范力欣，李紅艷，錢 訓(xùn)

（河北省農(nóng)林科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究中心，石家莊 050051）

◆農(nóng)藥分析◆

氣相色譜法快速測(cè)定農(nóng)藥產(chǎn)品中7種高毒有機(jī)磷類農(nóng)藥

范力欣，李紅艷，錢 訓(xùn)*

（河北省農(nóng)林科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究中心，石家莊 050051）

建立了利用氣相色譜測(cè)定農(nóng)藥制劑中7種有機(jī)磷類高毒農(nóng)藥的定量分析方法。采用氣相色譜SE-30毛細(xì)管色譜柱、氫火焰離子化檢測(cè)器，以鄰苯二甲酸二戊酯為內(nèi)標(biāo)物，對(duì)試樣中甲胺磷、氧樂(lè)果、久效磷、甲拌磷、特丁硫磷、甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷進(jìn)行分離、定量檢測(cè)。結(jié)果表明，7種有機(jī)磷農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.008～0.028，變異系數(shù)為1.9%～6.4%，3個(gè)質(zhì)量水平的樣品加標(biāo)回收率范圍為97.2%～102.5%，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.999。該方法簡(jiǎn)便、快捷、有效，且精密度和準(zhǔn)確度高，線性關(guān)系良好。

高毒；有機(jī)磷農(nóng)藥；氣相色譜；定量分析

有機(jī)磷類農(nóng)藥成本低，用途廣，在防治病蟲(chóng)害、保障農(nóng)業(yè)豐收方面發(fā)揮了重要作用[1]。然而它也是一把雙刃劍，長(zhǎng)期使用已經(jīng)給環(huán)境和生態(tài)帶來(lái)嚴(yán)重危害[2-3]。隨著人民生活水平的提高和國(guó)際貿(mào)易的需要，農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留問(wèn)題備受關(guān)注[4-6]。因此，農(nóng)業(yè)部陸續(xù)發(fā)布了包括高毒有機(jī)磷農(nóng)藥在內(nèi)的高毒、高殘留農(nóng)藥禁止使用和限制使用的公告。事實(shí)上，農(nóng)藥產(chǎn)品違規(guī)添加現(xiàn)象比較嚴(yán)重，少數(shù)企業(yè)為了使自己的產(chǎn)品具有速效、高效作用，擅自加入高毒農(nóng)藥，這給農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全帶來(lái)了極大的隱患。因此，快速準(zhǔn)確地篩查農(nóng)藥產(chǎn)品中違禁添加的有機(jī)磷農(nóng)藥成分，成為農(nóng)藥檢測(cè)人員的迫切需要。對(duì)于農(nóng)產(chǎn)品中有機(jī)磷類農(nóng)藥多殘留分析可以用氣相色譜[7-8]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用[9]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用[10]等方法進(jìn)行檢測(cè)。農(nóng)藥產(chǎn)品中多種有機(jī)磷成分檢測(cè)一般采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)或氣相色譜方法[11-12]。

本文建立了在同一氣相色譜條件下測(cè)定7種有機(jī)磷類高毒農(nóng)藥的方法，并進(jìn)行了方法回收率試驗(yàn)和精密度試驗(yàn)，考察了方法的線性關(guān)系。結(jié)果表明，方法簡(jiǎn)便快捷，準(zhǔn)確度和精密度均能達(dá)到定量分析的要求。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

島津GC2010氣相色譜儀，配氫火焰離子化檢測(cè)器。

甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)品（98.6%）、氧樂(lè)果標(biāo)準(zhǔn)品（95.3%）、甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)品（98.4%）、特丁硫磷標(biāo)準(zhǔn)品（89.6%）、對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品（99.0%），由國(guó)家農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心提供；久效磷標(biāo)準(zhǔn)品（98.0%）、甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品（99.6%），由上海市農(nóng)藥研究所提供；二氯甲烷（分析純）、丙酮（色譜純）、鄰苯二甲酸二戊酯（分析純，不含干擾分析的雜質(zhì)）。3.0%啶蟲(chóng)脒乳油，市售產(chǎn)品。

內(nèi)標(biāo)物溶液：準(zhǔn)確稱取2.0 g（精確至0.000 2 g）鄰苯二甲酸二戊酯于500m L容量瓶中，用二氯甲烷溶解、定容，搖勻備用。

1.2 色譜條件

色譜柱：SE-30毛細(xì)管色譜柱（30m×0.32mm，0.25μm）；色譜柱溫度：起始140℃，保持3m in，以10℃/m in升至210℃，保持8 m in，以25℃/m in升至250℃，保持4min；進(jìn)樣口溫度：270℃；檢測(cè)器溫度：280℃；載氣：高純氮；流速：0.8 m L/m in；分流比：20∶1；進(jìn)樣體積：1μL。在上述色譜條件下，甲胺磷保留時(shí)間約3.6min，氧樂(lè)果保留時(shí)間約7.7m in，久效磷保留時(shí)間約8.8m in，甲拌磷保留時(shí)間約9.0m in，特丁硫磷保留時(shí)間約10.0m in，甲基對(duì)硫磷保留時(shí)間約11.3m in，對(duì)硫磷保留時(shí)間約12.9min，鄰苯二甲酸二戊酯保留時(shí)間約16.1m in。色譜圖見(jiàn)圖1、圖2。

圖1 混合標(biāo)樣溶液氣相色譜圖

圖2 啶蟲(chóng)脒乳油樣品添加標(biāo)樣氣相色譜圖

1.3 溶液配制

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

稱取甲胺磷標(biāo)樣約0.20 g，氧樂(lè)果標(biāo)樣約0.49 g，久效磷標(biāo)樣約0.20 g，甲拌磷標(biāo)樣約0.12 g，特丁硫磷標(biāo)樣約0.11 g，甲基對(duì)硫磷標(biāo)樣約0.08 g，對(duì)硫磷標(biāo)樣約0.11 g（均精確至0.000 2 g），置于100m L容量瓶中，加入二氯甲烷溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。

準(zhǔn)確吸取上述混合標(biāo)樣母液10m L至25m L容量瓶中，加入5m L內(nèi)標(biāo)物溶液，用二氯甲烷溶解、定容，搖勻備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取試樣0.2 g（精確至0.000 2 g）至25m L容量瓶中，適當(dāng)調(diào)整稱樣量，使試樣溶液中待測(cè)組分的濃度與標(biāo)樣溶液中待測(cè)組分濃度基本一致，加入5 m L內(nèi)標(biāo)物溶液，用二氯甲烷溶解、定容，搖勻備用。

1.4 測(cè)定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針響應(yīng)值相對(duì)變化小于1.0%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)樣測(cè)定。

1.5 計(jì)算

甲胺磷（或氧樂(lè)果等）質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）按下式計(jì)算。

式中：m1為甲胺磷（或氧樂(lè)果等）標(biāo)準(zhǔn)品稱樣量，g；m2為試樣稱樣量，g；A1為標(biāo)樣溶液中甲胺磷（或氧樂(lè)果等）峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值；A2為試樣溶液中甲胺磷（或氧樂(lè)果等）峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值；P為甲胺磷（或氧樂(lè)果等）標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜柱的選擇

色譜柱的填料類型、長(zhǎng)度、內(nèi)徑、液膜厚度都可能對(duì)分析結(jié)果產(chǎn)生影響。試驗(yàn)比較SE-54、HP-5和SE-30色譜柱。我們發(fā)現(xiàn)：使用SE-54色譜柱，特丁硫磷和甲基對(duì)硫磷2種組分不能基線分離；使用HP-5色譜柱，甲拌磷和久效磷組分不能基線分離，影響組分定量；而SE-30固定相分離效果最好。在1.2色譜條件下，甲胺磷、氧樂(lè)果、久效磷、甲拌磷、特丁硫磷、甲基對(duì)硫磷和對(duì)硫磷的保留時(shí)間無(wú)重疊，分離效果好，滿足農(nóng)藥定性定量分析要求，可以在較短時(shí)間內(nèi)完成測(cè)定。

2.2 內(nèi)標(biāo)物選擇

選用十二碳烷、聯(lián)苯、鄰苯二甲酸環(huán)二烯丙酯、鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸二戊酯、鄰苯二甲酸雙環(huán)乙酯、鄰苯二甲酸二辛酯等做內(nèi)標(biāo)物進(jìn)行分離測(cè)定。結(jié)果表明：十二碳烷、聯(lián)苯、鄰苯二甲酸環(huán)二烯丙酯、鄰苯二甲酸二丁酯保留時(shí)間較短，均混雜于所測(cè)定7種高毒有機(jī)磷農(nóng)藥中間，不利于樣品的分離測(cè)定；鄰苯二甲酸雙環(huán)乙酯、鄰苯二甲酸二辛酯保留時(shí)間在22～25min，保留時(shí)間相對(duì)于目標(biāo)化合物較長(zhǎng)，同樣不利于樣品的分離測(cè)定；而鄰苯二甲酸二戊酯保留時(shí)間適中，分離效果好，干擾少，適合本實(shí)驗(yàn)中目標(biāo)樣品的定性和定量。

2.3 方法線性相關(guān)性試驗(yàn)

分別移取1.3.1中標(biāo)樣溶液母液1,2,5,10,20 m L于25m L容量瓶中，加入5m L內(nèi)標(biāo)物溶液，用二氯甲烷溶解并稀釋至刻度，配制系列質(zhì)量濃度標(biāo)樣溶液，搖勻。按選定的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以標(biāo)樣溶液中各組分質(zhì)量濃度（g/L）為橫坐標(biāo)，各組分與內(nèi)標(biāo)物峰面積比值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?；貧w方程、相關(guān)系數(shù)和線性范圍見(jiàn)表1。結(jié)果表明，在選定的條件下，甲胺磷、氧樂(lè)果、久效磷、甲拌磷、特丁硫磷、甲基對(duì)硫磷和對(duì)硫磷的響應(yīng)值和其質(zhì)量濃度有良好的線性關(guān)系。

表1 被測(cè)化合物線性方程、相關(guān)系數(shù)及線性范圍

2.4 精密度試驗(yàn)

稱取啶蟲(chóng)脒乳油樣品約25.0 g，添加7種高毒有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，使其在乳油中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)在0.2%～0.5%之間，作為測(cè)定對(duì)象。按確定的色譜條件測(cè)定樣品中各高毒成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，平行測(cè)定5次。結(jié)果顯示：甲胺磷的變異系數(shù)為6.4%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.028；氧樂(lè)果的變異系數(shù)為4.2%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.011；久效磷的變異系數(shù)為4.4%，標(biāo)準(zhǔn)偏差0.017；甲拌磷的變異系數(shù)為3.2%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.015；特丁硫磷的變異系數(shù)為2.9%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.014；甲基對(duì)硫磷的變異系數(shù)為3.8%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.017；對(duì)硫磷的變異系數(shù)為1.9%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.008。表明該方法的精密度較高（見(jiàn)表2）。

表2 分析方法精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.5 方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)

稱取乳油試樣0.2 g至25m L容量瓶中，分別加入2,10,20m L按1.3.1配制的標(biāo)樣溶液母液，加入5 m L內(nèi)標(biāo)物溶液，用二氯甲烷溶解定容，按確定的方法對(duì)甲胺磷等7種農(nóng)藥進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，7種農(nóng)藥的平均回收率為97.2～102.5%，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性高（見(jiàn)表3）。

表3 方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

該方法以啶蟲(chóng)脒乳油為介質(zhì)，模擬農(nóng)藥產(chǎn)品中添加甲胺磷、氧樂(lè)果、久效磷、甲拌磷、特丁硫磷、甲基對(duì)硫磷和對(duì)硫磷等高毒農(nóng)藥成分，按選定的方法進(jìn)行檢測(cè)。方法分離效果好，雜質(zhì)干擾少，簡(jiǎn)便易行，檢測(cè)成本低，具有較高的準(zhǔn)確度和精密度，線性范圍滿足測(cè)定需要，可以用于產(chǎn)品中7種高毒有機(jī)磷農(nóng)藥的快速檢測(cè)。

[1]賀紅武.有機(jī)磷農(nóng)藥產(chǎn)業(yè)的現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢(shì)[J].世界農(nóng)藥,2008, 30(6):29-33.

[2]卜元卿,孔源,魏勇,等.化學(xué)農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染及其防控對(duì)策建議[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào),2014,16(2):19-25.

[3]張穎,袁愛(ài)華.農(nóng)藥環(huán)境污染及低毒農(nóng)藥研究進(jìn)展 [J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,38(29):16284-16285.

[4]劉洋,孔祥清,馬坤明,等.食品安全中的農(nóng)藥殘留問(wèn)題 [J].黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào),2005,17(1):65-68.

[5]孫清廉.關(guān)注農(nóng)藥殘留保證入口安全[J].科學(xué)養(yǎng)生,2010(12):29.

[6]劉玲,紀(jì)淑娟.農(nóng)藥殘留對(duì)食品及人健康的影響[J].新農(nóng)業(yè),2011 (10):40-41.

[7]胡向支,黃陽(yáng)成,翁春英,等.氣相色譜雙柱雙檢測(cè)器法同時(shí)測(cè)定蔬菜水果中有機(jī)磷農(nóng)藥多殘留的應(yīng)用研究[J].蔬菜,2015(6): 7-10.

[8]王磊.氣相色譜法檢測(cè)蔬菜中6種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的有效性研究[J].農(nóng)技服務(wù),2015,32(10):107.

[9]周吳萍,岑菲菲,甄漢深.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定不同產(chǎn)地苦玄參中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2008,19(4):786-787.

[10]倪永付,閆秋成,王勇,等.SBSE-LC-MS/MS法檢測(cè)胡蘿卜汁中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[J].糧油食品科技,2015,23(4):80-82.

[11]洪華,武中平,王莉,等.固相萃取-GC-MS快速測(cè)定殺蟲(chóng)劑產(chǎn)品中17種違禁添加的有機(jī)磷類成分[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,42 (3):244-247.

[12]賀紅周,范小偉,趙敬坤,等.農(nóng)藥樣品中添加甲拌磷、特丁硫磷、對(duì)硫磷的氣相色譜分析[J].南方農(nóng)業(yè),2011(9):53-55.

（責(zé)任編輯：顧林玲）

Simultaneous Detection of 7 kinds of Organic Phosphorus Pesticides by Gas Chrom atography

FAN Li-xin,LIHong-yan,QIAN Xun*
(Research Centre of Quality and Safety of Agro-products,Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Shijiazhuang 050051,China)

A gas chromatography method for quantitive determ ination of 7 kinds of organic phosphorus pesticides in agrochemicalwasestablished.Methamidophos,omethoate,monocrotophos,terbufos,phorate,parathion-methyl,parathion were separated on gas chromatography with SE-30 chromatographic column,using diamyl phthalate as internal standard, and detected by flame ionization ditector.The results showed that the standard deviationsof 7 kindsoforganic phosphorus pesticideswere 0.008-0.028,the coefficientsof variation were 1.9%-6.4%,the average recoverieswere 97.2%-102.5%,the linear correlation coefficientswere over0.999.The separationmethod issimple,rapid and effective.

high toxicity;organophosphoruspesticide;gas chromatography;quantitativeanalysis

TQ 450.7

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.03.005

2016-10-19

河北省地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目（GY201548）

范力欣（1987—），女，河北省行唐縣人，碩士。研究方向：農(nóng)藥分析和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。E-mail：980264172@qq.com

錢訓(xùn)（1968—），男，河北省辛集市人，副研究員。研究方向：農(nóng)藥分析與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。E-mail：xunqian196805@sina.com