申請(qǐng)公布號(hào)：CN106047920A

申請(qǐng)公布日：2016.10.26

申請(qǐng)人：北京農(nóng)學(xué)院

地址：102206北京市昌平區(qū)北農(nóng)路7號(hào)

發(fā)明人：姚允聰；田佶；宋婷婷；張杰；韓振云

Int. Cl.：C12N15/82（2006.01）I；A01H5/00（2006.01）I

摘 要：該發(fā)明公開了一種快捷的觀賞海棠組培苗瞬時(shí)基因沉默的方法，將沉默目的基因片段通過酶切連接的方式連接到TRV?GFP載體，轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌后，通過調(diào)整真空抽吸壓強(qiáng)和抽吸方式，將攜帶沉默目的基因的TRV?GFP載體侵染入觀賞海棠組培苗中；進(jìn)一步通過抗生素培養(yǎng)和手提紫外燈熒光篩選，得到觀賞海棠沉默陽性株系；沉默目的基因的觀賞海棠組培苗陽性植株在侵染7天后，進(jìn)行表型觀察和半定量PCR篩選，從而構(gòu)建完整的觀賞海棠瞬時(shí)基因沉默體系。能夠快速、高效地侵染觀賞海棠組培苗植株，并能夠方便進(jìn)行沉默陽性植株篩選，進(jìn)行基因沉默分析，改進(jìn)了木本植物瞬時(shí)表達(dá)效率低等缺陷，能夠應(yīng)用于觀賞海棠基因功能研究，為今后的觀賞海棠遺傳育種工作奠定基礎(chǔ)。