張伯恒

抗 SP100 抗體和抗 GP210 抗體在原發(fā)性膽汁性肝硬化診斷中的意義

張伯恒

目的 探討抗核體蛋白抗體（抗 SP100 抗體）和抗核孔膜蛋白抗體（抗 GP210 抗體）在原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）的診斷價(jià)值。方法 選擇本科收治的128例PBC患者作為病例組，同時(shí)選擇1 208例非PBC患者作為對(duì)照組，采用免疫印跡法分別檢測(cè)兩組患者的抗 SP100 抗體、抗 GP210 抗體、抗AMA-M2抗體水平，并計(jì)算抗 SP100 抗體、抗 GP210 抗體、抗AMA-M2抗體診斷PBC的特異性及敏感性。結(jié)果 抗 SP100 抗體、抗 GP210抗體、抗AMA-M2抗體檢測(cè)敏感性分別為27.34%、39.06%、66.41%，特異性分別為99.09%、99.50%、97.76%。結(jié)論 抗 SP100抗體和抗 GP210 抗體在PBC診斷中均具有較高的特異度，且與抗AMA-M2抗體聯(lián)合檢測(cè)可有效提高PBC的檢出率。

原發(fā)性膽汁性肝硬化；抗 SP100 抗體；抗 GP210 抗體

原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）屬于一種自身免疫性肝病，研究顯示[1]，抗核體蛋白抗體（抗SP100抗體）、抗核孔膜蛋白抗體（抗GP210抗體）在PBC的臨床診斷應(yīng)用十分廣泛。本研究旨在探討抗SP100 抗體和抗 GP210 抗體在原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）診斷的價(jià)值，以期為原發(fā)性膽汁性肝硬化的診斷提供實(shí)驗(yàn)室參考依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2015年1月—2016年12月本科收治的128例原發(fā)性膽汁淤積性肝硬化患者作為病例組，排除其他疾病導(dǎo)致的肝硬化患者。同時(shí)選擇本院同期收治的1 208例非原發(fā)性膽汁性肝硬化患者作為對(duì)照組，其中類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）330例，干燥綜合征（SS）202例，系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）56例，系統(tǒng)性硬化癥（SSC）32例，混合性結(jié)締組織病（MCTD）60例，痛風(fēng)64例，骨關(guān)節(jié)炎251例，脊柱關(guān)節(jié)病213例。

1.2 方法

采用免疫印跡法分別檢測(cè)兩組患者的抗 SP100 抗體、抗GP210 抗體、抗AMA-M2抗體水平，試劑盒由德國(guó)IMTEC公司提供，實(shí)驗(yàn)室操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作步驟如下：在溫育槽中放置一膜條，將1 ml稀釋液加至每個(gè)槽內(nèi)，1 min后將稀釋液倒掉，以1：100稀釋待檢血清，然后取1 ml加至溫育槽內(nèi)，并在搖床溫育30 min，然后將槽內(nèi)的液體倒掉，使用1.5 ml清洗液清洗膜條，共清洗3次，每次清洗的時(shí)間為5 min，每一次洗滌后均將洗液倒掉。然后在槽內(nèi)加入1 ml稀釋過(guò)的酶結(jié)合物，再在搖床上溫育30 min，然后將槽內(nèi)的液體倒掉，使用1.5 ml清洗液清洗膜條，共清洗3次，每次清洗的時(shí)間為5 min，每一次洗滌后均將洗液倒掉。然后將1 ml酶底物加至槽內(nèi)，在搖床上溫育10 min，將酶底物倒掉，并使用1.5 ml蒸餾水清洗，清洗1 min后將蒸餾水倒掉，并加入終止液1 ml，在搖床上溫育5 min，吸干膜條上的水分判定結(jié)果。根據(jù)結(jié)果計(jì)算抗 SP100 抗體、抗 GP210 抗體、抗AMA-M2抗體診斷PBC的特異性及敏感性。

2 結(jié)果

128例PBC患者中，抗 SP100 抗體、抗 GP210 抗體、抗AMA-M2抗體陽(yáng)性者分別為35例、50例、85例。1 208例非PBC患者中，抗 SP100 抗體、抗 GP210 抗體、抗AMA-M2抗體陽(yáng)性者分別為11例、6例、27例。

抗 SP100 抗體、抗 GP210 抗體、抗AMA-M2抗體檢測(cè)敏感性分別為27.34%、39.06%、66.41%，特異性分別為99.09%、99.50%、97.76%?？笰MA-M2抗體陰性的PBC患者共43例，其中26例（60.47%）抗SP100抗體陽(yáng)性，25例（58.14%）抗GP210抗體陽(yáng)性。

3 討論

原發(fā)性膽汁性肝硬化屬于一種進(jìn)行性慢性肝臟病，主要由免疫介導(dǎo)使得小膽管受到破壞，進(jìn)一步引發(fā)慢性膽汁淤積，并導(dǎo)致匯管區(qū)出現(xiàn)炎癥及纖維化，最后導(dǎo)致肝硬化的發(fā)生[2]。PBC的病因尚未完全明了，目前普遍認(rèn)為PBC的發(fā)生主要是在基因遺傳背景改變下，環(huán)境刺激導(dǎo)致線粒體自身抗原不耐受而導(dǎo)致的[3]。PBC起病隱匿，早期大多無(wú)明顯臨床體征及臨床癥狀，隨著病情的進(jìn)展，可導(dǎo)致黃疸、肝脾腫大、皮膚瘙癢、乏力等表現(xiàn)。約25%無(wú)癥狀患者在確診后10年可進(jìn)展為肝衰竭，而有癥狀患者的平均生存期約為5～8年，對(duì)患者的生命安全造成十分嚴(yán)重的影響[4]，因此尋找一種有效的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)手段對(duì)PBC的早期診斷具有十分重要的意義。PBC屬于一種自身免疫性肝病，其診斷主要依靠患者自身的臨床癥狀、病理學(xué)組織檢查結(jié)果及特異性自身抗體檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行診斷[5]。抗線粒體抗體（An-timitochondrial antibodies，AMA）是PBC的主要血清學(xué)標(biāo)志，其檢測(cè)敏感性可高達(dá)90.0%以上，而M2亞型抗體（AMA-M2）屬于PBC檢測(cè)的特異性抗體，其在PBC檢測(cè)中特異性約為96.0%。多項(xiàng)臨床研究顯示[6]，AMA在PBC的診斷上仍具有一定的局限性，PBC患者中約有10.0% AMA/ A-MA-M2檢查結(jié)果為陰性，且在部分無(wú)肝損傷或結(jié)締組織病患者中也可出現(xiàn)AMA/AMA-M2陽(yáng)性。對(duì)于A-MA/AMA-M2陰性者，要診斷為PBC具有一定的局限性，對(duì)于A-MA/AMA-M2陰性者要確診PBC有時(shí)需要進(jìn)行肝活檢，而肝活檢屬于有創(chuàng)檢查，具有一定的風(fēng)險(xiǎn)性，患者的依從性往往比較差。

研究顯示[7]，在PBC患者的血清中存在兩種不同種類的ANA，其中一種為核多點(diǎn)型，另一種為核膜型。核多點(diǎn)型稱主要包括兩種核蛋白抗原抗體，抗SP100抗體是其中一種抗體，該抗體的靶抗原為可溶性酸性磷酸化核蛋白SP100，其分子量為100 kD。核膜型稱為抗核包膜蛋白抗體，其抗原為核孔膜糖蛋白GP210，該蛋白的分子量為210 kD。近些年的研究顯示，存在抗GP210抗體陽(yáng)性者，其發(fā)生肝硬化的風(fēng)險(xiǎn)更高，且預(yù)后不佳?？购说鞍譙P100抗體、抗核包膜蛋白GP210抗體在PBC診斷上具有高度特異性及較高的敏感性。有研究報(bào)道顯示[8]，抗GP210抗體檢測(cè)的特異性為99.0%，敏感性為9.5%～41.0%，且約有20.0%～47.0% A-MA陰性PBC患者表現(xiàn)為抗GP210陽(yáng)性；抗SP100抗體檢測(cè)在 PBC診斷中的特異性為97.0%，敏感性約為20.0%～30.0%。本研究結(jié)果顯示，抗 SP100 抗體、抗 GP210 抗體、抗AMA-M2抗體檢測(cè)敏感性分別為27.34%、39.06%、66.41%，特異性分別為99.09%、99.50%、97.76%?？笰MA-M2抗體陰性的PBC患者中抗SP100抗體陽(yáng)性率為60.47%，抗GP210抗體陽(yáng)性率為58.14%，與前人報(bào)道相似。結(jié)果提示，SP100抗體和抗GP210的檢測(cè)對(duì)PBC的診斷特別是抗AMA-M2抗體陰性者的診斷具有十分重要的指導(dǎo)意義。

綜上所述，抗 SP100 抗體和抗 GP210 抗體在PBC診斷中均具有較高的特異度，且與抗AMA-M2抗體聯(lián)合檢測(cè)可有效提高PBC的檢出率。

[1] 武劍，曾克勤，王鳴軍，等. 抗gp210、Sp100抗體對(duì)原發(fā)性膽汁性肝硬化的診斷意義[J]. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2012，22（34）：55-57.

[2] 董玉琳. 六種肝抗原自身抗體檢測(cè)在自身免疫性肝病診斷中的應(yīng)用研究[J].現(xiàn)代診斷與治療，2015，26（20）：4740-4742.

[3] 曹國(guó)麗，李建發(fā)，吳勝蘭，等. 原發(fā)性膽汁性肝硬化臨床表現(xiàn)與實(shí)驗(yàn)室特征分析[J]. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2016，16（7）：871-874，878.

[4] 陸俊忠，張迎梅，陳瑩，等. 自身免疫性肝病譜線與抗核抗體聯(lián)合檢測(cè)在肝硬化診斷中的意義[J]. 江蘇醫(yī)藥，2013，39（1）：117-118.

[5] 俞娟，呂昭萍. 原發(fā)性膽汁性肝硬化的診治進(jìn)展[J]. 云南醫(yī)藥，2013，34（1）：64-69.

[6] 張嶸，施娜. 原發(fā)性膽汁性肝硬化誤漏診原因分析并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[J].臨床誤診誤治，2014，27（10）：37-39.

[7] 盧建溪，錢(qián)師宇. 自身抗體分析在慢性膽汁淤積性肝病鑒別診斷中的價(jià)值[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2011，11（11）：1303-1304.

[8] 洪莉. 超聲診斷病毒肝炎性肝硬化與原發(fā)膽汁性肝硬化的對(duì)照觀察[J]. 微量元素與健康研究，2015，32（6）：1-2.

The Significance of Anti-SP100 Antibody and Anti-GP210 Antibody in the Diagnosis of Primary Biliary Cirrhosis

ZHANG Boheng Department of Gastroenterology, Chifeng MunicipalHospital, Chifeng Inner Mongolia 024000, China

Objective To evaluate the value of anti-nucleoprotein antibody (anti-SP100 antibody) and anti-nuclear membrane protein antibody (anti-GP210 antibody) in the diagnosis of primary biliary cirrhosis (PBC). Methods 128 patients with PBC were selected as the case group, and 1 208 patients with non-PBC were selected as the control group. The anti-SP100 antibody, anti-GP210 antibody and anti-AMA-M2 antibody were detected by immunoblotting. And to calculate the specificity and sensitivity of anti-SP100 antibody, anti-GP210 antibody and anti-AMA-M2 antibody in the diagnosis of PBC. Results The sensitivity of anti-SP100 antibody, anti-GP210 antibody and anti-AMA-M2 antibody was 27.34%, 39.06% and 66.41% respectively, and the specificity was 99.09%, 99.50% and 97.76% respectively. Conclusion Anti-SP100 antibody and anti-GP210 antibody have high specificity in the diagnosis of PBC, and combined with anti-AMA-M2 antibody can effectively improve the detection rate of PBC.

Primary biliary cirrhosis; anti-SP100 antibody; anti-GP210 antibody

R575

A

1674-9316（2017）19-0117-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2017.19.061

赤峰市醫(yī)院消化內(nèi)科，內(nèi)蒙古 赤峰 024000