清熱化痰合劑中麻黃的質(zhì)量控制研究

孟軍+戚穎欣

【摘要】麻黃為本處方中的主藥，其主要成分為麻黃堿、偽麻黃堿等。具有散風(fēng)寒，宣肺氣，治痰核，與本品的功效主治有密切關(guān)系。參照《中國(guó)藥典》2015年版一部麻黃及小青龍合劑含量測(cè)定項(xiàng)下麻黃的含量測(cè)定方法，采用高效液相色譜法測(cè)定麻黃中鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿的含量，方法易于操作，結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性良好可以用來(lái)控制本制劑的質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】鹽酸麻黃堿；鹽酸偽麻黃堿；高效液相色譜法

【中圖分類號(hào)】R943.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】ISSN.2095-6681.2016.29.0.01

1 儀器與試藥、色譜條件

日本島津LC-20A高效液相色譜儀，鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品批號(hào)依次為：171241-201007、171237-201208；規(guī)格：供含量測(cè)定用含量分別以99.7%、99.9%計(jì)。乙腈為色譜純，水為純化水，其它試劑均為分析純。色譜柱：HyPpersil BDS C18（4.6×200 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-含0.3%三乙胺的0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)至pH3.0）（4：96）；流速：0.8 ml/min；柱溫：26℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算應(yīng)不低于4100。

對(duì)照品溶液的制備：精密稱定鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品適量，加0.01 mol/L鹽酸溶液制成鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿分別約為90 μg/ml和30 μg/mL的混合溶液。

供試品溶液的制備：精密量取本品10 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液5 mL，至中性氧化鋁柱（100～200目，3 g，內(nèi)徑為l.5 cm）上，用乙醇60 mL洗脫，洗脫液蒸干，殘?jiān)?0%甲醇2 mL溶解移至5 mL量瓶中，用0.01 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

2.1 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

取對(duì)照品溶液，經(jīng)TU-1900型紫外可見分光光度計(jì)在190.0～400.0 nm分別測(cè)定，鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿在194.0、199.1 nm波長(zhǎng)處，有最大吸收，考慮到高效液相色譜儀紫外檢測(cè)器在此處吸收弱，則選擇206.7 nm左右的寬幅吸收處，同時(shí)參照《中國(guó)藥典》麻黃項(xiàng)下含量測(cè)定的檢測(cè)波長(zhǎng)，故選擇210.0 nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

2.2 柱的選擇及柱效的考察

采用依利特HyPpersil BDS C18（4.6×200 mm，5 μm）色譜柱；以乙腈-含0.3%三乙胺的0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)至PH3.0）（4：96）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm；柱溫：25℃。鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品及供試品的分離度符合規(guī)定且理論板數(shù)均較高。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，同時(shí)參照《中國(guó)藥典》中相關(guān)含量測(cè)定項(xiàng)下麻黃的含量測(cè)定方法，確定本品理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算應(yīng)不低于4100。

2.2.1 陰性試驗(yàn)

為驗(yàn)證試驗(yàn)的合理性，取不含麻黃藥材的陰性對(duì)照試樣。依正文方法進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果，該試樣在與對(duì)照品色譜峰相應(yīng)的保留時(shí)間處無(wú)干擾峰檢出，證明本方法可靠。

2.2.2 精密度試驗(yàn)

精密量取對(duì)照品溶液20 μL，注入液相色譜儀，重復(fù)6次，根據(jù)其色譜峰面積值，鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿峰面積RSD分別為1.1%、1.1%，結(jié)果表明所用儀器精密度良好。

2.2.3 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一試樣，依正文方法分別測(cè)定6份，鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿含量平均值及RSD分別為0.224 mg/m、RSD1.5%、0.070 mg/mL、RSD1.9%，結(jié)果表明本法具良好的重復(fù)性。

2.2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液，按正文方法測(cè)定，鹽酸麻黃堿結(jié)果峰面積RSD0.7%，鹽酸偽麻黃堿結(jié)果峰面積RSD1.8%，結(jié)果表明72 h內(nèi)試樣溶液中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量穩(wěn)定。

3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

分別精密稱取鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品用0.01 mol/L鹽酸適量溶解成1 mg/mL的貯備液。分別精密吸取貯備液0.9 mL和0.3 mL置10 mL量瓶中，加0.01 mol/L鹽酸稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取上述溶液（μL）5、8、10、15、20注入高效液相色譜儀測(cè)定，以濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程，鹽酸麻黃堿標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程y=35.05x+0.402 （r=1.0），鹽酸偽麻黃堿標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程y=33.99x+0.295（r=0.9993），結(jié)果表明鹽酸麻黃堿在0.442～1.633 μg，呈線性關(guān)系，鹽酸偽麻黃堿在0.152～0.616 μg，呈線性關(guān)系，符合外標(biāo)法定量測(cè)定的要求。

4 回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的供試品（批號(hào)：20150328含量為0.2238 mg/mL）9份，每三份分別精密加入鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿對(duì)照品溶液（0.2299 mg/mL、0.0675 mg/mL）4 mL、5 mL、6 mL，依法測(cè)定，計(jì)算回收率，測(cè)得鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的平均回收率為98.7%、99.8%，RSD分別為1.1%、1.4%結(jié)果表明本法回收率良好。

5 試樣限度測(cè)定

依正文方法測(cè)定三批試樣， 參照《中國(guó)藥典》一部中麻黃藥材的含量限度，小青龍合劑等制劑中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的轉(zhuǎn)移率為26%左右，而該樣品中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的轉(zhuǎn)移率為46%，根據(jù)三批樣品的含量測(cè)定結(jié)果，暫定本品每1 mL含麻黃以鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的總量計(jì)，不得少于0.180 mg。

本文編輯：趙小龍