景維華
(甘肅省平?jīng)鍪徐`臺(tái)縣畜牧獸醫(yī)局,甘肅靈臺(tái) 744400)
日糧營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)犏牛血液生化指標(biāo)的影響
景維華
(甘肅省平?jīng)鍪徐`臺(tái)縣畜牧獸醫(yī)局,甘肅靈臺(tái) 744400)
本實(shí)驗(yàn)對(duì)在不同日糧營(yíng)養(yǎng)水平下血液中總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)含量進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果表明:三種酶含量最高為90%Ⅵ期,T-AOC在90%Ⅵ與60%Ⅵ期期間差異極其顯著;SOD在60%Ⅵ期與30%Ⅵ期間差異極其顯著;GSH-PX在100%Ⅵ期與90%Ⅵ期間差異極其顯著。
犏牛 營(yíng)養(yǎng)水平 抗氧化酶 日糧 代謝試驗(yàn)
犏牛是牦牛和黃牛的一代雜種,對(duì)海拔3000m以上的高寒草地生態(tài)環(huán)境保持較強(qiáng)的適應(yīng)性,無(wú)論是雄性還是雌性,都有顯著的雜種優(yōu)勢(shì),在生長(zhǎng)發(fā)育、體重及生產(chǎn)性能上均優(yōu)于親代〔1〕。這些特性與犏牛長(zhǎng)期生活在高寒缺氧的惡劣環(huán)境是相適應(yīng)的。自由基的平衡主要得益于抗氧化酶,它們能將氧自由基〔O2〕歧化為H2O2,再變?yōu)镠2O而被清除。本實(shí)驗(yàn)試圖通過(guò)測(cè)定在特殊環(huán)境下生存的犏牛血漿中總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)水平受日糧營(yíng)養(yǎng)的影響狀況,探索當(dāng)?shù)仃?寡趸胶膺m宜的飼養(yǎng)水平,使其生產(chǎn)力得以提高;同時(shí)也使得該草原生態(tài)系統(tǒng)得以健康發(fā)展。
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
于甘肅省武威市天??h烏鞘嶺放牧牛群中選取,體況接近、營(yíng)養(yǎng)狀況良好的3歲閹犏牛3頭。在枯草季節(jié)(11月至第二年4月)舍飼主飼麥秸、燕麥草等,補(bǔ)飼少量精料,牧草返青后以放牧為主。實(shí)驗(yàn)前與當(dāng)?shù)仫曫B(yǎng)牛群混養(yǎng),試驗(yàn)期間,按3階拉丁方設(shè)計(jì)飼喂,每天為3頭牛添加足量飲水。實(shí)驗(yàn)共分為兩個(gè)時(shí)期:第1階段為自由采食期,所有牛單槽飼喂燕麥青干草,每天9:00、14:00、17:00時(shí)3次飼喂,足量添加15d,確定自由采食量(Ⅵ)為3347.4g;第2階段為設(shè)定飼喂期,每頭牛分別以自由采食量的90%(3122.723g)、60%(2018.033 g)、30%(997.75 g)分3個(gè)時(shí)期飼喂,每期17d,每天9:00、14:00、17:00時(shí)3次飼喂。
1.2 樣品制備
每期第17d晨9:00飼前,用剪毛剪剪掉犏牛頸部被毛,露出皮膚,以5#針頭靜脈采血。將血液置于400 ul肝素預(yù)處理過(guò)的15ml離心管內(nèi),緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)離心管,使肝素充分混入血液內(nèi)。于2000r/ min條件離心10min;取上層血漿并分裝編號(hào),在-20℃冰箱中保存。
1.3 測(cè)定方法及儀器
1.3.1 試劑
總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所;冰醋酸為國(guó)產(chǎn)分析純,實(shí)驗(yàn)用水均為去離子水。
1.3.2 實(shí)驗(yàn)儀器
U2800分光光度計(jì)(日本日立高技術(shù)公司)、Finnpipette微量移液器(上海雷勃分析儀器有限公司)、22K型高速離心機(jī)(長(zhǎng)沙英泰儀器有限公司)、HH-W420數(shù)顯三用恒溫水箱(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司)、XW-80A漩渦混合器(上海精科實(shí)業(yè)有限公司)。
1.4 數(shù)據(jù)處理
采用SPSS13.0 for Windows統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行,均值差異顯著性用LSD法進(jìn)行比較。
不同飼養(yǎng)水平對(duì)犏牛血漿SOD 、GSH-PX、T-AOC活性的影響:
通過(guò)試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出:血漿中SOD的含量從100%Ⅵ到90%Ⅵ間呈顯著上升趨勢(shì),90%Ⅵ時(shí)達(dá)到最大的123.7233 U/ml;而從90%Ⅵ到30%Ⅵ則均呈下降趨勢(shì),其中60%Ⅵ與30%Ⅵ時(shí)含量差異及其顯著(p<0.01)。血漿中GSH-PX的含量從100%Ⅵ到90%Ⅵ間呈顯著上升趨勢(shì),90%Ⅵ時(shí)達(dá)到最大的185.9367U/ml,且90%Ⅵ與60%Ⅵ相鄰兩個(gè)飼喂水平差異顯著(0.01<p<0.05),60%Ⅵ與30%Ⅵ相鄰兩個(gè)飼喂水平也差異顯著(0.01<p<0.05)。血漿中T-AOC含量總體變化不大,90%Ⅵ時(shí)達(dá)到21.33667 U/ml,其中100%Ⅵ到90%Ⅵ含量上升不顯著,60%Ⅵ與30%Ⅵ兩個(gè)時(shí)期間差異也不顯著,只有90%Ⅵ到60%Ⅵ含量差異極其顯著的下降。
從60%Ⅵ到30%Ⅵ這一時(shí)期內(nèi),SOD含量從99.1566 U/ml下降到47.5633 U/ml,而GSH-PX含量從33.28333U/ml上升到105.9933U/ ml.這與機(jī)體的抗氧化系統(tǒng)內(nèi)可能存在某種抗氧化能力總量的動(dòng)態(tài)平衡機(jī)制有關(guān),即作為抗氧化體系的SOD和GSH-PX在某種狀態(tài)下,并非同時(shí)上升同時(shí)下降。而是一種互補(bǔ)的體系,一種機(jī)制激活時(shí)另一種處于被抑制。
從100%Ⅵ到90%Ⅵ三種酶含量均上升。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是自由基產(chǎn)生的基礎(chǔ),大多數(shù)自由基來(lái)自于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的酶促反應(yīng)或非酶促反應(yīng),這個(gè)過(guò)程中需要ATP,而ATP的產(chǎn)生必然與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有直接關(guān)系。從100%Ⅵ到90%Ⅵ這個(gè)階段內(nèi)隨著營(yíng)養(yǎng)攝入的減少,如前邊所闡述的那樣,氧自由基的產(chǎn)生也減少;而抗氧化物質(zhì)的減少速度不及氧自由基的,所以三種酶含量均上升。當(dāng)犏牛的營(yíng)養(yǎng)水平處于100%Ⅵ到90%Ⅵ階段時(shí),自由基的產(chǎn)生于消除相平衡。
研究表明不同營(yíng)養(yǎng)狀況對(duì)犏牛體內(nèi)抗氧化能力有明顯影響,犏牛最佳抗氧化狀態(tài)在其90%Ⅵ時(shí)。但仍有以下幾個(gè)問(wèn)題沒有搞清楚:第1,SOD和GSH-PX的含量和小于T-AOC含量;第2,GSH-PX在60%Ⅵ到30%Ⅵ階段時(shí)含量上升。
[1] 沙米,田可川,張艷花.高原牧區(qū)犏牛胚胎移植技術(shù)的應(yīng)用研究[J].草食家畜,2003,(3):121.