金柑果皮精油超聲波輔助提取工藝優(yōu)化及其抑菌、抗氧化活性

黃燦燦　鄧昌俊　陳培林　王紹引　曾紅亮　張怡

摘 要 采用響應(yīng)面法對(duì)金柑果皮精油超聲波輔助提取提取工藝條件進(jìn)行優(yōu)化，并對(duì)金柑果皮精油的抑菌和抗氧化活性進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，金柑果皮精油超聲波輔助提取的最佳工藝條件為：液料比27 ∶ 1 mL/g、超聲時(shí)間1.25 h、超聲波功率300 W。在此條件下，金柑果皮精油得率為2.24%，與理論預(yù)測(cè)值基本一致。金柑果皮精油對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、沙門氏菌、黑曲霉、酵母菌均有一定抑制作用，最小抑菌濃度分別為1.0%、0.5%、0.5%、0.5%、0.1%?？寡趸钚越Y(jié)果表明，金柑果皮精油對(duì)食用油脂的貨架期有一定的延緩作用，具有一定的清除羥自由基、DPPH自由基的能力和總抗氧化能力。

關(guān)鍵詞 金柑；果皮精油；超聲波；抑菌活性；抗氧化活性

中圖分類號(hào) TQ644.14；S666.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

Abstract The ultrasonic extraction technology of kumquat peel essential oil was optimized by a response surface methodology， and its antibacterial， antioxidant activity was further investigated. The optimal extraction conditions were as follows： liquid-material ratio of 27 ∶ 1 mL/g， ultrasonic time of 1.25 h， ultrasonic power of 300 W. Under the conditions， the yield of kumquat peel oil was 2.24%， which was consistent with the predicted value. Kumquat peel essential oil displayed effective antibacterial activity for Staphylococcus aureus， Escherichia coli， Salmonella， Aspergillus niger and Saccharomycetes， and the minimal inhibitory concentrations was 1.0%， 0.5%， 0.5%， 0.5%， 0.1%， respectively. Based on the investigation of the antioxidant activity for kumquat peel essential oil， it indicated the kumquat peel essential oil could delay the shelf life of edible oil and had a certain ability to remove hydroxyl radicals， DPPH free radicals and total antioxidant capacity.

Key words Kumquat peel； essential oil； ultrasonic extraction； antibacterial activity； antioxidant activity

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.07.026

金柑[Fortunella margarita（Lour.）Swingle]，又名金桔，屬于蕓香科柑橘屬，原產(chǎn)于中國(guó)，是中國(guó)特產(chǎn)果樹(shù)之一，有1 600多年栽培歷史[1]。金柑營(yíng)養(yǎng)豐富，富含多糖、檸檬苦素、多酚和精油等活性物質(zhì)。金柑多糖具有降血脂[1]、抑菌[2]、抗氧化[2]等功效。金柑果皮近表皮組織中會(huì)產(chǎn)生大量油胞，油胞內(nèi)含有大量的金黃色色素和芳香油等，其油質(zhì)溫和，質(zhì)量為柑橘類精油之最[3]。柑橘果皮加工的重要途徑之一便是精油的提取，柑橘皮渣或質(zhì)次的柑橘整果經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)奈锢?、化學(xué)處理，可得到具有很高使用價(jià)值的柑橘精油[4-5]。

柑橘類精油是天然植物精油中重要的一類，其氣味清新令人愉悅，廣泛地使用在食品、醫(yī)藥、日化產(chǎn)品等行業(yè)[5]。柑橘精油中含有多種低分子的抗菌物質(zhì)和抗氧化成分，作為果蔬類天然保鮮劑，能有效地抑菌防腐[6]。傅維擎等[7]報(bào)道金柑果皮精油功能團(tuán)鑒定結(jié)果表明，金柑果皮精油含有醇類、醛酮類、不飽和脂肪酸，不含酚類、羧酸衍生物。章斌等[8]利用水蒸氣蒸餾法提取檸檬果皮精油，結(jié)果表明，其有較好的抗氧化性，并對(duì)6種微生物有抑制作用。吳均等[9]測(cè)定甜橙精油有較強(qiáng)的抗氧化性和抑菌作用。王紹引等[10]報(bào)道金柑果皮精油對(duì)桔小實(shí)蠅雌蟲(chóng)均有顯著的引誘活性。精油的提取大多以水蒸氣提取法為主，如姜敏[4]利用水蒸氣提取柑橘果皮精油，其萃取時(shí)間長(zhǎng)、效率低。超聲波強(qiáng)化溶劑萃取法萃取精油，即在傳統(tǒng)有機(jī)溶劑萃取精油的基礎(chǔ)上，加入超聲波處理，利用超聲波空化、振動(dòng)、粉碎等綜合效應(yīng)破壞細(xì)胞壁，加速化學(xué)成分溶出，節(jié)約了能源，縮短了提取時(shí)間[6]。但有關(guān)超聲波強(qiáng)化溶劑萃取法萃取金柑果皮精油的研究尚未見(jiàn)報(bào)道[9-13]。

因此，筆者在考察料液比、超聲時(shí)間和超聲功率等因素對(duì)金柑果皮精油得率影響的基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面法對(duì)金柑果皮精油超聲波輔助提取工藝條件進(jìn)行優(yōu)化，并對(duì)所得金柑果皮精油的抑菌和抗氧化活性進(jìn)行評(píng)價(jià)。該研究為金柑果皮精油的綜合開(kāi)發(fā)利用提供了一定的科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 材料與試劑 金柑皮，由尤溪縣農(nóng)業(yè)局提供；菌株：大腸桿菌（Escherichia coli）、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、黑曲霉（Aspergillus niger）、沙門氏菌（Salmonella），均由福建農(nóng)林大學(xué)甘蔗研究所實(shí)驗(yàn)室提供。抑制羥自由基試劑盒、抗超氧陰離子試劑盒和總抗氧化能力（T-AOC）測(cè)定試劑盒，均購(gòu)自南京建成生物研究所。

1.1.2 主要儀器 KQ2200DE型三頻數(shù)控超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司；RE-5299型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器：上海亞榮生化儀器廠；H-1850R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)：湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司；Phs-3C型精密pH計(jì)：上海精密科學(xué)儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 果皮精油提取工藝優(yōu)化 （1）金柑果皮精油提取工藝。金柑果皮→粉碎→過(guò)篩→稱重→加入萃取劑→超聲波輔助浸提→料液分離（抽濾）→混合濾液→旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)→加乙醇溶解→放入-15 ℃冰箱冷凍24 h→離心去除脂狀物質(zhì)→過(guò)濾→濾液進(jìn)行真空濃縮。金柑果皮精油得率計(jì)算公式如下：金柑果皮精油得率=果皮精油質(zhì)量/果皮粉末質(zhì)量×100%。

（2）單因素試驗(yàn)。取10 g金柑果皮，以金柑果皮精油得率為指標(biāo)，研究液料比（mL/g），超聲時(shí)間（h），超聲波功率（W）對(duì)金柑果皮精油得率的影響。分別選取液料比10 ∶ 1、15 ∶ 1、20 ∶ 1、25 ∶ 1、30 ∶ 1、35 ∶ 1 mL/g，超聲時(shí)間0.5、1、1.5、2、2.5 h，超聲波功率60、120、180、240、300、360 W進(jìn)行單因素試驗(yàn)。

（3）響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)。在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，以精油提取率（Y）為目標(biāo)函數(shù)，應(yīng)用Box-Behnken Design的中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，各因子編碼水平見(jiàn)表1。表1中A=（X1-25）/5；B=（X2-1）/0.5；C=（X3-270）/30。

（4）驗(yàn)證試驗(yàn)。根據(jù)響應(yīng)面預(yù)測(cè)的最佳提取工藝條件，確定金柑果皮精油得率，以驗(yàn)證響應(yīng)面預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確性。

1.2.2 果皮精油抑菌試驗(yàn) （1）菌種活化和菌懸液的制備。參照曾紅亮等[14]研究方法。

（2）果皮精油抑菌圈測(cè)定。參照曾紅亮等[14]研究方法。

（3）果皮精油最小抑菌濃度測(cè)定。最小抑菌質(zhì)量濃度（MIC）采用逐步稀釋法進(jìn)行測(cè)定。具體操作步驟為：將制備好的金柑果皮精油按比例加入30 ℃左右的液體培養(yǎng)基中，最終培養(yǎng)基含有精油的濃度百分比分別為2.0%、1.5%、1%、0.5%、0.1%、0。取10 mL混合物注入試管，以不添加金柑果皮精油的培養(yǎng)基作空白對(duì)照。將適宜濃度菌種接種在試管的液體培養(yǎng)基中，細(xì)菌37 ℃、18 h，真菌28 ℃、36 h培養(yǎng)，進(jìn)行觀察?？梢种萍?xì)菌出現(xiàn)明顯增長(zhǎng)的最低精油濃度即為MIC。

1.2.3 果皮精油抗氧化試驗(yàn) （1）果皮精油在油脂體系中抗氧化活性。分別在具塞磨口瓶中，加入預(yù)處理好的熬制豬油和橄欖油各100 g和不同量的金柑果皮精油，攪拌均勻后，置于70 ℃的烘箱中保存，每隔24 h攪拌l次并交換它們?cè)诤嫦淅锏奈恢?，每?天取樣測(cè)定其過(guò)氧化值（POV）。以POV值的大小衡量精油的抗氧化活性。每個(gè)樣品重復(fù)3次，取平均值。POV的測(cè)定按照GB/T 5538-2005方法進(jìn)行。

（2）果皮精油總抗氧化能力（T-AOC）。參照吳均等[9]實(shí)驗(yàn)方法，以Vc作為陽(yáng)性對(duì)照?？偪寡趸芰?[（OD樣品-OD對(duì)照）/0.01]÷30×N×n。

（3）果皮精油羥自由基測(cè)定。參照章斌等[8]實(shí)驗(yàn)方法，以Vc作為陽(yáng)性對(duì)照。抑制羥自由基能力=[（OD對(duì)照-OD測(cè)定）/（OD標(biāo)準(zhǔn)-OD空白）]×樣品標(biāo)準(zhǔn)濃度÷（待測(cè)樣品蛋白濃度×取樣量）。

（4）金柑果皮精油DPPH測(cè)定。參照章斌等[8]實(shí)驗(yàn)方法，以Vc作為陽(yáng)性對(duì)照。DPPH自由基清除率=[1-（A樣品-A空白）]/A對(duì)照×100%

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用Design Expert 8.06軟件對(duì)精油提取數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，并對(duì)模型進(jìn)行顯著性分析；采用DPS 9.05對(duì)抑菌效果數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素水平的確定

2.1.1 液料比對(duì)金柑果皮精油得率的影響 由圖1可知，在液料比為10 ∶ 1～25 ∶ 1 mL/g時(shí)，金柑果皮精油得率隨著液料比的增大而顯著提高，這可能是由于金柑果皮和萃取劑之間充分接觸使精油加速?gòu)墓ぜ?xì)胞中溶出[11]。繼續(xù)增大液料比至30 ∶ 1，得率趨于平穩(wěn)未有明顯變化；當(dāng)液料比為25 ∶ 1時(shí)，得率最大。因此，液料比選取為25 ∶ 1 mL/g較為合適。

2.1.2 超聲時(shí)間對(duì)金柑果皮精油得率的影響 由圖2可知，當(dāng)?shù)脮r(shí)間小于1 h時(shí)，隨著時(shí)間的增加，金柑果皮精油的得率在不斷增大，超聲時(shí)間大于1 h時(shí)，得率已基本趨于穩(wěn)定。這可能是因?yàn)殡S著超聲時(shí)間的增加，超聲波充分作用于金柑果皮細(xì)胞壁使其破裂從而使精油釋放到萃取劑中。超聲時(shí)間越長(zhǎng)，金柑果皮細(xì)胞壁在超聲波空化作用下被破壞程度越大[2]。當(dāng)超聲波處理到一定時(shí)間后，金柑果皮細(xì)胞壁破裂程度不再增加，所以得率隨著時(shí)間的增加趨于平穩(wěn)。因此，超聲時(shí)間選擇為1 h為宜。

2.1.3 超聲功率對(duì)金柑果皮精油得率的影響 由圖3可知，在試驗(yàn)選取的超聲波功率區(qū)間內(nèi)，隨著超聲功率的增大，得率在顯著增大。隨著超聲波功率的增加，超聲波的空化作用和機(jī)械剪切作用增強(qiáng)，分子擴(kuò)散速度增加，有利于精油的得率[11]。因此，超聲波功率選擇為300 W。

2.2 響應(yīng)面分析

2.2.1 分析因素的選取及分析方案 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，以液料比（mL/g）、超聲時(shí)間（h）、超聲功率（W）為決策變量，以精油得率（%）為目標(biāo)函數(shù)，應(yīng)用Design Expert 8.06軟件響應(yīng)面回歸試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見(jiàn)表2。

2.2.2 模型的建立與顯著性分析 回歸模型的方差分析、各項(xiàng)的方差分析和參數(shù)估計(jì)及顯著性分析的結(jié)果分別見(jiàn)表3。利用Design Expert 8.06軟件對(duì)上述結(jié)果進(jìn)行分析，得金柑果皮精油得率對(duì)液料比（A）、超聲波得時(shí)間（B）、超聲波得功率（C）的二次多項(xiàng)回歸方程為：Y=1.98+0.25×A+0.12×B+0.10×C+0.059×A×B-0.10×A×C+0.059×B×C-0.22×A2-0.054×B2-0.029×C2。

從方差分析結(jié)果可知，實(shí)驗(yàn)所選用模型p值為<0.000 1，表明該回歸模型達(dá)極顯著水平；在一次項(xiàng)中，A、B和C對(duì)精油得率的影響達(dá)到極顯著；在交互項(xiàng)中，AC對(duì)精油的得率影響達(dá)到極顯著水平，AB和BC對(duì)精油的得率影響達(dá)到顯著水平；在二次項(xiàng)中，A2對(duì)精油得率達(dá)到極顯著水平，B2對(duì)精油得率達(dá)到顯著水平；失擬項(xiàng)不顯著，并且該模型的相關(guān)系數(shù)R2=0.975 8，變異系數(shù)CV=3.98%，說(shuō)明響應(yīng)值的變化97.58%來(lái)源于所選變量，該值接近于100%，這表明模型可以較好地解釋實(shí)際試驗(yàn)中金柑果皮精油得率的變化。因此，該回歸模型能較好地描述各因素（液料比、超聲波功率、超聲時(shí)間）與金柑果皮精油得率之間的實(shí)際關(guān)系，可用于最佳超聲波得金柑果皮精油工藝參數(shù)的確定。

2.2.3 響應(yīng)面圖和等高線圖分析 綜合圖4～6可知，液料比和超聲時(shí)間交互作用、液料比和超聲波功率交互作用、超聲時(shí)間和超聲波功率交互作用對(duì)金柑果皮精油得率影響最為顯著，表現(xiàn)為曲面較陡，這與方差分析結(jié)果一致。在液料比和超聲波時(shí)間、液料比和超聲波功率交互作用中，當(dāng)其他因素條件固定時(shí)，精油的得率起初隨著液料比的增大而增大，當(dāng)液料比超過(guò)一定值時(shí)，精油得率隨著液料比增大而下降。這可能主要是一定范圍內(nèi)液料比的增加會(huì)相應(yīng)地增大溶劑與原料的接觸面積，同時(shí)增大固液壓差，致使擴(kuò)散速度得到提高；但是當(dāng)液料比過(guò)大時(shí)，精油在溶劑中的溶解量增加，降低了精油的得率[15]。在超聲時(shí)間和超聲波功率相互作用中，其他因素條件固定時(shí)，精油得率隨著超時(shí)間的增加而增大，當(dāng)超聲時(shí)間超過(guò)一定值時(shí)，精油得率上升趨勢(shì)變緩；這可能是由于在一定時(shí)間內(nèi)超聲波處理提高了精油分子運(yùn)動(dòng)頻率和速度，且由于超聲波的機(jī)械剪切作用和空化效應(yīng)破壞了精準(zhǔn)果皮細(xì)胞壁加速了精油分子從細(xì)胞中溶出，但超聲時(shí)間超過(guò)一定值時(shí)，超聲波可能會(huì)破壞精油分子結(jié)構(gòu)，降低得率[16]。

2.2.4 金柑果皮精油提取工藝的確定 由回歸方程可知，超聲波強(qiáng)化溶劑萃取金柑果皮精油的最優(yōu)條件為：液料比27.4 ∶ 1 mL/g，超聲時(shí)間1.25 h，提取功率300 W。該條件下超聲波強(qiáng)化溶劑萃取金柑果皮精油的理論得率為2.22%。結(jié)合回歸模型，并根據(jù)實(shí)際操作條件調(diào)整選用液料比27 ∶ 1 mL/g、超聲時(shí)間1.25 h、提取功率300 W，重復(fù)試驗(yàn)3次，得金柑果皮精油的平均得率為（2.24±0.02）%，與理論預(yù)測(cè)值基本一致，說(shuō)明回歸模型可靠。

2.3 金柑果皮精油抑菌作用

植物精油中含有醇類、醛類、酸類、酚類、丙酮類、萜烯類物質(zhì)，這些物質(zhì)可以影響細(xì)胞膜滲透性，導(dǎo)致細(xì)胞膜的通透性發(fā)生改變，細(xì)胞內(nèi)容物外泄，甚至維持細(xì)胞生命的大分子或遺傳物質(zhì)外泄，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡[17]。精油抑菌圈實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)為：抑菌圈直徑>15 mm為最敏感，10～15 mm 為中度感，7～9 mm時(shí)為低度敏感，無(wú)抑菌圈者為不敏感[8]。由表4和圖7可知，金柑果皮精油對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、啤酒酵母的抑菌抑菌圈直徑均>15 mm，均屬最敏感：對(duì)黑曲霉、沙門氏菌的抑菌圈處于10～15 mm 之間，屬于中度敏感；且抑制作用強(qiáng)弱順序依次為：大腸桿菌>金黃色葡萄球菌>啤酒酵母>沙門氏菌>黑曲霉。綜上所述：金柑果皮精油具有廣譜抗菌性，有廣闊的應(yīng)用前景。

由表5可知，隨著精油濃度的降低，其對(duì)受試菌的抑制作用逐漸減弱。其中金柑果皮精油對(duì)金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度為1.0%，對(duì)大腸桿菌的最小抑菌濃度為0.5%，對(duì)沙門氏菌的最小抑菌濃度為0.5%，對(duì)黑曲霉的最小抑菌濃度為0.5%，對(duì)啤酒酵母的最小抑菌濃度為0.1%。植物精油的MIC越小，其抑菌活性越強(qiáng)。綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，金柑果皮精油對(duì)啤酒酵母的抑制性最好。劉笑宇[18]研究結(jié)果表明，肉桂精油對(duì)酵母菌的較好，其MIC小于其他受試微生物，這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致。

2.4 抗氧化試驗(yàn)

2.4.1 金柑果皮精油添加量對(duì)油脂抗氧化效果的影響 由圖8～9可以看出，4組豬油樣品和橄欖油樣品的POV值均隨著時(shí)間的增加而變大，但添加了金柑果皮精油的橄欖油和豬油的POV值與空白相比均有下降，添加量越大，相同氧化時(shí)間油脂的POV值就越小，表明金柑果皮精油對(duì)2種油脂具有抗氧化延長(zhǎng)儲(chǔ)藏期的效果，且添加量越大效果越明顯。金柑果皮精油對(duì)豬油和橄欖油均具有良好抗氧化作用，可能是由于金柑精油中富含醛類物質(zhì)和萜烯類化合物[6]，其含有雙鍵結(jié)構(gòu)，在貯存過(guò)程中先于油脂被氧化從而減緩了油脂的氧化過(guò)程。金柑果皮精油對(duì)橄欖油的抗氧化作用好于豬油。由圖9可知，隨著時(shí)間的推移精油添加量越高，其對(duì)橄欖油的抗氧化效果越好。

2.4.2 金柑果皮精油體外抗氧化的研究 由圖10可知，金柑果皮精油具有較高的抗氧化性；金柑果皮精油對(duì)DPPH自由基清除率能達(dá)到82.5%，明顯高于Vc對(duì)DPPH自由基的清除率；抑制羥自由基能力達(dá)到42.71 U/mL，略低于Vc對(duì)羥自由基的抑制能力；總抗氧化能力達(dá)到9.00 U/mL，明顯低于Vc的總抗氧化能力。DPPH自由基是一種穩(wěn)定的自由基，被廣泛用于評(píng)價(jià)抗氧化物的體外抗氧化能力。植物精油中α-蒎烯、萜品烯、百里酚等組分可阻斷氧化反應(yīng)的自由基鏈，使自由基形成穩(wěn)定狀態(tài)從而具有清除DPPH自由基的能力。傅維擎等[7]對(duì)金柑果皮精油功能團(tuán)鑒定結(jié)果表明，金柑果皮精油含有醇類、醛酮類、不飽和脂肪酸，不含酚類、羧酸衍生物。其中α-蒎烯相對(duì)含量為4.31%，月桂烯相對(duì)含量為6.88%，β-蒎烯相對(duì)含量為3.6%，D-檸檬烯相對(duì)含量為72.9%。金柑果皮精油中α-蒎烯、檸檬烯等活性成分與自由基進(jìn)行反應(yīng)，使自由基形成穩(wěn)定狀態(tài)的成分。由于精油中含有多種活性成分，其清除DPPH自由基能力應(yīng)該是各組分清除活性的加和作用結(jié)果；其自由基清除能力顯著高于Vc，可能是由于各活性成分起到了協(xié)同作用[17]。綜上所述，金柑果皮精油對(duì)DPPH自由基具有良好的清除作用，有一定的抑制羥自由基和總抗氧化能力。

3 討論

超聲波輔助提取精油具有簡(jiǎn)單高效等優(yōu)點(diǎn)，王娟等[16]利用超聲波輔助提取茶樹(shù)花精油，結(jié)果顯示其他因素固定時(shí)，茶樹(shù)花精油的得率隨著超聲時(shí)間增加而增大，但達(dá)到一定值后，提取率隨著超聲時(shí)間的增加而略有降低；這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致。李佳橋等[19]利用響應(yīng)面優(yōu)化超聲波輔助提取原花青素，結(jié)果顯示，液料比和超聲波功率對(duì)原花青素提取率影響較為顯著，超聲時(shí)間次之；這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相吻合。

章斌等[8]研究檸檬果皮精油對(duì)幾種微生物的抑制強(qiáng)弱順序?yàn)椋捍竽c桿菌>枯草芽孢桿菌>金黃色葡萄球菌>黑曲霉>根霉>釀酒酵母；Wang等[20]研究表明Crassifolia金桔果皮精油對(duì)微生物的抑制強(qiáng)弱順序?yàn)椋捍竽c桿菌>金黃色葡萄球菌>枯草芽孢桿菌。對(duì)比以上二者研究，本實(shí)驗(yàn)中金柑果皮精油對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用與以上二者的研究相一致，但MIC值略高于以上兩者。

Nouri等[21]研究表明伊朗金柑果皮精油對(duì)DPPH自由基有一定的清除能力。章斌等[8]證實(shí)檸檬果皮精油對(duì)豬油和花生油的貯藏期有一定的延緩作用，對(duì)羥自由基的清除能力最強(qiáng)，對(duì)DPPH自由基的清除能力次之。張蕾[11]研究也表明遂川金柑果皮精油對(duì)羥自由基清除能力最強(qiáng)，對(duì)DPPH自由基的清除能力弱于Vc。本實(shí)驗(yàn)中金柑果皮精油對(duì)豬油的抗氧化能力、羥自由基的清除能力與上述研究結(jié)果相符；但對(duì)DPPH自由基的清除能力和以上三者實(shí)驗(yàn)有一定程度的差別，究其原因可能是由于金柑品種或提取方法不同造成的精油成分差異所致，更深層次的原因有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)探明。

本實(shí)驗(yàn)以石油醚為萃取劑，以金柑果皮精油得率為指標(biāo)，探究了液料比、超聲時(shí)間、超聲波功率對(duì)金柑果皮精油得率的影響，結(jié)果表明最優(yōu)提取工藝條件為：液料比27 ∶ 1 mL/g，超聲時(shí)間1.25 h，超聲波功率300 W，以此條件下，金柑果皮精油得率達(dá)（2.24±0.02）%。金柑果皮精油對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌抑菌性較高；對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、沙門氏菌、黑曲霉、釀酒酵母菌的最小抑菌濃度分別為1.0%、0.5%、0.5%、0.5%、0.1%。抗氧化活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，金柑精油在食用油脂中具有良好的抗氧化活性，對(duì)DPPH清除率能達(dá)到82.5%，抑制羥自由基能力達(dá)到42.71 U/mL，總抗氧化能力達(dá)到9.00 U/mL。

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