賈 巖，金歡歡，李蒙蒙，王 玲，王飛蝦，張晨曦，張 峰, 2, 3，鄭仕中, 2, 3

[南京中醫(yī)藥大學(xué)1. 江蘇省中藥藥效與安全性評價重點實驗室、2. 江蘇省中藥功效物質(zhì)重點實驗室、3. 中藥品質(zhì)與效能國家重點實驗室(培育)，江蘇 南京 210023]

肝臟是機體最重要的代謝和解毒器官，各種致病因子損傷肝臟時，肝臟的正常生理和生化功能將會減弱，最終導(dǎo)致肝病的發(fā)生[1]。根據(jù)持續(xù)時間肝損傷分為急性和慢性損傷。急性肝損傷嚴(yán)重時，肝細(xì)胞大量壞死或凋亡，導(dǎo)致肝細(xì)胞數(shù)量急劇衰減，最終引起急性肝衰竭[2]。慢性肝損傷是由于炎癥或細(xì)胞內(nèi)應(yīng)激反應(yīng)(如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和線粒體應(yīng)激)導(dǎo)致的長期肝臟損傷。常見的慢性肝損傷包括酒精和非酒精性脂肪性肝炎、肝纖維化和肝硬化等。急性和慢性肝損傷均能導(dǎo)致肝細(xì)胞死亡，一般伴隨血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase，ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate transaminase，AST)水平的升高。慢性肝病中持續(xù)性的肝細(xì)胞死亡將誘發(fā)炎癥、肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cells, HSC)活化并轉(zhuǎn)變成肌成纖維細(xì)胞，最終發(fā)生肝硬化和肝細(xì)胞癌[3]。因此，抑制急性、慢性肝損傷中的肝細(xì)胞死亡是修復(fù)肝臟或抑制繼發(fā)性炎癥和纖維化的重要治療策略[4]。新近研究發(fā)現(xiàn)，肝細(xì)胞存在程序性壞死(necroptosis)這一新的死亡形式，并且在急、慢性肝損傷中扮演重要角色。該文對近年來這一方面的研究進(jìn)展作一綜述，旨在為肝病的病理機制與相關(guān)治療藥物的研究提供新的視角。

1 細(xì)胞程序性壞死的特征與調(diào)控機制

2005年，Degterev等[5]正式提出一種受信號分子調(diào)控，使細(xì)胞在缺乏半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)的情況下死亡，具有典型壞死樣形態(tài)的新型細(xì)胞死亡形式，即程序性壞死。雖然程序性壞死與凋亡有共同的上游分子機制，但是兩者結(jié)果不同。程序性壞死的最終結(jié)果是線粒體功能障礙，細(xì)胞器及細(xì)胞腫脹破裂，質(zhì)膜透化，細(xì)胞內(nèi)含物漏出，周圍組織產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。與凋亡相區(qū)別的是，程序性壞死不影響核固縮，不產(chǎn)生核小體DNA片段[6]。

現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，死亡受體(death receptor, DR)超家族、Toll樣受體(Toll-like receptor, TLR)等可執(zhí)行程序性壞死，其中研究最廣泛的是死亡受體超家族誘導(dǎo)的程序性壞死。死亡受體超家族包含腫瘤壞死因子受體1(tumor necrosis factor receptor 1, TNFR1)、自殺相關(guān)因子(factor associated suicide, Fas)、DR3、DR4等[7]。腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)是啟動程序性壞死最重要的因子[8]。TNF-α與細(xì)胞膜上TNFR1結(jié)合，募集細(xì)胞內(nèi)多種蛋白形成復(fù)合體I。復(fù)合體Ⅰ包括 TNF 受體相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域(TNF receptor associated death domain, TRADD)、受體相互作用蛋白激酶1(receptor interaction protein kinase 1, RIPK1)、TNFR 相關(guān)因子2(TNF receptor factor 2, TRAF2 )、TRAF5 、胞內(nèi)凋亡蛋白抑制因子1(cellular inhibitor of apoptosis protein, cIAP1)、cIAP2以及泛素酶復(fù)合體。復(fù)合體Ⅰ中RIPK1泛素化將激活NF-κB或絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信號，進(jìn)而抑制細(xì)胞死亡。當(dāng)復(fù)合體Ⅰ中的TNFR1解離時，RIPK1發(fā)生去泛素化，并與RIPK3、TRADD、Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白(fas associated death domain, FADD)及caspase-8形成復(fù)合體Ⅱ。復(fù)合體Ⅱ中的caspase-8切割 RIPK1，使其失活，RIPK3無法磷酸化，細(xì)胞將發(fā)生凋亡。如果caspase-8被敲除或抑制，去泛素化的RIPK1和RIPK3通過它們的RIP同型作用結(jié)構(gòu)域(RIP homology interaction motif, RHIM)相互作用，形成一種募集激酶MLKL(mixed-lineage kinase domainlike, MLKL)的復(fù)合體[9]。MLKL被RIPK3激活后，磷酸化的MLKL形成四聚體靶向線粒體，產(chǎn)生大量的活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)，導(dǎo)致線粒體通透性改變[10-11]。另有研究表明，MLKL可誘導(dǎo)細(xì)胞毒性的鈣或鈉離子流，隨后轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜，導(dǎo)致膜破裂[12]。對于程序性壞死最終是通過線粒體ROS途徑，還是依賴于MLKL誘導(dǎo)形成的通透性孔道，導(dǎo)致細(xì)胞死亡尚存在爭議，有待于進(jìn)一步研究揭示。

2 急性肝損傷中的肝細(xì)胞程序性壞死

2.1藥源性肝損傷藥物誘導(dǎo)的肝損傷具有復(fù)雜的臨床特征，缺乏客觀的診斷方式。大多數(shù)的藥物靶向何種肝臟細(xì)胞并不明確，本文主要對研究較成熟的對乙酰氨基酚(acetaminophen, APAP)所致的肝損傷進(jìn)行總結(jié)。APAP使用過量時，可通過影響CYP450系統(tǒng)，進(jìn)而引起肝細(xì)胞毒性，常致急性肝細(xì)胞損傷甚至急性肝衰竭。APAP誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡一直被認(rèn)為是壞死性的，不依賴于caspase和TNFR。這種死亡方式將導(dǎo)致線粒體功能障礙和ROS產(chǎn)生、ATP消耗、線粒體通透性改變。近來人們認(rèn)識到，APAP導(dǎo)致的肝細(xì)胞死亡是一種細(xì)胞壞死的調(diào)節(jié)性模式，即程序性壞死[13]。

小鼠APAP模型與藥物所致的人肝損傷中，肝細(xì)胞程序性壞死程度都明顯增強，肝功能受損。臨床研究發(fā)現(xiàn)，APAP誘導(dǎo)的肝衰竭病人肝細(xì)胞中出現(xiàn)了程序性壞死特異性標(biāo)志物，即磷酸化的MLKL，且其磷酸化程度伴隨不同程度的肝細(xì)胞壞死，提示肝細(xì)胞程序性壞死可能誘導(dǎo)APAP所致的人肝衰竭，而抗癌藥物達(dá)拉菲尼(也是一種RIPK3抑制劑)，可以抑制APAP造成的人肝細(xì)胞程序性壞死[10,14]。Zhang等[15]發(fā)現(xiàn)，小鼠腹腔注射APAP(300 mg·kg-1)1 h后，肝臟發(fā)生急性衰竭，RIPK1大量表達(dá)；給予RIPK1選擇性抑制劑Necrostatin-1(Nec-1)預(yù)處理，肝細(xì)胞壞死減少，肝細(xì)胞存活率明顯提高，急性肝衰竭得到明顯改善。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，這些作用與JNK磷酸化及Bax易位被抑制相關(guān)。另有研究表明，Nec-1可通過減少肝細(xì)胞中ROS的生成，改善APAP所致的肝細(xì)胞程序性壞死[16]。利用RIPK3全敲除小鼠的APAP模型，Ramchandran等[17]發(fā)現(xiàn)，APAP作用6 h后，RIPK3全敲除明顯減輕APAP(200～300 mg·kg-1)的肝毒性；在APAP作用24 h后，RIPK3全敲除對肝臟的保護(hù)作用不明顯。此外，Deutsch等[18]報道，RIPK3全敲除具有抗APAP(700 mg·kg-1)毒性作用，并且小鼠存活率升高。以上結(jié)果提示，實驗條件(如APAP制備不同)以及小鼠品系不同造成了結(jié)果差異，但均表明RIPK3缺失能夠減輕APAP的肝毒性。因此，藥物調(diào)節(jié)程序性壞死關(guān)鍵因子RIPKs水平可以成為減輕藥源性肝損傷的一個有效策略。然而，Dara等[19]使用MLKL敲除小鼠，給予APAP(300 mg·kg-1)處理，肝損傷并未明顯減輕，這與臨床研究APAP誘導(dǎo)的肝衰竭病人肝細(xì)胞中MLKL表達(dá)異常的結(jié)果相悖，提示我們動物的基因型與人存在一定的差異性，APAP所致的肝細(xì)胞壞死可能還依賴于其他機制。因此，需要進(jìn)一步研究并詳細(xì)闡明肝細(xì)胞程序性壞死在APAP誘導(dǎo)的肝損傷中的作用。

2.2免疫性肝損傷刀豆蛋白A常用于誘導(dǎo)免疫性急性肝損傷。刀豆蛋白A可以直接激活T細(xì)胞，通過免疫系統(tǒng)靶向肝細(xì)胞，隨后巨噬細(xì)胞、枯否細(xì)胞活化，并募集單核細(xì)胞至肝臟，造成肝損傷[20]。除了免疫細(xì)胞，肝竇內(nèi)皮細(xì)胞通過介導(dǎo)肝臟血液的高凝狀態(tài)和炎癥應(yīng)答參與肝損傷[21]。研究發(fā)現(xiàn)，小鼠靜脈注射刀豆蛋白A(25 mg·kg-1)，感染后的早期出現(xiàn)肝細(xì)胞凋亡，后期出現(xiàn)大量的肝細(xì)胞壞死。刀豆蛋白A感染期間肝細(xì)胞內(nèi)caspase幾乎沒有活性，其誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡形式主要是壞死性的[22]。

體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠感染刀豆蛋白A前尾靜脈注射Nec-1，與對照組相比，血清中ALT與AST水平及致死率明顯下降[23]。Jouan-Lanhouet等[24]在小鼠感染刀豆蛋白A前給予Nec-1處理15 min，發(fā)現(xiàn)血清中ALT水平下降50%，組織損傷也明顯減輕；另外，聚(ADP-核糖)聚合酶-1(PARP-1)的活化減少，表明PARP-1或許是RIPK-1的下游因子。后期研究發(fā)現(xiàn)，RIPK1與PARP-1的抑制可以降低肝細(xì)胞白介素-33(interleukin-33, IL-33)的表達(dá)，減輕肝細(xì)胞程序性壞死。因此，抑制IL-33介導(dǎo)的過度性炎癥反應(yīng)或許是減輕肝細(xì)胞程序性壞死的重要舉措。Deutsch等[18]發(fā)現(xiàn)，在刀豆蛋白A致肝損傷模型中，RIPK3的敲除使小鼠肝損傷減輕。然而，有臨床研究表明MLKL在自身免疫性肝炎病人的肝臟中上調(diào)并且活化，其不依賴RIPK3，而是通過轉(zhuǎn)錄因子STAT1影響促炎癥因子干擾素-γ(interferon-γ, IFN-γ)，發(fā)揮細(xì)胞毒性作用[25]。最新研究發(fā)現(xiàn)，MLKL的敲除使刀豆蛋白A所致的小鼠肝損傷有所減輕。有趣的是，在刀豆蛋白感染肝臟后，RIPK1和MLKL蛋白表達(dá)增加，而RIPK3的蛋白表達(dá)沒有變化，與臨床研究結(jié)果一致[26]。我們推測，程序性壞死可能存在其他的調(diào)節(jié)因素。MLKL除了介導(dǎo)經(jīng)典的RIPK3依賴性程序性壞死，還可以介導(dǎo)非典型的程序性壞死途徑，這為臨床治療免疫性肝損傷的新藥研發(fā)提供了新的實驗依據(jù)。盡管程序性壞死的調(diào)控機制需要深入研究，但是其對免疫性肝炎防治具有重要的臨床價值。

3 慢性肝損傷中的肝細(xì)胞程序性壞死

3.1酒精性脂肪肝病酒精性脂肪肝病(alcoholic fatty liver disease, AFLD)是過量飲酒引起的肝細(xì)胞損傷性疾病。長期酒精攝入可以導(dǎo)致肝臟脂肪變性，誘導(dǎo)脂肪性肝炎，表現(xiàn)為炎癥反應(yīng)、細(xì)胞死亡、肝臟纖維化，最終導(dǎo)致肝硬化甚至肝細(xì)胞癌。目前，已有研究發(fā)現(xiàn)，乙醇暴露誘導(dǎo)肝細(xì)胞程序性壞死，酒精性脂肪肝的發(fā)生、發(fā)展與肝細(xì)胞程序性壞死密切相關(guān)。

有研究報道，AFLD病人的肝臟組織中RIPK3的表達(dá)異常，肝臟出現(xiàn)一系列的病理改變?nèi)绺渭?xì)胞脂質(zhì)聚集、轉(zhuǎn)氨酶升高[27]。在酒精喂養(yǎng)的小鼠肝臟中，RIPK3大量表達(dá)，肝臟中央靜脈周圍組織呈RIPK3陽性染色，而RIPK3全敲除小鼠的血清ALT水平下降、脂肪變性程度得到改善[27-28]。Bakhautdin等[29]研究發(fā)現(xiàn)，在酒精喂養(yǎng)的小鼠肝臟中，血紅素加氧酶-1可以通過降低RIPK3的表達(dá)，減輕肝細(xì)胞壞死，改善肝損傷。此外，與對照組相比，RIPK3敲除小鼠肝組織的甘油三酯、TNF-α水平下降，炎癥細(xì)胞數(shù)量減少，肝臟損傷得到改善，此過程依賴于細(xì)胞色素P450 2E1(CYP2E1)介導(dǎo)的乙醇代謝。另有研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素改善酒精誘導(dǎo)的肝細(xì)胞程序性壞死；深入的機制研究發(fā)現(xiàn)，Nrf2敲低使RIPK3異常表達(dá)，加劇酒精性肝損傷，削弱了姜黃素對肝細(xì)胞程序性壞死的抑制作用，說明其依賴于Nrf2/p53途徑[30]。現(xiàn)有的研究結(jié)果直接表明，RIPK3是一個關(guān)鍵的致肝損傷因子，并明確了肝細(xì)胞程序性壞死參與調(diào)節(jié)酒精性脂肪肝的病理進(jìn)程，其可能通過抑制肝細(xì)胞的炎癥及脂肪變性，減輕酒精性脂肪肝程度。RIPK3特異性抑制劑的研發(fā)將有利于AFLD的防治。

3.2非酒精性脂肪肝病非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)與基因、環(huán)境、代謝應(yīng)激等相關(guān)，其疾病譜包括肝臟單純性脂肪變性、非酒精性脂肪肝炎(nonalcoholic steatohepatitis, NASH)、肝硬化甚至肝細(xì)胞癌。NAFLD的發(fā)病機制目前還未完全闡明[31]。

研究表明，NASH的病人肝組織中RIPK3和p-MLKL表達(dá)增加，而RIPK3敲除明顯減輕蛋氨酸-膽堿飲食小鼠的脂肪變性和炎癥反應(yīng)[32]。在甲硫氨酸-膽堿缺乏的NASH小鼠模型中，RIPK3表達(dá)增加，并且RIPK3的激活由JNK活化介導(dǎo)。有趣的是，肝臟特異性caspase-8敲除小鼠在正常飲食時，肝臟中RIPK3表達(dá)增加，肝損傷加重[33]。這可能是在胚胎敲除的動物模型中出現(xiàn)了代償性反應(yīng)，但是其機制尚不清楚。Alfonso等[32]發(fā)現(xiàn)，RIPK3基因敲除可減輕高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠肝損傷；后續(xù)的體外研究發(fā)現(xiàn)，大鼠原代肝細(xì)胞中RIPK3的缺失可抑制氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的肝細(xì)胞程序性壞死。此外，抑制caspase并不能阻止TNF/CHX誘導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡，對肝細(xì)胞程序性壞死的研究造成一定的影響。這可能是由于蛋氨酸-膽堿缺乏造成的胰島素抵抗異常，以及免疫組化中使用的抗體是非特異性結(jié)合的。這也提示我們蛋氨酸-膽堿缺乏模型不是理想的NASH模型，使用優(yōu)良的動物模型及特異性抗體，將有利于我們更好地探究肝細(xì)胞程序性壞死。另外，NAFLD的發(fā)生與發(fā)展受多種復(fù)雜因素影響，目前肝細(xì)胞程序性壞死在NAFLD病理進(jìn)程中的詳細(xì)機制尚不清楚，如能了解肝細(xì)胞程序性壞死在NAFLD發(fā)生發(fā)展各個階段的具體機制，以及與其他信號通路之間的相互作用，就可以通過抑制肝細(xì)胞程序性壞死，減輕高脂飲食誘導(dǎo)的肝損傷，為抗NAFLD研究提供新思路。

3.3肝纖維化肝纖維化是多種慢性肝病的共同病理過程，是肝臟損傷后自我修復(fù)的代償性反應(yīng)。肝損傷時，壞死的肝臟實質(zhì)細(xì)胞釋放多種促炎癥因子，以旁分泌途徑刺激HSC，使其大量增殖并活化，分泌大量細(xì)胞外基質(zhì)成分形成纖維化。隨著程序性壞死在肝病中的研究不斷增多，程序性壞死在肝纖維化中的作用研究成為新的熱點。

最近研究發(fā)現(xiàn)，程序性壞死可以調(diào)節(jié)肝細(xì)胞死亡而加重肝纖維化。體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，小鼠給予蛋氨酸-膽堿缺乏飲食8周后，肝臟中Ι型膠原明顯增加，出現(xiàn)纖維化。Caspase-8敲除后，伴隨大量的RIPK3表達(dá)，肝臟纖維化明顯加劇。然而caspase-8/RIPK3雙敲除小鼠的肝纖維化明顯改善，表明程序性壞死加劇NASH誘導(dǎo)的肝纖維化。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，四氯化碳(carbon tetrachloride，CCl4)誘導(dǎo)肝細(xì)胞程序性壞死，但是caspase-8/RIPK3雙敲除并未明顯改善CCl4導(dǎo)致的小鼠肝纖維化[33]。因此，RIPK3或許介導(dǎo)了脂肪肝相關(guān)的纖維化。

Choi等[34]研究發(fā)現(xiàn)，褪黑激素可以降低CCl4誘導(dǎo)的大鼠纖維化肝臟中RIPK1、RIPK3、MLKL的表達(dá)，還可以抑制HMGB-1、IL-1α的表達(dá)。這表明褪黑激素可以通過抑制程序性壞死相關(guān)的炎癥信號傳導(dǎo)，改善肝纖維化。體內(nèi)實驗發(fā)現(xiàn)，誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的化學(xué)性抑制劑PJ34(PARP-1抑制劑)和Nec-1能夠降低肝細(xì)胞特異性的IL-33的表達(dá)，從而減輕肝細(xì)胞程序性壞死造成的肝纖維化損傷[35]。由此可見，抑制肝細(xì)胞程序性壞死能夠減輕肝纖維化，這一作用可能與抑制炎癥應(yīng)答相關(guān)因子如IL-1、IL-33的表達(dá)有關(guān)，說明Nec-1具有抑制過度炎癥應(yīng)答的作用，其對抑制肝纖維化等慢性肝損傷中的炎癥具有良好的應(yīng)用前景。有研究結(jié)果指出，活化型HSC、肝竇內(nèi)皮細(xì)胞中RIPK1、RIPK3大量表達(dá)[35-36]。肝臟非實質(zhì)細(xì)胞或許也存在程序性壞死現(xiàn)象，進(jìn)而誘導(dǎo)肝損傷。因此，RIPKs的缺失對肝臟的保護(hù)作用是由于肝細(xì)胞內(nèi)在機制，還是通過影響其他肝臟細(xì)胞產(chǎn)生的，尚需進(jìn)一步研究。但不可否認(rèn)的是，肝細(xì)胞程序性壞死在不同病因誘導(dǎo)的肝纖維化進(jìn)程中的作用舉足輕重。

4 結(jié)論

綜合已有的研究發(fā)現(xiàn)，肝細(xì)胞程序性壞死在急性和慢性肝損傷的發(fā)生與發(fā)展過程中均發(fā)揮著重要作用，其關(guān)鍵性調(diào)節(jié)因子RIPK1、RIPK3、MLKL可能有助于為臨床肝病治療的藥物篩選提供新的靶標(biāo)。然而，目前人們對肝細(xì)胞程序性壞死的認(rèn)識尚不全面，如研究肝細(xì)胞程序性壞死的動物模型都是在caspase抑制或敲除條件下建立的，對于生理情況下程序性壞死如何發(fā)生尚不清楚；肝細(xì)胞程序性壞死與其他信號通路之間存在怎樣的相互作用，仍有待加深思考與探究。此外，程序性壞死對肝臟中不同類型的細(xì)胞是否作用也不同；藥物對細(xì)胞程序性壞死的作用是否是多方面的。有關(guān)程序性壞死在肝損傷中的研究還存在許多不足，隨著對程序性壞死的機制及其功能全面而深入的研究，細(xì)胞程序性壞死將有可能成為治療肝臟疾病的一個新方向，而開發(fā)出能夠靶向調(diào)節(jié)不同細(xì)胞類型程序性壞死功能的藥物，將為肝病防治帶來新的突破。

[1] 許文萱, 張自力, 趙士峰, 等. 法尼酯衍生物X受體在慢性肝病中的作用及機制研究進(jìn)展[J]. 中國藥理學(xué)通報, 2016,32(3):314-9.

[1] Xu W X, Zhang Z L, Zhao S F, et al. Research progress of the role and mechanism of FXR in chronic liver disease[J].ChinPharmacolBull, 2016,32(3):314-9.

[2] Chang B, Xu M J, Zhou Z, et al. Short-or long-term high-fat diet feeding plus acute ethanol binge synergistically induce acute liver injury in mice: an important role for CXCL1[J].Hepatology, 2015,62(4):1070-85.

[3] Wang K. Autophagy and apoptosis in liver injury[J].CellCycle, 2015,14(11):1631-42.

[4] Luedde T, Kaplowitz N, Schwabe R F. Cell death and cell death responses in liver disease: mechanisms and clinical relevance[J].Gastroenterology, 2014,147(4):765-83.

[5] Degterev A, Huang Z, Boyce M, et al. Chemical inhibitor of nonapoptotic cell death with therapeutic potential for ischemic brain injury[J].NatChemBiol, 2005,1(2):112-9.

[6] Pasparakis M, Vandenabeele P. Necroptosis and its role in inflammation[J].Nature, 2015,517(7534):311-20.

[7] Linkermann A, Green D R. Necroptosis[J].NEnglJMed, 2014,370(5):455-65.

[8] Galluzzi L, Kroemer G. Necroptosis: a specialized pathway of programmed necrosis[J].Cell, 2008,135(7):1161-3.

[9] Declercq W, Vanden Berghe T, Vandenabeele P. RIP kinases at the crossroads of cell death and survival[J].Cell, 2009,138(2):229-32.

[10] Wang H, Sun L, Su L, et al. Mixed lineage kinase domain-like protein MLKL causes necrotic membrane disruption upon phosphorylation by RIP3[J].MolCell, 2014,54(1):133-46.

[11] Wang Z, Jiang H, Chen S, et al. The mitochondrial phosphatase PGAM5 functions at the convergence point of multiple necrotic death pathways[J].Cell, 2012,148(1-2):228-43.

[12] Chen X, Li W, Ren J, et al. Translocation of mixed lineage kinase domain-like protein to plasma membrane leads to necrotic cell death[J].CellRes, 2014,24(1):105-21.

[13] Yang X, Chao X, Wang Z T, et al. The end of RIPK1-RIPK3-MLKL-mediated necroptosis in acetaminophen-induced hepatotoxicity[J].Hepatology, 2015,64(1): 311-2.

[14] Li J X, Feng J M, Wang Y, et al. The B-Raf(V600E) inhibitor dabrafenib selectively inhibits RIP3 and alleviates acetaminophen-induced liver injury[J].CellDeathDis, 2014,5(6):e1278.

[15] Zhang Y F, He W, Zhang C, et al. Role of receptor interacting protein(RIP)1 on apoptosis-inducing factor-mediated necroptosis during acetaminophen-evoked acute liver failure in mice[J].ToxicolLett, 2014,225(3):445-53.

[16] Takemoto K, Hatano E, Iwaisako K, et al. Necrostatin-1 protects against reactive oxygen species(ROS)-induced hepatotoxicity in acetaminophen-induced acute liver failure[J].FEBSOpenBio, 2014,4(1):777-87.

[17] Ramachandran A, McGill M R, Xie Y, et al. Receptor interacting protein kinase 3 is a critical early mediator of acetaminophen-induced hepatocyte necrosis in mice[J].Hepatology, 2013,58(6):2099-108.

[18] Deutsch M, Graffeo C S, Rokosh R, et al. Divergent effects of RIP1 or RIP3 blockade in murine models of acute liver injury[J].CellDeathDis, 2015,6(5):e1759.

[19] Dara L, Johnson H, Suda J, et al. Receptor interacting protein kinase 1 mediates murine acetaminophen toxicity independent of the necrosome and not through necroptosis[J].Hepatology, 2015,62(6):1847-57.

[20] Zheng F, Devoogdt N, Sparkes A, et al. Monitoring liver macrophages using nanobodies targeting Vsig4: concanavalin A induced acute hepatitis as paradigm[J].Immunobiology, 2015,220(2):200-9.

[21] Kato J, Okamoto T, Motoyama H, et al. Interferon-gamma-mediated tissue factor expression contributes to T-cell-mediated hepatitis through induction of hypercoagulation in mice[J].Hepatology, 2013,57(1):362-72.

[22] Ni H M, Chen X, Ding W X, et al. Differential roles of JNK in ConA/GalN and ConA-induced liver injury in mice[J].AmJPathol, 2008,173(4):962-72.

[23] Zhou Y, Dai W, Lin C, et al. Protective effects of necrostatin-1 against concanavalin A-induced acute hepatic injury in mice[J].MediatorsInflamm, 2013,2013:706156.

[24] Jouan-Lanhouet S, Arshad M I, Piquet-Pellorce C, et al.TRAIL induces necroptosis involving RIPK1/RIPK3-dependent PARP-1 activation[J].CellDeathDiffer, 2012,19(12):2003-14.

[25] Dara L, Liu Z X, Kaplowitz N. A murder mystery in the liver: who done it and how[J]?JClinInvest, 2016,126(11):4068-71.

[26] Günther C, He G W, Kremer A E, et al. The pseudokinase MLKL mediates programmed hepatocellular necrosis independently of RIPK3 during hepatitis[J].JClinInvest, 2016,126(11): 4346-60.

[27] Roychowdhury S, McMullen M R, Pisano S G, et al. Absence of receptor interacting protein kinase 3 prevents ethanol-induced liver injury[J].Hepatology, 2013,57(5):1773-83.

[28] Wang S, Ni H M, Dorko K, et al. Increased hepatic receptor interacting protein kinase 3 expression due to impaired proteasomal functions contributes to alcohol-induced steatosis and liver injury[J].Oncotarget, 2016,7(14):17681-98.

[29] Bakhautdin B, Das D, Mandal P, et al. Protective role of HO-1 and carbon monoxide in ethanol-induced hepatocyte cell death and liver injury in mice[J].JHepatol, 2014,61(5):1029-37.

[30] Lu C, Xu W, Zhang F, et al. Nrf2 knockdown disrupts the protective effect of curcumin on alcohol-induced hepatocyte necroptosis[J].MolPharm, 2016,13(12):4043-53.

[31] 張晨曦, 卞勉勵, 陳星燃, 等. 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞在肝臟疾病中的作用[J]. 中國藥理學(xué)通報, 2017,33(2):149-53.

[31] Zhang C X, Bian M L, Chen X R, et al. Roles of liver sinusoidal endothelial cells in liver diseases[J].ChinPharmacolBull, 2017,33(2):149-53.

[32] Afonso M B, Rodrigues P M, Carvalho T, et al. Necroptosis is a key pathogenic event in human and experimental murine models of non-alcoholic steatohepatitis[J].ClinSci, 2015,129(8):721-39.

[33] Gautheron J, Vucur M, Reisinger F, et al. A positive feedback loop between RIP3 and JNK controls non-alcoholic steatohepatitis[J].EMBOMolMed, 2014,6(8):1062-74.

[34] Choi H S, Kang J W, Lee S M. Melatonin attenuates carbon tetrachloride-induced liver fibrosis via inhibition of necroptosis[J].TranslRes, 2015,166(3):292-303.

[35] Arshad M I, Piquet-Pellorce C, Filliol A, et al. The chemical inhibitors of cellular death, PJ34 and Necrostatin-1, down-regulate IL-33 expression in liver[J].JMolMed, 2015,93(8):867-78.

[36] Chang Y J, Hsu S L, Liu Y T, et al. Gallic acid induces necroptosis via TNF-α signaling pathway in activated hepatic stellate cells[J].PLoSOne, 2015,10(3):e0120713.