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      銅綠假單胞菌SU8發(fā)酵液與乙蒜素混配對(duì)草莓灰霉病的防效

      2017-05-11 17:46:27楚文琢彭雙強(qiáng)廖曉蘭馬文月
      江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年6期
      關(guān)鍵詞:混配防治

      楚文琢+彭雙強(qiáng)++廖曉蘭+馬文月

      摘要:用拮抗細(xì)菌銅綠假單胞菌SU8的發(fā)酵液和乙蒜素乳油進(jìn)行混配以期達(dá)到有效防治草莓灰霉病的目的,分別從SU8發(fā)酵液與乙蒜素乳油混配的室內(nèi)毒力、孢子萌發(fā)抑制率和盆栽防效試驗(yàn)等3個(gè)方面進(jìn)行研究。結(jié)果表明,SU8發(fā)酵液對(duì)草莓灰霉病菌的最小抑菌濃度(MIC)為12.50 mg/L,EC50為1 696.4 mg/L,乙蒜素乳油對(duì)草霉灰霉病菌的MIC為6.25 mg/L,EC50為143.4 mg/L;當(dāng)兩者以質(zhì)量比1 ∶9混配時(shí),增效系數(shù)為1.04,表現(xiàn)為協(xié)同作用,當(dāng)兩者分別以質(zhì)量比1 ∶4、1 ∶1、4:1、9 ∶1混配時(shí),增效系數(shù)分別達(dá)到了1.53、2.33、5.41、8.41,均表現(xiàn)出明顯的增效作用;在對(duì)病菌孢子萌發(fā)抑制方面,在12、24、36 h內(nèi),乙蒜素乳油的抑制率分別為60.9%、58.4%、47.0%,低于兩者質(zhì)量比 4 ∶1 、 9 ∶1 混合組配;在盆載試驗(yàn)中,乙蒜素乳油的防病效果也比兩者質(zhì)量比4 ∶1、9 ∶1混合組配低。由結(jié)果可知,與SU8發(fā)酵液混配,能極顯著增強(qiáng)乙蒜素對(duì)草莓灰霉病的防治效果。

      關(guān)鍵詞:SU8發(fā)酵液;乙蒜素乳油;混配;增效作用;草霉灰霉病菌;防治

      中圖分類號(hào): S436.68+4文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A文章編號(hào):1002-1302(2017)06-0079-04

      草莓灰霉?。˙otrytis cinerea)是影響我國(guó)草莓生產(chǎn)的一種常見病害,其病原菌屬灰葡萄孢菌,為腐生致病菌,可以侵染番茄、茄子、黃瓜、西葫蘆、草莓、葡萄、蘋果、菜豆等多種作物[1-3]。該病菌感染植株后,若不能得到有效控制,一般情況下會(huì)致使草莓減產(chǎn)10%~20%,嚴(yán)重時(shí)往往導(dǎo)致草莓植株葉片干枯、果實(shí)出現(xiàn)斑點(diǎn)或腐爛,甚至整株死亡,減產(chǎn)率高達(dá)70%~80%[4-5],嚴(yán)重影響草莓的產(chǎn)量與質(zhì)量,造成重大經(jīng)濟(jì)損失。目前,農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上對(duì)灰霉病的防治主要依賴多菌靈、腐霉利等化學(xué)藥劑[6-9]。然而,這些化學(xué)藥劑在取得較好防治效果的同時(shí),由于灰霉病菌具有寄主范圍廣、繁殖速度快、遺傳變異性大和適應(yīng)性強(qiáng)的特點(diǎn),極易產(chǎn)生抗藥性,并且在化學(xué)藥劑的長(zhǎng)期使用過程中,其抗藥性也不斷增強(qiáng)[10-18],這些特性使得化學(xué)藥劑對(duì)草莓灰霉病的防治效果下降很快[19-22]。因此,在生產(chǎn)過程中,為了增強(qiáng)對(duì)灰霉病的防治效果,往往采用增大劑量或者增加施藥次數(shù)的措施,這種措施可能會(huì)導(dǎo)致草莓本身藥劑殘留量超標(biāo),最終危及人畜健康,影響我國(guó)草莓生產(chǎn)與出口,非常不利于我國(guó)當(dāng)前綠色農(nóng)業(yè)和生態(tài)農(nóng)業(yè)的發(fā)展要求[23]。尤其是我國(guó)加入世界貿(mào)易組織(WTO)后,世界對(duì)我國(guó)農(nóng)副產(chǎn)品出口提出了更高的要求。因此,我國(guó)的草莓種植業(yè)迫切需要一些符合我國(guó)農(nóng)業(yè)發(fā)展的新型途徑來有效控制灰霉病的發(fā)生與蔓延。

      生物防治具有低污染、低殘留、低成本的特點(diǎn),正逐漸成為灰霉病控制中一條重要有效的途徑[24-25]。近幾十年來,國(guó)內(nèi)外專家進(jìn)行了大量研究,篩選出具有抑制灰霉病菌的拮抗細(xì)菌,發(fā)現(xiàn)當(dāng)前常見的灰霉病拮抗菌株主要為木霉、酵母菌、芽孢桿菌、銅綠假單胞菌和放線菌等[26-29]。然而,大量報(bào)道也表明,單一的生物防治因菌株具有極大的變異性而導(dǎo)致防治效果不穩(wěn)定。研究也發(fā)現(xiàn),將拮抗細(xì)菌與化學(xué)藥劑混配對(duì)延緩病原菌的抗藥性、提高藥劑對(duì)病原菌的防治效果有一定的作用。例如,周榮金等將不同的拮抗細(xì)菌混配能有效提高對(duì)灰霉病的防效,對(duì)灰霉病的防治具有顯著增效作用[30];張紅娟等從核桃上分離得到的2株內(nèi)生菌HT3與HT5分別與速克靈藥劑混配能有效增強(qiáng)對(duì)灰霉病菌的抑制作用[31]。但目前利用拮抗細(xì)菌發(fā)酵液和植物源殺菌劑混配來防治草莓灰霉病的報(bào)道罕見。筆者所在實(shí)驗(yàn)室從稻鴨共養(yǎng)田中分離出1株對(duì)水稻紋枯病菌(Rhizoctoria solani)、稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)、煙草赤星病菌(Alternaria alternata)等多種真菌具有較強(qiáng)拮抗效果的銅綠假單胞菌SU8,研究發(fā)現(xiàn)其發(fā)酵液乙酸乙酯提取物也有同樣的抑菌效果[32]。此外,有研究表明,大蒜提取物對(duì)草莓灰霉病菌有較好的抑制效果,并且農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中以大蒜提取物為原料合成的仿生農(nóng)藥——乙蒜素乳油對(duì)包括草莓灰霉病在內(nèi)的多種病害均具有顯著防治效果[33-34]?;诖?,本研究擬用乙蒜素乳油和SU8發(fā)酵液混配來開展試驗(yàn),以期拓寬對(duì)該病的防治途徑,為防治草莓灰霉病提供新思路。

      1材料與方法

      1.1試驗(yàn)材料

      供試菌株為由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室篩選分離的SU8拮抗細(xì)菌和草莓灰霉病菌。供試藥劑為80%乙蒜素乳油(北京中農(nóng)佳瑞有限公司)。試驗(yàn)植株為易感灰霉病品種豐香。

      供試培養(yǎng)基:(1)PDA培養(yǎng)基,200 g馬鈴薯、15 g葡萄糖、17 g瓊脂,pH值自然 ;(2)馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液:除不加瓊脂外,其余同PDA培養(yǎng)基;(3)NA培養(yǎng)基:10 g牛肉浸膏、10 g蛋白胨、5 g氯化鈉、17 g瓊脂,pH值為7.0~7.2;(4)NB培養(yǎng)液:除不加瓊脂外,其余同NA培養(yǎng)基。上述培養(yǎng)基均加水定容至1 L,于1.01×106 Pa、121 ℃滅菌20 min,備用。

      1.2試驗(yàn)方法

      1.2.1拮抗菌SU8發(fā)酵液的制備將拮抗菌SU8在NA培養(yǎng)基上活化后,用接種環(huán)取1環(huán)于10 mL無菌水中攪拌均勻,做成菌體懸浮液。取NB培養(yǎng)液與10% 上述SU8菌體懸浮液于搖瓶中,在磁力攪拌機(jī)上,28 ℃、220 r/min振蕩連續(xù)培養(yǎng)120 h,得到SU8發(fā)酵液。

      取適量發(fā)酵液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀于100 r/min、60 ℃恒溫條件下濃縮至原來體積的1/10。再將10倍濃縮液在4 ℃、10 000 r/min 條件下離心20 min,取上層液體,得到SU8發(fā)酵液粗濾液。用細(xì)菌過濾器(0.22 μm)逐步過濾除菌后的無菌發(fā)酵液,即為SU8發(fā)酵液(濃度視為 1 g/mL,以下簡(jiǎn)稱SU8發(fā)酵液),置于4 ℃,保存?zhèn)溆谩?

      1.2.2拮抗效果與拮抗活性的測(cè)定(1)SU8菌對(duì)草莓灰霉病菌的拮抗效果。試驗(yàn)采用對(duì)峙培養(yǎng)法:在無菌工作臺(tái)上,用融化的PDA培養(yǎng)基制作成直徑為7 cm的PDA平板。用SU8菌體懸浮液將滅過菌的濾紙片(直徑為0.5 cm)潤(rùn)濕,置于PDA平板的一側(cè)。同時(shí),在PDA平板的另一側(cè)對(duì)稱性地放置1個(gè)直徑為0.5 cm的草莓灰霉病菌菌餅,25 ℃培養(yǎng)箱中連續(xù)培養(yǎng)72 h。觀察草莓灰霉病菌菌落生長(zhǎng)情況并測(cè)定抑菌帶寬度,每個(gè)處理3次重復(fù)。

      (2)SU8發(fā)酵液和乙蒜素乳油對(duì)草莓灰霉病菌的拮抗活性測(cè)定。取草莓灰霉病菌菌餅(直徑為0.5 cm)接種于PDA平板的中央,25 ℃下培養(yǎng)24 h后在新長(zhǎng)出的菌絲兩側(cè)對(duì)稱打孔(直徑為0.5 cm)。挑出孔內(nèi)基質(zhì)后,在其中的1個(gè)孔內(nèi)加入適量的SU8發(fā)酵液(濃度為1 g/mL),在對(duì)稱的另1個(gè)孔內(nèi)加入等量的無菌水作對(duì)照。乙蒜素乳油(無菌水稀釋100倍,濃度視為1 g/mL,下同)作相同的處理。25 ℃培養(yǎng)72 h后,觀察草莓灰霉病菌菌落生長(zhǎng)情況并測(cè)定抑菌帶寬度,每個(gè)處理3次重復(fù)。

      1.2.3室內(nèi)毒力測(cè)定(1)最小抑菌濃度(MIC)測(cè)定。參照黃彰新菌絲生長(zhǎng)速率法[35]進(jìn)行MIC測(cè)定并稍作修改。其具體操作如下:在無菌工作臺(tái)上,用無菌水分別將SU8發(fā)酵液和乙蒜素乳油配制成1 000.0、750.0、500.0、250.0、125.0、62.5 mg/L的6種不同濃度,4 ℃下保存?zhèn)溆谩T?.0 mL熱培養(yǎng)基中,分別加入1.0 mL不同濃度的2種物質(zhì),以加1 mL水為對(duì)照,搖勻制成平板;接種同時(shí)活化的灰霉病菌菌餅(直徑0.5 cm),使帶菌絲的一面貼在培養(yǎng)基表面,置于25 ℃的培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)。待對(duì)照菌絲長(zhǎng)至培養(yǎng)皿的2/3面積時(shí),用十字相乘法測(cè)定菌落直徑,每個(gè)處理3次重復(fù)。以不長(zhǎng)菌處理藥劑的最低濃度為最小抑菌濃度。

      (2)菌絲生長(zhǎng)抑制率的測(cè)定。在最小抑菌濃度的基礎(chǔ)上,分別取相應(yīng)濃度的SU8發(fā)酵液與乙蒜素乳油以質(zhì)量比 1 ∶9、1 ∶4、1 ∶1、4 ∶1、9 ∶1進(jìn)行混配,每個(gè)混合組配配制5種不同的梯度濃度,置于4 ℃保存?zhèn)溆?。參照菌絲生長(zhǎng)速率法計(jì)算藥劑的菌絲生長(zhǎng)抑制率,每個(gè)處理3次重復(fù)。通過公式計(jì)算藥劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率,并采用Wadley的增效比率法[36]計(jì)算2種物質(zhì)的毒力回歸方程和混合組配的增效系數(shù),相應(yīng)公式:

      相對(duì)抑制率= 對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑1對(duì)照菌落直徑-菌餅直徑×100%;

      混劑的理論EC(th)50=a+b1(a/A的EC50+b/B的EC50);

      增效系數(shù)(SR) = 混劑的EC(th)501混劑的EC50。

      式中:菌落生長(zhǎng)直徑為測(cè)量直徑減去0.5 cm的菌餅直徑,cm;A為SU8發(fā)酵液;B為80%乙蒜素乳油;a、b分別為SU8發(fā)酵液、80%乙蒜素乳油在混合組配物總質(zhì)量中的比例,%。

      根據(jù)增效系數(shù)(SR)進(jìn)行聯(lián)合作用綜合評(píng)價(jià)。當(dāng)0.5

      1.2.4孢子萌發(fā)抑制活性的測(cè)定采用孢子萌發(fā)法[37]測(cè)定孢子萌發(fā)抑制活性。在無菌條件下,分別配制濃度為 500 mg/L 乙蒜素乳油、濃度為2 000 mg/L SU8發(fā)酵液,再取適量SU8發(fā)酵液和乙蒜素乳油按質(zhì)量比4 ∶1、9 ∶1進(jìn)行混配,得到混合組配,置于4 ℃保存?zhèn)溆?。將病原菌培養(yǎng)8 d,待其產(chǎn)孢后,加無菌水 5 mL,在培養(yǎng)基表面用接種針輕輕摩擦,使病原菌孢子懸浮于水中,將培養(yǎng)基塊和菌絲體用紗布過濾,制成2萬個(gè)/mL的孢子懸浮液。分別取各藥劑與孢子懸浮液等體積充分混合,以無菌水作空白對(duì)照滴加在潔凈的凹玻片上。在25 ℃恒溫條件下培養(yǎng),分別培養(yǎng)12、24、36 h后,在40倍物鏡下鏡檢孢子萌發(fā)情況(以孢子芽管的長(zhǎng)度超過孢子直徑的50%視為已萌發(fā)孢子),檢查各個(gè)處理孢子萌發(fā)情況,并計(jì)算萌發(fā)率和抑制率,每個(gè)處理重復(fù)3次,相應(yīng)公式:

      孢子萌發(fā)率=孢子萌發(fā)數(shù)/總孢子數(shù)×100%;

      孢子萌發(fā)抑制率=(CK孢子萌發(fā)數(shù)-藥劑處理孢子萌發(fā)數(shù))/對(duì)照孢子萌發(fā)數(shù)×100%。

      1.2.5盆栽防效試驗(yàn)試驗(yàn)于2015年5月中旬—7月上旬草莓育苗期間,從草莓種植區(qū)大棚內(nèi)移取適量的泥土,經(jīng)無菌處理后,盛裝在口徑為40 cm、高為25 cm的花盆中至盆高的2/3。選取生長(zhǎng)狀況較一致的1年生豐香草莓3葉期幼苗數(shù)株均勻移植于花盆中,2盆之間的間距為10 cm,其他同常規(guī)管理。待其成活后,將草莓灰霉病菌發(fā)酵液制成2 000萬CFU/mL,每株2 mL均勻噴施于草莓葉面。在人工氣候箱(溫度25 ℃、相應(yīng)濕度90%)中培養(yǎng)3~4 d,待草莓植株完全發(fā)病后調(diào)查病情指數(shù)。分別噴施“1.2.4”節(jié)所配制的各藥劑,以無菌水作空白對(duì)照(CK)。每處理20株,連續(xù)施藥2次,第1次施藥與第2次施藥間隔7 d。噴藥后7 d分別觀察記錄草莓植株發(fā)病情況。

      參照農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所編寫的《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則》對(duì)病害進(jìn)行分級(jí),并計(jì)算病情指數(shù)和防治效果。病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn):0級(jí),無病斑;1級(jí),病斑面積占整個(gè)葉面積5%及以下;3級(jí),病斑面積占整個(gè)葉面積6%~10%;5級(jí),病斑面積占整個(gè)葉面積11%~20%;7級(jí),病斑面積占整個(gè)葉面積21%~50%;9級(jí),病斑面積占整個(gè)葉面積50%以上。相應(yīng)公式:

      病葉率=調(diào)查病葉數(shù)/調(diào)查總?cè)~數(shù)×100%;

      病情指數(shù)=[∑(各級(jí)病葉數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值)/(調(diào)查病葉數(shù)×最高級(jí)數(shù)值)]×100;

      防治效果=(對(duì)照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù))/對(duì)照區(qū)病情指數(shù)×100%。

      1.2.6數(shù)據(jù)處理 采用Excel、DPS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,用新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性分析(α=0.05,α=0.01)。

      2結(jié)果與分析

      2.1拮抗活性的測(cè)定

      2.1.1SU8菌對(duì)草莓灰霉病菌的拮抗效果對(duì)峙培養(yǎng)法測(cè)得SU8菌對(duì)草莓灰霉病菌的抑菌帶寬為3.26 cm。該結(jié)果表明SU8菌對(duì)草莓灰霉病菌具有較強(qiáng)的拮抗效果,與張亞等的研究結(jié)果[32]一致。

      2.1.2SU8發(fā)酵液和乙蒜素乳油對(duì)草莓灰霉病菌的拮抗效果由表1可知,SU8發(fā)酵液和乙蒜素乳油對(duì)草莓灰霉病菌均具有抑制作用。

      2.2室內(nèi)毒力測(cè)定

      利用菌絲生長(zhǎng)速率法進(jìn)行SU8發(fā)酵液與乙蒜素乳油混配的室內(nèi)毒力測(cè)定。結(jié)果表明,SU8發(fā)酵液與乙蒜素乳油對(duì)草莓灰霉病菌的最小抑菌濃度分別為12.50、6.25 mg/L。由表2可知,SU8發(fā)酵液對(duì)草莓灰霉病病菌的EC50為1 696.4 mg/L,乙蒜素乳油對(duì)草莓灰霉病病菌的EC50為1434 mg/L,2種物質(zhì)以質(zhì)量比為1 ∶9、1 ∶4、1 ∶1、4 ∶1、9 ∶1混合組配的EC50分別為151.4、114.2、113.6、98.9、96.6 mg/L,其增效系數(shù)分別為1.04、1.53、2.33、5.41、8.41。

      根據(jù)增效系數(shù)的聯(lián)合評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)可知,2種物質(zhì)以質(zhì)量比 9 ∶1 混合組配為協(xié)同作用;2種物質(zhì)以質(zhì)量比1 ∶4、1 ∶1、4 ∶1、9 ∶1混合組配為增效作用,且以質(zhì)量比為 9 ∶1、4 ∶1的混合組配增效作用較為明顯。

      2.3孢子萌發(fā)活性抑制測(cè)定

      表3結(jié)果表明,隨著時(shí)間的增加,病菌孢子萌發(fā)率逐漸提高,但不同藥劑對(duì)病菌孢子萌發(fā)的影響不同。在12、24、36 h內(nèi),病菌孢子在單一的SU8發(fā)酵液中萌發(fā)率最高,分別為605%、82.1%、88.5%,均高于其他藥劑處理,而以SU8發(fā)酵液與乙蒜素乳油按質(zhì)量比9 ∶1混合組配最低,其萌發(fā)率分別為8.5%、13.6%、21.8%。比較它們的孢子萌發(fā)抑制率可知,在不同的時(shí)間段內(nèi)以單一的SU8發(fā)酵液處理對(duì)孢子萌發(fā)的抑制率最低,但當(dāng)SU8發(fā)酵液與乙蒜素乳油以質(zhì)量比 4 ∶1、9 ∶1混配后,2種混合組配對(duì)孢子萌發(fā)的抑制率均明顯高于前2者,其中又以質(zhì)量比9 ∶1的混合組配最高(表3)。

      2.4盆栽防效試驗(yàn)

      由表4可知,2次施藥,單一乙蒜素乳油防病效果分別為54.7%、47.1%,單一SU8發(fā)酵液防病效果分別為8.2%、64%,但均低于同濃度乙蒜素乳油和SU8發(fā)酵液2者質(zhì)量比4 ∶1、9 ∶1混合組配的防病效果,且差異極顯著。

      3結(jié)論與討論

      3.1結(jié)論

      本研究再一次明確了拮抗細(xì)菌SU8的發(fā)酵液對(duì)草莓灰霉病菌具有較強(qiáng)的抑制效果,且混配的各項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果均表明,乙蒜素乳油與SU8發(fā)酵液以質(zhì)量比4 ∶1、9 ∶1混配對(duì)草莓灰霉病的防治效果比其單一藥劑要好,且以2者質(zhì)量比9 ∶1混配效果最好。這一結(jié)果明確了與SU8發(fā)酵液混配,能顯著增強(qiáng)乙蒜素乳油對(duì)草莓灰霉病的防治效果,并有力論證了銅綠假單胞菌株SU8成為生物農(nóng)藥的可能性,明確了拮抗菌在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)病害防治中的重要地位,也表明混配是防治草莓灰霉病的有效途徑,為今后防治草莓灰霉病提供了新思路,值得更廣范圍地研究與推廣。尤其是本研究利用2種對(duì)環(huán)境無污染的生防物質(zhì)混配,在取得較好防治效果的同時(shí),又明確了2種物質(zhì)的具體混配比例,為今后劑型的研發(fā)與推廣提供了試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

      3.2討論

      生物防治具有低毒、低殘留、易降解的特點(diǎn),并且與環(huán)境相容,正逐漸成為生產(chǎn)無公害農(nóng)產(chǎn)品時(shí)防治病害的首選[38]。因此,生物農(nóng)藥的研發(fā)倍受關(guān)注,開發(fā)新型生物農(nóng)藥防治草莓灰霉病已成為當(dāng)前農(nóng)藥研究與開發(fā)領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。拮抗細(xì)菌銅綠假單胞菌SU8發(fā)酵液和乙蒜素乳油混配防治草莓灰霉病屬于生物防治的范疇,原材料既安全且易得,符合現(xiàn)代農(nóng)業(yè)環(huán)保、健康、持續(xù)發(fā)展的時(shí)代要求,值得研究和開發(fā)。

      大量研究表明,多種植物的活性提取物或微生物菌株的代謝產(chǎn)物可以達(dá)到抗灰霉病菌的目的,但大多著重于活性物對(duì)灰霉病菌的毒力測(cè)定,而對(duì)這些活性物質(zhì)的具體成分確定研究較少。今后應(yīng)加強(qiáng)活性成分的分離鑒定,探討活性成分的分子結(jié)構(gòu)與構(gòu)效關(guān)系的研究,以期探索出能合成植物源殺菌劑的先導(dǎo)化合物,并研發(fā)科學(xué)合理的生物劑型,最終應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。本研究明確了SU8發(fā)酵液對(duì)草莓灰霉病菌的生長(zhǎng)有較強(qiáng)的抑制效果,尤其與乙蒜素乳油混配更能提高其抑菌效果。彭雙強(qiáng)等也先后報(bào)道了SU8菌株對(duì)水稻紋枯病菌、草莓灰霉病菌等多種菌株具有較強(qiáng)的拮抗效果,并且分別采用乙酸乙酯、二氯甲烷和石油醚等溶劑提取SU8的抑菌活性物質(zhì),經(jīng)檢測(cè)確定了SU8抑菌類物質(zhì)為吩嗪類物質(zhì)[39-41]。吩嗪類物質(zhì)是一種廣泛存在于假單胞菌代謝產(chǎn)物中的抑制真菌的抗生素,與眾多報(bào)道的假單胞生防菌的抑菌活性物質(zhì)基本相同,故菌株SU8具有作為生防菌的潛力。

      在微生物環(huán)境中,菌株的拮抗現(xiàn)象屢見不鮮。然而拮抗菌的代謝產(chǎn)物未必對(duì)同種微生物有抑制效果。研究發(fā)現(xiàn)銅綠假單胞菌SU8發(fā)酵液濾液對(duì)草莓灰霉病菌具有較強(qiáng)的拮抗效果。本研究利用乙蒜素乳油、SU8發(fā)酵液及兩者不同質(zhì)量比的混合組配防治草莓灰霉病。室內(nèi)毒力試驗(yàn)結(jié)果表明,混合組配中以質(zhì)量比為4 ∶1、9 ∶1的增效效果最為明顯,選取2種混合組配開展孢子萌發(fā)抑制試驗(yàn),并進(jìn)行盆栽防治試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果均表明,乙蒜素乳油與SU8發(fā)酵液混配對(duì)草莓灰霉病的防治效果比單一藥劑好。這一結(jié)果表明,混配是一條有效防治草莓灰霉病的途徑,也明確了乙蒜素乳油與SU8發(fā)酵液2種生防物質(zhì)的混配比例,但其增效機(jī)制、作用方式與劑型開發(fā)還有待進(jìn)一步研究。

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      doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2017.06.020

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