楊笑鶴寇艷芹 董沁芳 葉朝付 甄輝 浙江省醫(yī)療器械審評中心 （浙江 杭州 310012）

脂肪酶測定試劑盒技術審評要點概述

楊笑鶴＊寇艷芹 董沁芳 葉朝付 甄輝 浙江省醫(yī)療器械審評中心 （浙江 杭州 310012）

脂肪酶是急性胰腺炎診斷的重要參考指標，目前脂肪酶測定試劑盒尚無國家標準及行業(yè)標準發(fā)布。文章從產品說明書、產品技術要求、臨床評價等方面對該試劑盒在技術審評中的要點進行簡要概述，旨在幫助注冊申報人更好地把握產品的技術要點，有效指導注冊申報工作。

體外診斷試劑 脂肪酶 技術審評要點

Abstract: Lipase is an important reference indicatiors of risk stratifying acute pancreatitis. Currently there is no national standard existed, no industry standard is published. A research is carried out focused on in the product technical requirements, the brochures, the clinical evaluationl and other aspects in this paper. We hope it will help the manufacturer grasp of the key points of the product and help the registration application effectively.

Key words: in vitro diagnostic reagents, lipase, evaluation guidance

急性胰腺炎具有起病迅急、病情兇險，病死率高的特點，所以早期及時而正確的診斷顯得尤為重要。與傳統(tǒng)的急性胰腺炎診斷指標淀粉酶相比，血清脂肪酶升高時間早、幅度大、持續(xù)時間長，具有更好的敏感性和特異性，為急性胰腺炎的輔助診斷的提供參考依據(jù)。脂肪酶測定試劑盒生產企業(yè)數(shù)量眾多，水平稂莠不齊，目前沒有國家標準、相關行業(yè)標準以及指導原則發(fā)布。該產品是浙江省醫(yī)療器械審評中心2016年體外診斷試劑軟課題研究項目的選定品種，結合省內已審批上市的該產品的審評經驗，對技術審評中的要點進行概述，旨在幫助申請人準備及撰寫脂肪酶測定試劑盒注冊申報資料，同時也為該類產品的技術審評過程提供一定的參考。

1.適用范圍

該技術審評要點分析適用于管理類別為Ⅱ類的、基于分光光度法原理進行體外定量測定脂肪酶活性的試劑盒。

2.產品技術要求

建議參照臨床應用需求、已上市同類產品、分析性能評估結果、GB/T 26124-2011《臨床化學體外診斷試劑（盒）》等合理制定產品的性能指標，產品的性能指標應能被注冊檢驗報告佐證。應根據(jù)《醫(yī)療器械產品技術要求編寫指導原則》等要求，進行相關內容的編寫。下面就一些關鍵性能指標進行簡要說明。

2.1 外觀

建議明確試劑的性狀、顏色、濁度、是否有沉淀、顆粒或絮狀物等具體信息。

2.2 試劑空白

參照GB/T 26124-2011《臨床化學體外診斷試劑（盒）》的檢測方法，用企業(yè)指定的空白樣品測試脂肪酶測定試劑盒，空白吸光度以及空白吸光度變化率的檢測結果，應在生產企業(yè)規(guī)定范圍之內。

2.3 分析靈敏度

用脂肪酶測定試劑盒測試生產企業(yè)指定活性的樣本時，在測試主波長下，吸光度差值或吸光度變化率應不超過給定值。

2.4 線性范圍

用超出線性范圍上限的高活性樣品和接近線性范圍下限的低活性樣品，混合成至少5個濃度。用脂肪酶測定試劑盒對每個濃度樣本平行測定3次，計算出平均值。以稀釋濃度為自變量，以測定結果平均值為因變量求出線性回歸方程，將各稀釋濃度帶入回歸方程，計算出理論值，測定結果平均值與理論值之差為線性偏差，線性偏差的絕對值除以理論值為線性相對偏差。線性相關系數(shù)應大于等于0.990；線性偏差應在生產企業(yè)給定范圍之內，如需分段表述，應結合臨床意義及參考區(qū)間等資料，合理設置線性分段點。

2.5 批內精密度

建議選擇試劑盒檢測范圍內且具有一定臨床意義的兩個血清樣本或質控樣本進行測試，檢測結果應不超過生產企業(yè)給定值。通常選用醫(yī)學決定水平附近的樣品和病理值樣品進行驗證。

2.6 準確度

參照GB/T 26124-2011《臨床化學體外診斷試劑（盒）》，準確度的檢測包括：相對偏差、方法學比對、回收試驗等方法，建議企業(yè)基于現(xiàn)實條件，采取合理可行的方法進行準確度的研究。如果企業(yè)采用質控物質進行相對偏差分析，建議采用正常值質控和病理值質控分別測定，測定值應在企業(yè)規(guī)定的范圍內。

3.產品說明書

產品說明書包含[預期用途][樣本要求][檢驗方法][注意事項]等重要條款，對產品的正確使用、保障患者及操作者等的安全性具有非常重要的意義。產品說明書應當符合《醫(yī)療器械說明書和標簽管理規(guī)定》、《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》等要求。下面對說明書中的部分條款進行簡要說明。

3.1 產品名稱

參照YYT1227-2014《臨床化學體外診斷試劑（盒）命名》，產品名稱至少包括三個部分（被測物、用途、方法或原理），應正確書寫被測物的中文名稱，用途部分應描述為“測定試劑（盒）”，方法或原理部分應以具有區(qū)分性的反應底物/產物/酶來命名。例如：脂肪酶測定試劑盒（甲基試鹵靈底物法）。

3.2 包裝規(guī)格

注明可測試的樣本數(shù)或裝量，如××測試/盒、××mL，除國際通用計量單位外，其余內容均應采用中文進行表述。如有貨號，可增加貨號信息。

3.3 預期用途

第一段明確脂肪酶測定試劑盒的預期用途，如用于體外定量測定人血清和血漿中的脂肪酶活性。適用的樣本類型應結合臨床研究情況進行確認。第二段明確與脂肪酶活性測定相關的臨床適應癥以及臨床背景情況，如脂肪酶升高常見于急性胰腺炎；酗酒、慢性胰腺炎、肝膽疾患等血清脂肪酶可有不同程度升高。建議強調用于對急性胰腺炎的輔助診斷，不能作為早期識別或確診的依據(jù)。

3.4 儲存條件及有效期

注明未開封試劑的效期穩(wěn)定性、開封后在生化分析儀的上的待機穩(wěn)定性以及復溶穩(wěn)定性（凍干粉）等信息，包括光線、溫度、濕度等影響穩(wěn)定性的儲存條件。如試劑盒各組分的穩(wěn)定性不一致，則應對各組分的儲存條件和有效期分別進行描述。應明確具體儲存條件，不建議使用“常溫保存”、“盡快用完”等模糊表述。標注生產日期、使用期限或失效日期。

3.5 用儀器

應說明可適用的儀器的名稱及型號，不能泛指某一系列儀器，以便用戶能夠正確選擇使用。

3.6 樣本要求

重點明確以下內容：①適用的樣本類型，如血清、肝素抗凝血漿。②建議明確內源、外源干擾物質的影響，如溶血、脂血、黃疸、抗凝劑、藥物等對測試結果的影響。③明確樣本的儲存條件及有效期以及冷凍保存樣本的凍融次數(shù)。④應標明冷凍、冷藏樣本在測試前是否要平衡到室溫。

3.7 檢驗方法

明確檢測條件、校準程序以及質控程序等試驗流程的具體操作步驟。

3.8 參考區(qū)間

企業(yè)可以自己建立參考區(qū)間，也可以引用參考文獻；如果引用文獻資料，應提供對應的參考區(qū)間驗證或評估資料。建議注明“建議各實驗室建立自己的參考區(qū)間”。

3.9 檢驗結果的解釋

明確需進行確認試驗的具體情況以及可能的影響因素。對于超出線性范圍的高活性樣本，如果可以按照一定比例稀釋后再進行檢測，應根據(jù)研究資料明確最大可稀釋倍數(shù)、稀釋方法和稀釋液類型等信息。

3.10 檢驗方法的局限性

對可能出現(xiàn)的局限性進行相關說明。例如：本試劑盒的測定結果僅供臨床參考，不應作為臨床診斷的唯一判據(jù)；高脂血、溶血標本影響測定結果等。

3.11 產品性能指標

說明該產品主要性能指標，建議明確產品技術要求中除穩(wěn)定性、裝量以外的所有指標要求，并與產品技術要求保持一致。

3.12 注意事項

應注明必要的注意事項：如膽固醇、甘油三酯等的測定試劑會影響脂肪酶測定結果；如果試劑瓶中有氣泡，有可能干擾儀器對剩余試劑量的正確判斷，導致試劑吸取量不足，影響檢測結果；檢測時需注意交叉污染；使用不同生產商的試劑對同一份樣本進行檢測可能會存在差異等。

4.臨床評價資料

脂肪酶測定試劑盒的臨床試驗應符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》以及《體外診斷試劑臨床研究技術指導原則》等要求，同時臨床試驗方案、報告及附件（如產品說明書、研究者簡歷）等資料的格式應符合國家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布的《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》（2014年第44號）的有關規(guī)定。下面對臨床試驗的要點進行簡單分析。

4.1 研究方法

脂肪酶測定試劑盒有同類產品上市的產品，企業(yè)應對產品上市情況、預期用途、樣本類型、試劑性能等因素進行綜合考慮，合理選擇比對試劑。建議企業(yè)盡量選擇線性范圍覆蓋待評價試劑、重要性能指標不低于待評價試劑的已上市的同方法學產品作為比對試劑。

4.2 臨床試驗機構的選擇

脂肪酶測定試劑盒為第二類體外診斷試劑，至少應選擇兩家臨床試驗機構。申請人應根據(jù)該類產品特點、預期用途、臨床試驗機構的資質及能力等因素合理選擇臨床試驗機構。

4.3 臨床試驗病例的選擇

第二類產品一般要求臨床試驗的總樣本數(shù)至少為200例，且應滿足統(tǒng)計學要求，各臨床機構的樣本量應相對均衡分布。應選擇涵蓋產品預期用途、干擾因素的樣本進行臨床試驗，且樣本濃度應盡量覆蓋待評價試劑的線性范圍。樣本的原始資料應包括唯一且可追溯的編號，確保臨床試驗用樣本具有可追溯性。當血清樣本和血漿樣本同時適用于待評價試劑時，其中一個樣本類型至少完成200例的臨床研究，另一樣本可進行同源樣本的比對研究。

4.4 統(tǒng)計學分析

采用方法學比對進行臨床研究，常用的統(tǒng)計學方法是通過對待評價試劑與比對試劑的測試結果的線性程度以及相關性進行分析，對相關系數(shù)、線性回歸方程的斜率、截距等指標進行評價，證明申報試劑與參比試劑無統(tǒng)計學差異。

4.5 結果差異樣本的驗證

對于待評價試劑與比對試劑檢測結果不符的樣本，應采用第三方試劑或其他方法進行復檢，進而對結果進行統(tǒng)計分析。如果無需進行復檢，則應詳細說明理由。

5.結語

脂肪酶測定試劑盒技術審評要點分析，有利于技術審評人員對該產品技術要點的掌握，提高審評質量和效率。為企業(yè)產品注冊工作提供參考，有助于在安全有效前提下加快產品上市。

[1] 國家食品藥品監(jiān)督管理總局.《體外診斷試劑注冊管理辦法》(國家食品藥品監(jiān)督管理總局令 第5號)[Z].2014(7).

[2] 國家食品藥品監(jiān)督管理總局.《關于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則的通告》,(國家食品藥品監(jiān)督管理總局2014年 第16號)[Z].2014(9).

[3] 國家食品藥品監(jiān)督管理總局.《關于發(fā)布醫(yī)療器械產品技術要求編寫指導原則的通告》,(國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號)[Z].2014(5).

[4] 國家食品藥品監(jiān)督管理總局.《關于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導原則的通告》,(國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號)[Z].2014(9).

[5] 國家食品藥品監(jiān)督管理總局.《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》,(國家食品藥品監(jiān)督管理總局2014年第44號)[Z].2014(9).

[6] 國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 26124-2011 《臨床化學體外診斷試劑(盒)》[S].2011.

[7] 國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 21415—2008 《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準品和控制物質賦值的計量學溯源性》[S].2008.

Overview of the Evaluation Points of the Lipase Assay Kit

YANG Xiao-he＊KOU Yan-qin DONG Qin-fang YE Chao-fu ZHEN Hui Medical Device Evaluation Center of Zhejiang Province (Zhejiang Hangzhou 310012)

1006-6586(2017)15-0033-03

R197.39

A

2017-04-25

楊笑鶴，通訊作者，博士，高級工程師，研究方向：醫(yī)療器械。

浙江省科技廳重點軟科學研究項目（項目名稱：體外診斷試劑的分析性能評估與其安全有效性研究，項目編號：2016C25045）。