張 燕 馬 嵋

(1.新疆維吾爾自治區(qū)實(shí)驗(yàn)動物研究中心,新疆烏魯木齊 830002; 2.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院教學(xué)管理科,新疆烏魯木齊 830054)

構(gòu)建白內(nèi)障動物模型的研究進(jìn)展

張 燕1馬 嵋2

(1.新疆維吾爾自治區(qū)實(shí)驗(yàn)動物研究中心,新疆烏魯木齊 830002; 2.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院教學(xué)管理科,新疆烏魯木齊 830054)

目前，在世界范圍內(nèi)白內(nèi)障排在致盲眼科疾病的首位，白內(nèi)障預(yù)防和治療就是眼科科研重點(diǎn)。由于患者晶狀體的透明性受到多種因素的影響，并且白內(nèi)障表現(xiàn)出的高度異質(zhì)性，使得白內(nèi)障的臨床表現(xiàn)分類較多，根據(jù)患者發(fā)病年齡、病因或是晶狀體的渾濁程度、發(fā)生部位、渾濁形態(tài)等方面不同將白內(nèi)障大致分為年齡相關(guān)性、創(chuàng)傷性、代謝性白內(nèi)障等。建立白內(nèi)障動物模型，是現(xiàn)代眼科醫(yī)學(xué)研究十分重要的手段之一，動物模型可以模仿各種病因或發(fā)病機(jī)制復(fù)雜的白內(nèi)障，可以在有限的時(shí)間內(nèi)，復(fù)制研究需要數(shù)量、具有可比性且在患者眼部不易得到的白內(nèi)障癥狀素材，克服其他有可能產(chǎn)生干擾的因素影響，為科研人員進(jìn)行白內(nèi)障疾病基礎(chǔ)性研究提供可靠手段及工具。

1 遺傳性、先天性白內(nèi)障動物模型的制作

遺傳性、先天性的白內(nèi)障可能由染色體的異常或基因突變等因素引起?？茖W(xué)家制作該病動物模型的常用手段主要有以下3個(gè)途徑：

（1）在大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)動物群體中偶然發(fā)現(xiàn)自發(fā)式基因突變導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)動物，經(jīng)過繁育手段，保持其常染色體顯性遺傳或隱性基因遺傳的特性?？茖W(xué)家建立PAX6（5a）、aphakia及OPL轉(zhuǎn)基因小鼠或基因突變小鼠等品系，就是利用基因手段導(dǎo)致小鼠眼部晶狀體在早期的發(fā)育階段出現(xiàn)突變建立的白內(nèi)障模型。Hfi、Aey5小鼠是通過特定基因敲除建立的改變小鼠晶狀體上皮細(xì)胞晶狀體膜的性狀改變建立的白內(nèi)障小鼠模型。

（2）利用物理或者化學(xué)方法誘導(dǎo)基因突變，可以在短時(shí)間內(nèi)建立需要的動物模型。常用的物理方法包括X-射線輻照、γ-射線電磁輻射等導(dǎo)致基因缺失和突變，化學(xué)方法一般利用乙?；鶃喯趸?、甲基芐肼等試劑誘導(dǎo)點(diǎn)突變，可以建立顯性或隱性遺傳的白內(nèi)障動物模型。

（3）通過對不同基因組位點(diǎn)定向打靶或定向敲除方法，可以得到特定的染色體組缺失、失活、移位、倒位或突變的先天白內(nèi)障轉(zhuǎn)基因小鼠，從而簡化和縮短動物模型構(gòu)建過程。

2 老年性白內(nèi)障動物模型的制作

10歲以上的白內(nèi)障獼猴、萘誘發(fā)形成白內(nèi)障動物模型、Emory白內(nèi)障小鼠及OXYS白內(nèi)障大鼠等動物模型的發(fā)病規(guī)律，晶狀體結(jié)構(gòu)及渾濁形成部位等都與人類老年性白內(nèi)障極為相似，是研究人類老年性白內(nèi)障的理想模型。

3 硒性白內(nèi)障動物模型的制作

選用大小鼠為實(shí)驗(yàn)動物，在其藥物敏感的幼年期，配制高濃度的亞硒酸鹽采取多次小劑量或一次性大劑量通過皮下注射、腹腔注射或口服的方式，誘發(fā)幼年期的實(shí)驗(yàn)動物形成白內(nèi)障。利用新西蘭兔制作此模型尚在研究中，技術(shù)手段并未完全成熟。此外，制作晶狀體組織培養(yǎng)液，在其中添加亞硒酸鹽，同樣可以誘發(fā)晶狀體產(chǎn)生渾濁，形成白內(nèi)障模型。

4 創(chuàng)傷性白內(nèi)障動物模型的制作

創(chuàng)傷性的白內(nèi)障，通常是由于眼部晶狀體受到尖銳穿透傷或是鈍器擊傷，擦挫傷時(shí)，晶狀體細(xì)胞受損，出現(xiàn)渾濁，最終導(dǎo)致白內(nèi)障的形成。目前最常采用針頭刺穿晶狀體或是用針頭等利器在晶狀體前囊刺劃形成創(chuàng)傷，還可以用鈍性重物如鐵球、手術(shù)錘等多次反復(fù)擊打?qū)嶒?yàn)動物的眼部，觀察記錄晶狀體出現(xiàn)渾濁的時(shí)間，控制白內(nèi)障形成過程。

5 化學(xué)試劑、激素誘發(fā)白內(nèi)障動物模型的制作

化學(xué)試劑誘發(fā)的白內(nèi)障動物模型除了前面提到的萘誘發(fā)形成白內(nèi)障動物模型、硒性白內(nèi)障動物模型以外，糖性白內(nèi)障動物模型也是由化學(xué)試劑誘發(fā)動物體內(nèi)血糖異常，從而引起白內(nèi)障癥狀出現(xiàn)的一種動物模型。最常使用鏈脲菌屬配合弗式完全佐劑、四氧嘧啶、D-半乳糖、葡萄糖、木糖、他克莫司等均可以建立模擬人類血糖異常，出現(xiàn)明顯的白內(nèi)障并發(fā)癥狀。

王建偉等人建立出核性白內(nèi)障動物模型，就是應(yīng)用激素類藥物引起晶狀體后囊下渾濁，此類白內(nèi)障模型又明顯與其他模型形成機(jī)理不同。

6 超聲乳化手術(shù)白內(nèi)障動物模型的制作

針對臨床手術(shù)的醫(yī)生，建立簡單有效的白內(nèi)障動物模型，為醫(yī)生超聲乳化手術(shù)前預(yù)實(shí)驗(yàn)提供技術(shù)訓(xùn)練模型。此類白內(nèi)障模型的通用制作方法一般采用羊眼，固定后撕囊注射適量甲醛溶液，不同深度，多次注射后觀察白內(nèi)障癥狀的形成。這種白內(nèi)障動物模型對于手術(shù)醫(yī)生練習(xí)劈核技術(shù)、醫(yī)生掌握和體會晶狀體形態(tài)，軟硬程度，厚薄程度、直徑大小很有幫助。

目前的科技手段和藥物，還沒有能完全攻克人類白內(nèi)障疾病。根據(jù)不同的病因，疾病發(fā)展過程，建立相應(yīng)的白內(nèi)障疾病動物模型，是為模擬人類白內(nèi)障發(fā)病原因，病程進(jìn)展，藥物研發(fā)及藥效評價(jià)，手術(shù)方案、技術(shù)確定及更新等基礎(chǔ)性和臨床研究提供重要載體。

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