馬靜

摘 要： 紫外可見分光光度計靈敏度高、操作簡單，基于這些優(yōu)點(diǎn)被廣泛的應(yīng)用在醫(yī)學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)等學(xué)科領(lǐng)域，同時，在醫(yī)院、冶金、化工、食品安全等行業(yè)也被廣泛應(yīng)用。紫外可見分光光度計檢測的準(zhǔn)確性直接影響著使用的有效性，因此，為了確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確需要對紫外可見光光度計檢定中的誤差進(jìn)行控制。本文主要分析了紫外可見分光光度計鑒定中的誤差來源，然后就如何控制紫外可見分光光度計檢定中的誤差提出了自己的意見。

關(guān)鍵詞：紫外可見分光光度計；檢定；誤差控制

紫外可見分光光度計的工作原理是通過對被測物質(zhì)在不同波長范圍內(nèi)光的吸收度的不同反應(yīng)，進(jìn)而對物質(zhì)進(jìn)行分析的一種儀器。紫外可見分光光度計使用簡單、靈敏度高，被廣泛應(yīng)用在各個領(lǐng)域。紫外可見分光光度計的組成基本相同，由氘燈和鎢燈作為光源系統(tǒng)，經(jīng)過光棱鏡或光柵濾光的反應(yīng)，然后通過樣品吸收池吸收，并最終對物質(zhì)進(jìn)行檢測。

一、紫外可見分光光度計的檢定

根據(jù)JJG178-2007《紫外、可見、近紅外分光光度計》的規(guī)定，紫外可見分光光度計的檢測結(jié)果有波長最大允許誤差、波長重復(fù)性、噪聲與漂移，最小光譜帶寬、透射比最大允許誤差，透射比重復(fù)性、基線平直度、電源電壓適應(yīng)性、雜散光和吸收池配套性等十項。在這十項規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)中，波長最大允許誤差、透射比最大允許誤差和雜散光是最重要的三項指標(biāo)，下面將對這三項進(jìn)行分析。

（一）波長最大允許誤差

波長點(diǎn)測量出零度和滿度之后，將檢測物質(zhì)放置在樣品光路中，然后沿著同一波長方向逐點(diǎn)對檢測物質(zhì)的透射比值進(jìn)行檢測，并求出峰值波長。測得的波長平均值與標(biāo)準(zhǔn)值之間的誤差即為波長誤差，規(guī)定對波長最大誤差做出了規(guī)定，并對低壓石英汞燈、氧化鈥濾光片和氧化鈥溶液等九種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)誤差的限定，其中氧化鈥濾光片、鐠釹濾光片、干涉濾光片等由于使用方便，便于保存，是使用最廣泛的檢測紫外可見分光光度計波長示值誤差的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。氧化鈥濾光片具有較完整的波長吸收峰值點(diǎn)，而鐠釹濾光片卻是在波長較小的情況下沒有吸收峰，因此，通常情況才，要將這兩者結(jié)合起來使用。

（二）透射比示值誤差檢定

在規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)下，比如出現(xiàn)波長235nm、波長257nm、波長313nm、波長350nm、波長440nm、波長546nm、波長635nm時，要開始校正檢測儀器的滿度和檢測儀器的零度，以對檢測物質(zhì)進(jìn)行透射比的對比。同樣的，實際檢測得出的平均值與標(biāo)準(zhǔn)值之間的差異即為檢測誤差，規(guī)程規(guī)定的透射比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液、紫外光區(qū)透射比濾光片和光譜中性濾光片，在這些規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)值中，波長235nm、波長257nm、波長313nm和波長350nm這四種用的是重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。便于保存以及攜帶方便，紫外光區(qū)透射比濾光片通常用來檢測上述提到的四種波長誤差，而另外三種則使用光譜中性濾光片來檢定。

（三）雜散光檢定

雜散光檢定通常會選擇截止濾光片來進(jìn)行檢測，而且檢測儀器調(diào)出零度和滿度后，如果檢測物質(zhì)處在相同波長的情況下，會通過測量濾光片的透射比，進(jìn)而通過這種透射比值將對檢測物質(zhì)的雜散光進(jìn)行檢定。

二、紫外可見分光光度計檢定中的誤差分析

使用紫外可見分光光度計對物質(zhì)進(jìn)行檢測的過程中，會有很多因素對檢測技術(shù)指標(biāo)和檢測結(jié)果產(chǎn)生相應(yīng)的影響，因此，一定要對檢測的誤差進(jìn)行分析，進(jìn)而合理控制誤差，才會使檢測結(jié)果準(zhǔn)確、高效，下面將對紫外可見分光光度計檢定中的誤差來源進(jìn)行分析。

（一）檢測環(huán)境不符合規(guī)定所造成的誤差

紫外可見分光光度計在對物質(zhì)進(jìn)行檢測時，其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性可能會受檢測環(huán)境的影響，如果不對檢測環(huán)境進(jìn)行適當(dāng)?shù)目刂?，可能會引起誤差，從而不利于檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。比如，如果不對紫外可見分光光度計進(jìn)行密封處理，或者是使用了密封性不是很好的檢測儀器，會使得光源系統(tǒng)直接受到強(qiáng)光的照射，這種情況下會減少雜散光，從而不利于檢測結(jié)果，容易產(chǎn)生誤差。如果檢測環(huán)境中灰塵較大，濾光片沾染灰塵，這些都是誤差產(chǎn)生的原因，因此，在進(jìn)行檢測工作時，一定要在標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境下進(jìn)行，避免出現(xiàn)不必要的誤差，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

（二）檢定方法不當(dāng)造成的誤差

在對波長示值進(jìn)行檢測時，連續(xù)法曾經(jīng)被使用，這種方法通過連續(xù)驅(qū)動波長進(jìn)行傳動檢測，直接利用儀器透射比示值的變化測試峰值波長，這種檢測方法使得波長傳動連續(xù)驅(qū)動，從而測試得到的光譜會受到光譜曲線的影響，容易產(chǎn)生很大的誤差，因此，這種方法經(jīng)過實踐檢驗后最終被否定。根據(jù)在JJG178-2007《紫外、可見、近紅外分光光度計》的規(guī)定，使用紫外可見分光光度計進(jìn)行檢測時可以使用逐點(diǎn)法，逐點(diǎn)法是通過調(diào)整零度和滿度，在繪制T-λ曲線的基礎(chǔ)上，從而測試透射比最大值所對應(yīng)的波長。使用逐點(diǎn)法可以減少儀器光源、波長傳動機(jī)構(gòu)等對檢測結(jié)果的影響，使得檢測結(jié)果可以最大限度的反應(yīng)出儀器的波長。使用逐點(diǎn)法進(jìn)行檢測時，為了確保監(jiān)測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，一定要按照規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)和要求進(jìn)行檢測，避免出現(xiàn)不必要的誤差，影響數(shù)據(jù)檢測的準(zhǔn)確性。

（三）標(biāo)準(zhǔn)濾光片造成的誤差

標(biāo)準(zhǔn)濾光片的定值誤差和方向性引起的誤差都是標(biāo)準(zhǔn)濾光片帶來的誤差，標(biāo)準(zhǔn)濾光片的標(biāo)準(zhǔn)值是不斷變化的，隨著時間的不斷推進(jìn)，波長值可能會發(fā)生變化，如果不對波長值實時進(jìn)行更顯，就會產(chǎn)生一定的誤差，不利于檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

（四）檢測人員操作不當(dāng)引起的誤差

檢測過程是由檢測人員來操作的，由于檢測人員操作不當(dāng)也可能會引起誤差，比如檢測人員的檢測習(xí)慣、專業(yè)素養(yǎng)都會對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。例如使用指針式紫外可見分光光度計進(jìn)行檢測時，由于每個人的習(xí)慣是不同的，這樣會使得觀測位置有差異，不同的檢測人員會有不同的數(shù)值，可能會造成誤差的產(chǎn)生，不利于數(shù)據(jù)檢測的準(zhǔn)確性。

（五）被檢紫外可見分光光度計結(jié)構(gòu)誤差

紫外可見分光光度計安裝檢測時，可能會使得色皿架與底板之間產(chǎn)生安裝位置的偏移，從而光束不能直接射入檢測器，可能會導(dǎo)致透射比值偏離標(biāo)準(zhǔn)值，從而產(chǎn)生誤差。

（六）檢測儀器儲存不當(dāng)引起的誤差

檢測儀器儲存不當(dāng)會使得儀器受潮、灰塵覆蓋，而這些都會影響檢測儀器檢測時數(shù)值的不準(zhǔn)確性，也是誤差產(chǎn)生的原因。

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