豬瘟抗體水平進(jìn)行檢測，分析母源抗體變化規(guī)律，提出免疫程序優(yōu)化建議，優(yōu)化后的豬群免疫效果有顯著提高。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物基本情況

該試驗(yàn)于江蘇常熟某豬場中進(jìn)行，豬場內(nèi)的存欄母豬有1200多頭，采取全進(jìn)全出的飼養(yǎng)模式。

豬場免疫程序說明：該場種豬每年接種3次豬瘟疫苗，每次4頭份，商品豬在其20日齡時(shí)進(jìn)行第一次接種，用量為1頭份，60日齡時(shí)接種第二次，用量為2頭份。使用的豬瘟疫苗為細(xì)胞源苗。

1.2 試劑盒

試驗(yàn)所用試劑盒為豬瘟病毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)抗體檢測試劑盒（阻斷ELSIA），在23℃恒溫箱中進(jìn)行操作，按照使用說明，根據(jù)阻斷率判定抗體水平。

1.3 試驗(yàn)方法

隨機(jī)選取母豬30頭，距離首次免疫一個月的保育豬30頭，二次免疫后一個月的生長育肥豬30頭。采集其前腔靜脈血4ml，離心機(jī)分離血清，使用豬瘟病毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)抗體檢測試劑盒檢測所選樣本的抗體水平。

從20窩相同日齡的新生仔豬中隨機(jī)抽取每窩3頭仔豬，并給這60頭仔豬打耳號。在其7、14、21、28、35和42日齡時(shí)采取靜脈血，用來檢測豬瘟的母源抗體水平，保證能夠科學(xué)的制定免疫程序。根據(jù)所測結(jié)果，分析母源抗體水平的發(fā)展規(guī)律，將該場的豬瘟疫苗免疫程序進(jìn)行優(yōu)化，優(yōu)化后的首次免疫時(shí)間為仔豬35日齡，二次免疫時(shí)間為仔豬65日齡。監(jiān)測免疫程序優(yōu)化后的抗體水平比較免疫效果。

在優(yōu)化免疫程序后的首次免疫和二次免疫一個月后，隨機(jī)抽取25頭豬只采集其靜脈血監(jiān)測抗體水平。連續(xù)監(jiān)測3批豬群。

2 結(jié)果與分析

優(yōu)化免疫程序首次免疫和二次免疫一個月，隨機(jī)抽取25頭豬只采集其靜脈血監(jiān)測抗體水平結(jié)果，見表1，表2。

2.1 第1次豬瘟免疫抗體檢測結(jié)果

根據(jù)檢測結(jié)果可知，該場母豬豬瘟免疫抗體水平較高，抗體合格率達(dá)94%，抗體平均阻斷率85.12%，抗體變異系數(shù)為24.59%。但采用免疫程序?yàn)?0日齡首次免疫，60日齡二次免疫的保育豬，免疫抗體水平較低，變異系數(shù)高：首次免疫后豬瘟抗體合格率為35%，抗體平均阻斷率為35.05%，抗體變異系數(shù)為42.15%。在60日齡二次免疫后合格率為61%，抗體平均阻斷率為59.98%，抗體變異系數(shù)為33.25%（參見表1）。說明該豬場當(dāng)前的免疫程序效果并不好。

2.2 仔豬母源抗體消長規(guī)律

表1 第一次免疫抗體檢測結(jié)果

表2 免疫程序優(yōu)化后豬群抗體水平檢測

通過母源抗體檢測結(jié)果可知，仔豬在14日齡前從初乳中獲得大量免疫蛋白，所以母源抗體水平較高，合格率能夠達(dá)到100%，抗體平均阻斷率在85%以上，變異系數(shù)小于15%；14日齡后的抗體水平逐漸下降，到28日齡母源抗體合格率下降65%左右；28日齡后母源抗體水平下降速度變快，35日齡時(shí)母源抗體合格率僅為35%，平均阻斷率為45.26%，仔豬生長到42日齡時(shí)母源抗體合格率下降為15%，平均阻斷率下降到30.22%，變異系數(shù)升高到35.63%。

2.3 免疫程序優(yōu)化后豬群豬瘟免疫抗體檢測結(jié)果

在優(yōu)化免疫程序后，對3批豬在其首次免疫和二次免疫一個月后分別檢測豬瘟抗體水平。結(jié)果表明，首次免疫后，3個批次豬群的的抗體合格率分別增長到55%，60%和80%?？贵w平均阻斷率分別增加到52.84%，54.89%和63.88%。變異系數(shù)分別下降為34.52%，30.22%和15.32%。在二次免疫后，3個批次豬群的的抗體合格率分別增長到90%，90%和95%?？贵w平均阻斷率分別增加到64.09%，65.33%和68.36%。變異系數(shù)分別下降為17.34%，11.53%和10.47%（參見表2）。可見，優(yōu)化免疫程序能夠大大的增強(qiáng)免疫效果。在35日齡進(jìn)行首次免疫，65日齡進(jìn)行二次免疫能夠使豬瘟細(xì)胞源疫苗的免疫效果更好。

3 討論

豬瘟細(xì)胞源疫苗評價(jià)指標(biāo)主要有抗體合格率，抗體平均阻斷率和抗體變異系數(shù)。飼養(yǎng)管理良好，消毒措施全面，采取全進(jìn)全出制的豬場能更好的控制疾病，減少隱性感染率，豬群抗體合格率會有較高水平，變異系數(shù)也會很低。

對該豬場進(jìn)行第1次豬瘟抗體檢測可知，豬場內(nèi)母豬體內(nèi)抗體水平較為理想，抗體合格率達(dá)到94%，變異系數(shù)較低，平均阻斷率較高，但保育豬和生長育肥豬的豬瘟抗體水平較差，在首次免疫和二次免疫后一個月的抗體合格率僅為35%和61%，且抗體變異系數(shù)高達(dá)40%左右，說明該豬場目前采取的20日齡首次免疫，60日齡進(jìn)行二次免疫的免疫程序不能達(dá)到理想免疫效果，且低于農(nóng)業(yè)部規(guī)定的豬瘟抗體合格率70%的最低要求，視為免疫失敗。

豬瘟病毒流行毒株具有多樣性和復(fù)雜的基因亞型，但有研究表明，“C”株疫苗仍可對現(xiàn)在流行的豬瘟野毒有很好的保護(hù)作用[1]。雖然仔豬可以通過吸食母乳獲得母源抗體來抵御豬瘟病毒，但母源抗體水平會隨仔豬日齡增長逐漸降低，因此，需要接種疫苗來使豬只持續(xù)存在抵抗力。在豬場日常管理中，豬瘟疫苗免疫失敗的情況經(jīng)常發(fā)生，主要是由于免疫程序不恰當(dāng)，本次試驗(yàn)也表明，優(yōu)化后的免疫程序能使豬群獲得良好免疫效果。20日齡進(jìn)行豬瘟疫苗的首次免疫時(shí)間太早，35日齡時(shí)接種為佳，二次免疫時(shí)間為65日齡為佳。有研究表明，母源抗體水平能明顯抑制豬瘟疫苗的主動免疫[2]。這也是導(dǎo)致免疫失敗的一個原因。免疫程序優(yōu)化后，連續(xù)對3批次豬群進(jìn)行抗體抽樣檢測，可見抗體合格率有大幅度的提高，抗體變異系數(shù)明顯降低。但在首次免疫后，抗體合格率仍舊沒達(dá)到70%，需要進(jìn)行更多的試驗(yàn)繼續(xù)優(yōu)化免疫程序，以使豬瘟疫苗達(dá)到最理想的免疫效果。

[1]宋立,王琴,涂長春,等.豬瘟兔化弱毒抗體對不同野毒株體內(nèi)外中和保護(hù)試驗(yàn)的相關(guān)性研究[J].中國獸醫(yī)學(xué)報(bào),2005,25(2):113-115.

[2]Vandeputte J,Too H L,NG F K,et al.Adsorption of colostralantbodies against classical swine fever,persistence ofmaternalantibodies,and effection response to vaccination in baby pigs[J].America journal of veterinary research,2001,62(11):1805-1811.