王銀虎+秦學(xué)

【摘 要】 本文用正交試驗(yàn)方法優(yōu)選了微波輔助萃取文冠木中蘆丁工藝中的溶劑用量、輻射時(shí)間、微波功率等條件，并對(duì)提取溶劑進(jìn)行篩選，試驗(yàn)結(jié)果表明，提取溶劑為PH=12水溶液，用量為15倍，微波功率為350W是，文冠木中蘆丁的提取率為最高。

【關(guān)鍵詞】 文冠木 蘆丁 微波萃取

文冠木[1]（Xanthoceras sorbiflia Bunge）為無(wú)患子科文冠木屬植物文冠果的枝條或莖干的木部。文冠果生于干旱丘陵地區(qū)，分布于華北、東北、西北、華南等地，主產(chǎn)于內(nèi)蒙古?！侗静菥V目》和《救荒本草》中有記載，收于1977年版《中國(guó)藥典》，現(xiàn)為蒙醫(yī)常用藥材，蒙古族藥名為希拉森登，具有祛風(fēng)濕、消腫止痛、斂干黃水的功效，主要用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕內(nèi)熱、皮膚風(fēng)濕的治療。

蘆丁[2]是文冠木的主要成份，具有抗菌抗炎作用、抗輻射，調(diào)節(jié)毛細(xì)管壁的滲透，降低血管脆性，防止血管破裂且具有抑制醛糖還原酶的作用。臨床上蘆丁主要用于高血壓病的輔助治療和用于防治因蘆丁缺乏所致的其他出血癥。國(guó)內(nèi)外醫(yī)藥工業(yè)中用蘆丁作原料生產(chǎn)多維葡萄糖羥乙基蘆丁、槲皮素、二乙胺基甲基蘆丁、二乙胺基乙基蘆丁、蘆丁鎂絡(luò)鹽、羥乙基槲皮素、鹽酸鎂蘆丁絡(luò)鹽、對(duì)氯苯氧異丁酸鎂蘆丁絡(luò)鹽及維腦路通等心血管藥物，在食品工業(yè)中蘆丁用作著色劑。因此蘆丁在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上需求量較大，由于蘆丁合成耗資較大，因此研究文冠木中蘆丁的提取工藝具有現(xiàn)實(shí)意義。

微波萃?。∕icrowaveExtraction，ME）[3]是微波和傳統(tǒng)的溶劑萃取法相結(jié)合而成的一種萃取方法。1986年等首先在分析化學(xué)制樣（天然萃取成分的提?。┘夹g(shù)中應(yīng)用了微波萃取法。此技術(shù)操作方便、省時(shí)、節(jié)能，廣泛用于食品、化學(xué)合成、分析、環(huán)保、冶金、日化等領(lǐng)域。近年來(lái)，微波提取技術(shù)開(kāi)始應(yīng)用于天然產(chǎn)物的提取，本文用微波萃取法對(duì)文冠木中蘆丁的提取進(jìn)行了研究，結(jié)果報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與材料

Waters600高效液相色譜儀（配有2996光電二極管檢測(cè)器，717自動(dòng)進(jìn)樣器，Waters600泵，Empower色譜工作站）；MilliQAcademic型超純水系統(tǒng)（美國(guó)Millipore公司）；電子天平（上海天平儀器廠(chǎng)）；2200LH超聲波提取儀（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）。

蘆?。≧utin）對(duì)照品（由中國(guó)藥品生物制品鑒定所提供），甲醇、乙酸（美國(guó)Fisher公司）為色譜純，實(shí)驗(yàn)用水為三蒸水。

1.1.1 正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選微波萃取條件

分別用溶劑用量、輻射時(shí)間、微波功率為三個(gè)因素，進(jìn)行了三個(gè)因素水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，各因素水平見(jiàn)表1如下：

因?yàn)镽C>RB>RA，說(shuō)明微波功率是第一影響因素，三種因素影響提取程度大小順序?yàn)椋汗β?gt;輻射時(shí)間>溶劑用量.

因 對(duì)因素A：I3>I2>I1

對(duì)因素B： I3>I2>I1

對(duì)因素C：I3>I2>I1

因此，最佳條件為A3B3C3

1.1.2 提取溶劑篩選

分別精密稱(chēng)取文冠木0.1g，在上述試驗(yàn)條件下，分別用甲醇、乙醇70%乙醇、PH=12的水溶液作為提取溶劑進(jìn)行了微波提取、離心、微孔濾膜過(guò)濾，進(jìn)樣10，HPLC測(cè)試，結(jié)果見(jiàn)表如下：

結(jié)果表明PH=12水溶液的提取效率最好。

*利用PH=12的NaOH進(jìn)行萃取，同時(shí)加入0.04g的硼砂。由于蘆丁中具有鄰二酚羥基，易發(fā)生氧化，尤其在堿液中，加入硼砂將鄰二酚羥基保護(hù)起來(lái)而有利于蘆丁的提取。再用0.1M鹽酸調(diào)制PH為6的提取液進(jìn)行測(cè)試。

1.1.3 工作曲線(xiàn)

把標(biāo)準(zhǔn)溶液分別2、4、6、8、10進(jìn)樣，在2.1項(xiàng)條件下測(cè)定，以進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線(xiàn)，結(jié)果蘆丁的回歸方程式：Y=4.12×106X-2.46×105，r=0.9998，線(xiàn)性范圍為0.4～2.0。

1.1.4 HPLC分析法

保護(hù)柱：Waters Symmetry C18（5μm，20mm×39mm）；分析柱Waters Nova-pakC18（4μm，3.9×150mm），流動(dòng)相：甲醇—水—乙酸（V：V：V=80：5：15），流速：0.8ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：紫外254nm，柱溫25℃。在該色譜條件下進(jìn)樣后1.80分鐘時(shí)得到蘆丁的尖銳而對(duì)稱(chēng)的色譜峰。

1.1.5 不用功率條件下提取率的比較

分別精密稱(chēng)取文冠木0.1g，加入PH=12水溶液作為提取劑，在不同功率條件下對(duì)文冠木進(jìn)行了微波提取，結(jié)果見(jiàn)下表：

由上表可知，隨著微波功率的增大，蘆丁產(chǎn)率先增加而后下降，這是由于微波功率小時(shí)，提取劑在規(guī)定時(shí)間內(nèi)達(dá)不到沸騰。功率越高，提取劑在規(guī)定時(shí)間內(nèi)能沸點(diǎn)，是提取液沸騰，提取效果反而差。微波功率為350W是提取率最高。

1.1.6 微波萃取法的可靠性評(píng)價(jià)

1.1.6.1 微波萃取實(shí)驗(yàn)精密度

取6份粉碎后的文冠木藥材，在相同的微波萃取最佳條件下萃取，測(cè)定其蘆丁含量，6次測(cè)定結(jié)果的RSD為3.9%。

1.1.6.2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

每隔1小時(shí)對(duì)同一文冠木供試液進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果表明供試液在6小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

1.1.6.3 加樣回收實(shí)驗(yàn)

在4份相同的文冠木樣品中加入4中不同體積的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液，在最佳微波萃取條件下處理后進(jìn)行HPLC測(cè)定，計(jì)算蘆丁的回收率，蘆丁的平均回收率為97.6%，RSD為2.3%（n=4）.

2 結(jié)論

微波萃取被譽(yù)為“綠色分析化學(xué)”，是因?yàn)槲⒉ㄝ腿≡噭┯昧可伲?jié)能、省時(shí)、污染小。使用很少的溶劑，更快的時(shí)間，更好的回收，更高的效率。通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果：表明微波提取法提取文冠木中的蘆丁是，PH=12水溶液作為提取液，溶劑用量為15倍，萃取時(shí)間為10min，微波功率為350W時(shí)蘆丁的提取率為最高。

參考文獻(xiàn)

[1]王額爾敦；蒙藥學(xué)[M]；遼寧：遼寧民族出版社，2000：211-212.

[2]崔承彬，陳英杰，姚新生等.文冠木活血成分的化學(xué)研究[J].中草藥，1987，18（7）：9-10

[3]韓增，張德華，寧平。微波萃取天然物活性組分[J].云南化工，2008，35（05）：69-72.