郝福星楊雨秋劉 云夏興建

(1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院，江蘇泰州 225300；2.江蘇省如皋市丁堰鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，江蘇如皋 226500)

規(guī)?；i場藍耳病免疫程序優(yōu)化

郝福星1楊雨秋1劉 云1夏興建2

(1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院，江蘇泰州 225300；2.江蘇省如皋市丁堰鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，江蘇如皋 226500)

為了探討一種比較適合規(guī)?；i場的藍耳病合理免疫程序，本文用不同疫苗和不同免疫方式對仔豬進行免疫接種，然后采集血清，檢測其藍耳病抗體水平。

規(guī)?；i場 藍耳病 免疫程序

豬繁殖與呼吸障礙綜合征（PRRS，俗稱豬藍耳?。┦怯韶i繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的急性傳染病。該病主要造成妊娠母豬流產(chǎn)、死胎等繁殖障礙和仔豬呼吸道疾病，導致仔豬死亡率升高，生長發(fā)育受阻。目前針對該病的防控，疫苗免疫仍然是一個主要的途徑之一。藍耳病疫苗分2種，一種是滅活苗，另一種是弱毒苗。為探討不同類型豬藍耳病疫苗對仔豬免疫效果，筆者對高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗與滅活苗免疫效果進行了對比試驗?，F(xiàn)將試驗報告如下：

1 材料和方法

1.1 疫苗與毒株

試驗所選用的疫苗為高致病性PRRS（HuN4）弱毒苗和高致病性PRRS（JXA1）滅活苗。HuN4弱毒苗為10頭份/瓶，使用前用10ml滅菌的PBS進行稀釋，病毒滴度為105.0TCID50/ml；JXA1滅活苗由某生物制品廠生產(chǎn)，強毒株為高致病性PRRS HuN4-F5，病毒滴度為3×105.0TCID50/ml。

1.2 試驗設(shè)計

1.2.1 不同疫苗的免疫

試驗選用4～5周齡的健康斷奶仔豬25頭隨機分為3組（見表2.1），第1組5頭為對照組，第2組10頭為HuN4弱毒苗組，第3組10頭為JXA1滅活苗組，HuN4弱毒苗組免疫方式為每頭肌注1頭份（1ml），JXA1滅活苗組免疫方式為每頭肌注2 ml，免疫后21d，3個組全部進行攻毒，攻毒方式為每頭滴鼻3ml。

試驗開始前采集所有豬的血液，分離血清并儲存于-20℃?zhèn)溆?。實驗開始后，分別于免疫后1、3、5、7、10、14、21d和攻毒后1、5、9、14、21d采集血液并分離血清，凍于-20℃?zhèn)溆?。用于檢測血清中PRRSV特異性抗體水平。

1.2.2 不同免疫方式的免疫

32 頭仔豬分成4組，30日齡首免，58日齡二免。實驗分組免疫情況（詳見表1）。實驗豬定期采血（58日齡、90日齡、165日齡前腔靜脈采血）后分離血清，采用間接ELISA法檢測藍耳病抗體水平。藍耳病抗體按試劑盒說明進行判定（IRPC值大于20為陽性）?？贵w合格率大于等于70%為合格（農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2010〕48號文件規(guī)定）

表1 仔豬分組免疫情況

1.3 數(shù)據(jù)分析

每組血清PRRSV特異的抗體水平IRPC值均以平均值±標準誤（Means±SEM）表示。不同處理組的比較用單因素方差分析的LSD多重比較分析。P＜0.05為比較結(jié)果差異顯著，P＜0.01為比較結(jié)果差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同疫苗免疫后血清中PRRSV特異性抗體的檢測結(jié)果

HuN4弱毒苗組免疫后14d檢測到抗體，但抗體水平較低，攻毒后抗體水平迅速升高，IRPC值最高達到126，攻毒后1d HuN4弱毒苗組血清中PRRSV特異抗體水平明顯高于對照組和JXA1滅活苗組（P＜0.05）；JXA1滅活苗組在攻毒前沒有產(chǎn)生抗體，但攻毒后抗體水平迅速升高，IRPC值最高達到141，攻毒后9d JXA1滅活苗組血清中PRRSV特異抗體水平明顯高于HuN4弱毒苗免疫組和對照組（P＜0.05）；對照組攻毒后14d檢測到抗體，抗體水平較低。

2.2 不同免疫方法藍耳病抗體合格率

仔豬58、90、165日齡藍耳病抗體合格率統(tǒng)計（詳見表2）。表2說明：4個實驗組58日齡、90日齡、165日齡時藍耳病抗體合格率均未達到合格標準，但1、3組90日齡、165日齡合格率高于2、4組。

表2 豬藍耳病血清抗體合格率統(tǒng)計表

3 討論

（1）本實驗中，HuN4弱毒苗免疫后14d便可檢測到PRRSV特異性抗體，表明HuN4弱毒苗的免疫能夠快速有效地激發(fā)機體的體液免疫反應(yīng)，這與Tian等人（2009）的報道一致。JXA1滅活苗組免疫期間沒有檢測到PRRSV特異性抗體，說明JXA1滅活苗的免疫并不能激發(fā)機體的體液免疫反應(yīng)。Nilubol，Platt和Harris（2004）報道滅活苗免疫后攻毒不能保護仔豬對PRRS病毒的感染，這與本文結(jié)果一致，因此滅活苗不適合仔豬免疫。本實驗結(jié)果證明：HuN4弱毒疫苗免疫產(chǎn)生期快，能夠快速有效地激發(fā)機體的體液免疫反應(yīng)，比JXA1滅活苗能更快速有效地激發(fā)機體的免疫應(yīng)答。

（2）4個組藍耳病抗體水平，在58日齡、90日齡、165日齡時都未達到合格水平，但1、3組抗體水平明顯高于2組、4組，說明豬藍耳病進行2次免疫要好于只做1次免疫。這與華樹明報道的藍耳病抗體在首免后28d合格率為0，藍耳病疫苗1次免疫的效果不佳，且2次免疫后經(jīng)較長時間才能產(chǎn)生有效保護力是一致的，所以藍耳病疫苗應(yīng)盡可能進行2次免疫。

[1] 梁皓儀.不同藍耳病疫苗的免疫效果—抗體效價分析[J].養(yǎng)豬，2008，（4）：70-72.

[2] 華樹明.高致病性豬藍耳病疫苗與口蹄疫、豬瘟疫苗同時分點注射對口蹄疫、豬瘟抗體效價的影響試驗[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2008，（4）：6-7.