枯草芽孢桿菌防治草莓白粉病的田間試驗(yàn)

彭燕+馮清拔+伍書欽

摘 要 草莓白粉病是瓊海草莓生產(chǎn)中的常發(fā)性主要病害，嚴(yán)重影響草莓的生產(chǎn)。瓊海草莓種植期間低溫、高濕氣候情況頻發(fā)，有利于草莓白粉病的發(fā)生。通過不同配方組合發(fā)現(xiàn)：枯草芽孢桿菌按4 050 g/hm2用量單獨(dú)使用，預(yù)防草莓白粉病防效達(dá)92.09%，發(fā)病后混合化學(xué)藥劑露娜森做治療，具有防效快、持效期長等優(yōu)點(diǎn)。

關(guān)鍵詞 枯草芽孢桿菌 ；草莓白粉病 ；田間試驗(yàn)

中國分類號 S436.68 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2016.11.018

Abstract Strawberry powdery mildew is a major disease in qionghai strawberry production ， seriously affecting the production of strawberry. Qionghai strawberry planting during the low temperature， high humidity climate， is advantageous to the strawberry powdery mildew. In this article， through different combination formula discovery： Bacillus subtilis according to 4050 g/hm2 dosage used alone to prevent strawberry powdery mildew control effect was 92.09%， and the incidence of mixed chemicals-luna， do after treatment with， has a fast control effect and the advantages of long effective period.

Keywords Bacillus subtilis ； Strawberry powdery mildew ； Field trials

草莓白粉病由子囊菌門真菌，羽衣草單囊殼菌（Sphaerotheca aphanis）侵染所致，屬專性寄生菌，人工離體培養(yǎng)困難[1]，低溫、高濕環(huán)境下發(fā)病嚴(yán)重，主要危害葉片和果實(shí)，是草莓生產(chǎn)中常發(fā)性主要病害。一般導(dǎo)致減產(chǎn)20%～30%，嚴(yán)重時病葉率在45%以上，病果率50%以上，嚴(yán)重影響草莓的生產(chǎn)[2]。目前，國內(nèi)外對白粉病的防治仍以化學(xué)防治為主，主要包括有機(jī)硫類、苯并咪唑類、三唑類和仿生物植物源類[3]。目前，生產(chǎn)上常用的化學(xué)殺菌劑有世高、敵力脫、腈菌唑、翠貝、露娜森等[4-8]，長期使用不僅會使病菌耐藥性增強(qiáng)，導(dǎo)致用藥次數(shù)增加，還會影響草莓食用安全。使用枯草芽孢桿菌防治草莓白粉病試驗(yàn)已有報道[9-10]，但在海南氣候條件下和草莓栽培模式下，利用芽孢桿菌菌劑防治白粉病尚未見報道。本試驗(yàn)旨在驗(yàn)證芽孢桿菌菌劑對草莓白粉病的防治效果，探討芽孢桿菌菌劑科學(xué)的使用方法，以便為海南草莓的白粉病防治提供有效的防治措施。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試作物

紅顏（紅臉頰）。

1.1.2 供試藥劑

保翠（枯草芽孢桿菌含量≥109個/mL，水劑），北京中農(nóng)思科生物科技有限公司提供；露娜森（42.8%氟吡菌酰胺·肟菌脂，懸浮劑）由拜耳作物科學(xué)（中國）有限公司提供。

1.1.3 試驗(yàn)地點(diǎn)及土壤肥力

試驗(yàn)設(shè)在海南省瓊海市嘉積鎮(zhèn)溫泉村草莓種植地；土壤類型：水稻土；土壤肥力中等，具體指標(biāo)見表1。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計

草莓于2015年11月25日定植，成活后采用黑色塑料覆蓋，株行距18 cm×20 cm。

試驗(yàn)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計，3次重復(fù)，每個小區(qū)面積24 m2，小區(qū)間設(shè)保護(hù)行，試驗(yàn)設(shè)7個處理。處理1：對照（CK），噴施清水；處理2：露娜森0.45 L/hm2（3次）；處理3：露娜森0.45 L/hm2+保翠2.7 L/hm2（1次）、保翠2.7 L/hm2（2次）；處理4：露娜森0.45 L/hm2（1次）、保翠2.7 L/hm2（2次）；處理5～7依次為保翠4.05、2.7、1.35 L/hm2（3次）。常規(guī)噴霧，藥液對水量675 L/hm2，均勻噴施葉片正反面，連用3次，前2次間隔3 d，第2次與第3次間隔7 d。試驗(yàn)期間不使用其他藥劑防治病害。

2016年1月16日第2批草莓頂果采摘盛期，部分果實(shí)剛出現(xiàn)白粉病時使用，在下午4～5點(diǎn)開始進(jìn)行葉面噴施。

1.2.2 調(diào)查與計算

1.2.2.1 試驗(yàn)調(diào)查時間

分別于施藥前1 d、第1次藥后3 d、第2次藥后7 d、第3次藥后7 d和14 d共5次調(diào)查草莓的發(fā)病情況。

1.2.2.2 調(diào)查內(nèi)容

每小區(qū)采用對角線五點(diǎn)取樣法，每點(diǎn)調(diào)查5株，每株調(diào)查全部葉片，每片葉按病斑面積占葉面積的百分比分級，記錄調(diào)查總?cè)~數(shù)和各級病葉數(shù)。

1.2.2.3 分級標(biāo)準(zhǔn)及防效計算

0級：無??；1級：病斑面積占葉片面積的5%以下；3級：病斑面積占葉片面積的6%～10%；5級：病斑面積占葉片面積的11%～25%；7級：病斑面積占葉片面積的26%～5O%；9級：病斑面積占葉片面積的51%以上。按如下公式計算病情指數(shù)和防治效果：

病情指數(shù)=∑（各級病葉數(shù)×相對級數(shù)值）/（調(diào)查總?cè)~數(shù)×9）×100

防治效果（%）=（對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù)）/對照病情指數(shù)×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 保翠芽孢桿菌菌劑對草莓白粉病的防治效果

試驗(yàn)結(jié)果見表2。

由表2可知，第1次施藥后3 d，各處理平均病情指數(shù)均顯著降低，分別由藥前12.22、12.35和12.15、12.24、12.39和12.15下降至3.51、3.46、3.42、5.02、6.08和8.22。相對防治效果分別達(dá)到76.11%、76.45%、76.72%、65.83%、58.61%和44.04%。其中，用露娜森處理病情指數(shù)顯著降低，防效也達(dá)到76%以上。但單獨(dú)使用露娜森或者露娜森與保翠混配，在用后3 d防效無差異。單獨(dú)使用保翠芽孢桿菌菌劑，表現(xiàn)出隨著使用濃度增加，病情指數(shù)和防效改善越明顯，但同使用露娜森相比，防治效果滯后，這主要是由于在自然狀態(tài)下，除成熟葉片和老葉片表面均有菌絲和孢子生長附著外，同一株新稍幼嫩、未見發(fā)病的葉片上也有病原菌的存在[11]。因此，芽孢桿菌菌劑要在草莓葉片上發(fā)揮作用，必須要快速大量擴(kuò)繁才能形成局部菌群優(yōu)勢。這需要一定的時間，因此，在短期內(nèi)，草莓葉片上病原菌仍處于優(yōu)勢地位，所以表現(xiàn)出防效不明顯。已有試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，葉片噴施保翠芽孢桿菌菌劑3 d后再噴施1次，能加快菌劑的擴(kuò)繁速度和數(shù)量，加快有益菌在草莓葉片上形成優(yōu)勢菌群，從而發(fā)揮作用。由病情指數(shù)的變化可以看出，白粉病隨著發(fā)生時間的延長，病害發(fā)生程度加重，對照區(qū)白粉病病情指數(shù)由逐漸加重。

第2次施藥后7 d觀察，各處理病情指數(shù)均顯著降低，其中使用露娜森處理防效提高到90%以上，其中以處理3效果最好，其主要原因在于，由于保翠芽孢桿菌菌劑形成了芽孢，對殺菌劑、高溫、射線均具有明顯的防護(hù)作用。因此，把露娜森按使用倍數(shù)稀釋后加入保翠芽孢桿菌菌劑，混勻后葉面噴施，由于露娜森能直接殺死病原菌，從而減少病原菌對保翠芽孢桿菌菌劑的競爭和抑制作用，待露娜森殺菌劑作用減弱后，保翠芽孢桿菌菌劑中的孢子開始萌發(fā)，由于病原菌大部分被殺死，不會對保翠芽孢桿菌菌劑的擴(kuò)繁帶來阻礙，從而加快菌劑的快速繁殖，進(jìn)而發(fā)揮菌劑對病原菌的競爭作用和抑制效果。處理4是先用露娜森殺菌后，在第3天再單獨(dú)使用保翠芽孢桿菌菌劑，盡管露娜森能殺死葉片的大部分病原菌，但由于需要間隔3 d才使用保翠芽孢桿菌菌劑，在這3 d草莓葉片最初被露娜森殺死的病原菌又重現(xiàn)開始萌發(fā)。因此，在葉片上又有可能形成局部優(yōu)勢菌群，從而抑制保翠芽孢桿菌菌劑的擴(kuò)繁，造成防治效果下降。本試驗(yàn)由于第1、2次用藥間隔期短，因此，處理4與處理3相比差異不明顯。處理2單獨(dú)使用露娜森，盡管防治效果同處理3、4相當(dāng)，但由于2次施藥間隔期短，對草莓造成一定藥害，具體表現(xiàn)在畸形果多，葉片略有卷縮。

第2次施藥后，單用保翠芽孢桿菌菌劑防效明顯上升，一般隨著使用濃度的增加，防效也在增加，具體表現(xiàn)為：處理5>處理6>處理7，其中，處理5和處理6防效相近，但均顯著高于處理7。

第3次施藥后7 d觀察，單用露娜森防效較第2次施藥略有降低，這主要是由于后期草莓白粉病危害加重，露娜森持效期降低，間隔7 d使用病原菌又開始在葉片表面蔓延，造成防效降低。其余處理由于后期全部采用保翠芽孢桿菌菌劑防治，因此，隨著使用次數(shù)增加，防治效果更加明顯；使用濃度越高，防效越明顯；相同濃度處理，不管前期是否使用露娜森，最終的防效相近。

第3次施藥14 d觀察，隨著用藥間隔期的延長，各處理草莓白粉病防效均明顯下降。其中處理2單用露娜森后，第14天病情指數(shù)達(dá)到27.32，防效僅有41.04%。使用保翠芽孢桿菌菌劑處理，防效盡管也有下降，但同處理2相比，降幅要小得多。說明使用保翠芽孢桿菌菌劑處理，能顯著提高草莓對白粉病的抵抗能力和持效期。從總體來看，使用保翠芽孢桿菌菌劑可以顯著改善草莓對白粉病的防效，總的來看，處理3不僅能快速提高草莓對白粉病的防治效果，而且持效期長達(dá)14 d以上，值得在草莓種植區(qū)大面積推廣。

2.2 芽孢桿菌菌劑對草莓生長的影響

調(diào)查草莓在試驗(yàn)處理期間各處理的草莓產(chǎn)量，統(tǒng)計商品果率，估算每公頃產(chǎn)量（見表3）。

從表3可以看出，處理3（露娜森與保翠芽孢桿菌菌劑第1次混配，以后2次單用保翠芽孢桿菌菌劑）產(chǎn)量、商品果率和凈收益均明顯高于其他各藥劑處理。單獨(dú)使用露娜森盡管初期防效最好，但隨著時間延長，防效降低，表現(xiàn)在草莓長勢較差，出現(xiàn)早衰癥狀。單獨(dú)使用保翠芽孢桿菌菌劑，盡管防效較慢，但持效期長，同時還能改善草莓葉片光合作用，根系生長良好，抗旱、耐寒能力增加，除處理7外，商品果率均達(dá)到85%以上。處理7由于芽孢桿菌菌劑用量不夠，因此在整個生育期均表現(xiàn)出防治效果不突出，葉片黃化嚴(yán)重，產(chǎn)量和商品率均明顯降低。

露娜森按100 mL 92元，保翠芽孢桿菌菌劑按200 mL 30元計。

3 結(jié)論與討論

化學(xué)藥劑和芽孢桿菌菌劑用于防治草莓白粉病均具有明顯效果，但二者各有優(yōu)缺點(diǎn)。其中單獨(dú)使用化學(xué)藥劑盡管見效快，但持效期短，導(dǎo)致使用次數(shù)增加。芽孢桿菌菌劑盡管防治效果好，持效期長，但前期見效慢，單獨(dú)使用需要加大用量，這又會加大種植者投入。

因此建議生產(chǎn)中草莓白粉病預(yù)防，可以按照2.7 L/hm2的量單獨(dú)使用；治療可在田間果實(shí)發(fā)病初期與露娜森混合使用，在露娜森按2 000倍稀釋后最后加入保翠芽孢桿菌菌劑，同時在前2次使用時，施藥間隔期以不超過3 d防效最佳，視田間病情發(fā)展施用2～3次。

保翠芽孢桿菌菌劑合理使用，能提高單位面積產(chǎn)量和商品果率，增產(chǎn)增收效果明顯。保翠芽孢桿菌菌劑用于草莓白粉病防治，在白粉病發(fā)生前使用，效果優(yōu)于發(fā)病后，芽孢桿菌的用量和使用次數(shù)均明顯減少。但本試驗(yàn)由于側(cè)重探討芽胞桿菌與殺菌劑的合理配合方法，再加上無法準(zhǔn)確判斷白粉病發(fā)生的準(zhǔn)確時間，因此本次試驗(yàn)未進(jìn)行這方面的系統(tǒng)研究。從防治效果來看，一般在果實(shí)剛出現(xiàn)白粉病1～2 d時使用效果更明顯。

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