巫曉峰, 肖勁邦, 沈留紅, 姜思汛, 錢柏霖, 鄧俊良, 傅宏慶, 左之才, 曹隨忠, 余樹(shù)民, 江 濤
(1四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 奶牛疾病研究中心/動(dòng)物疫病與人類健康四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川 成都 611130;2江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院,江蘇 泰州 225300)
中藥組方“回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清E、P4和TGF-β1含量的影響
巫曉峰1?, 肖勁邦1?, 沈留紅1, 姜思汛1, 錢柏霖1, 鄧俊良1, 傅宏慶2, 左之才1, 曹隨忠1, 余樹(shù)民1, 江 濤1
(1四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 奶牛疾病研究中心/動(dòng)物疫病與人類健康四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川 成都 611130;2江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院,江蘇 泰州 225300)
【目的】探究中藥組方“回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清雌激素(Estrogen,E)、孕酮(Progesterone,P4)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(Transforming growth factor β1,TGF-β1)含量的影響?!痉椒ā窟x取即將干乳日產(chǎn)奶量為(15.42±0.71)kg的健康奶牛80頭,隨機(jī)分為4 組,每天飼喂0(對(duì)照組)、400、500和600 g“回乳康”中藥,采用逐漸干奶法回乳,分別在回乳第0、1、3、5、7、9和11天采集奶牛尾靜脈血,并記錄奶牛單日產(chǎn)奶量,采用ELISA法檢測(cè)血清E、P4和TGF-β1含量?!窘Y(jié)果】0、400、500和600 g處理回乳時(shí)間分別為11、7、5和5 d;各組奶牛血清E含量在回乳期均隨時(shí)間推移呈下降趨勢(shì),對(duì)照組下降趨勢(shì)較中藥組慢;對(duì)照組奶牛血清P4含量在回乳期變化不顯著,而中藥組奶牛血清P4含量均隨時(shí)間推移呈上升趨勢(shì),在回乳期之后下降,但下降后仍極顯著高于對(duì)照組;各處理回乳期奶牛血清TGF-β1含量均呈上升趨勢(shì),而在回乳期之后中藥組奶牛血清TGF-β1含量呈下降趨勢(shì);回乳期奶牛血清E、TGF-β1含量和日產(chǎn)奶量?jī)蓛砷g均呈極顯著相關(guān),血清P4含量與血清E、TGF-β1含量、日產(chǎn)奶量均無(wú)顯著相關(guān)性?!窘Y(jié)論】在奶牛回乳過(guò)程中,添加中藥組方“回乳康”能顯著促進(jìn)回乳期奶?;厝?,E是奶牛回乳的負(fù)調(diào)控激素,TGF-β1是正調(diào)控因子,而P4對(duì)回乳無(wú)明顯影響。
奶牛; 回乳期; 中藥組方; 雌激素; 孕酮; 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1
激素在哺乳動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中具有不可替代的調(diào)控作用,其中直接調(diào)控乳腺發(fā)育和泌乳的激素主要有雌激素(Estrogen, E)、孕酮(Progesterone,P4)、催乳素(Prolactin, PRL)、生長(zhǎng)激素(Growth hormone, GH)、胰島素(Insulin, INS)和氫化可的松(Hydrocortisone, HC)等[1-2],它們與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(Transforming growth factor β1,TGF-β1)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(Signal transducer and activator of transcription 5,STAT5)和胰島素樣生長(zhǎng)因子1(Insulin-like growth factor I,IGF-I)等[3]細(xì)胞因子相互作用而形成乳腺發(fā)育和泌乳的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。目前運(yùn)用中藥組方對(duì)人和小鼠等動(dòng)物催乳或回乳的研究已有報(bào)道[4-5],均顯示與泌乳激素及相關(guān)因子呈一定的相關(guān)性[6-7],而奶牛經(jīng)過(guò)泌乳期,機(jī)體消耗嚴(yán)重,需要經(jīng)過(guò)回乳期進(jìn)入干乳期,進(jìn)而恢復(fù)自身體質(zhì)及更新乳腺組織,為下一個(gè)泌乳期做充分準(zhǔn)備,但傳統(tǒng)回乳方式效果差,易產(chǎn)生乳房炎、流產(chǎn)和抗生素殘留等副作用[8],因此,回乳中藥組方在奶?;厝槠诘倪\(yùn)用有著較廣闊的研究前景[9]。探究回乳中藥組方對(duì)回乳期奶牛血清泌乳相關(guān)激素、因子、日產(chǎn)奶量及回乳時(shí)間的影響,有助于研究開(kāi)發(fā)奶牛乳房保健產(chǎn)品、改進(jìn)奶?;厝榉椒?、降低回乳期奶牛乳房炎發(fā)生率。本研究旨在探究中藥組方“回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清E、P4和TGF-β1含量的影響,為進(jìn)一步研究中藥組方對(duì)回乳期奶牛相關(guān)泌乳激素的調(diào)控機(jī)理奠定基礎(chǔ),并為更安全有效的回乳技術(shù)措施提供理論依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
選擇四川省某規(guī)?;膛?chǎng)半封閉統(tǒng)一舍飼,體質(zhì)量(582±41) kg、2~4胎中國(guó)荷斯坦奶牛150頭。從中選取體況良好,乳房、乳汁均正常,即將進(jìn)入回乳期,日產(chǎn)奶量為(15.42±0.71) kg的妊娠后期健康奶牛80頭。隨機(jī)分為4組(包括1個(gè)對(duì)照組和3個(gè)中藥組),每組20頭。各組均采用逐漸干奶法回乳,回乳當(dāng)天記為第0天,對(duì)照組不飼喂中藥,從第1天開(kāi)始,3個(gè)中藥組每日8:00分別飼喂中藥組方“回乳康”400、500和600 g,直至停奶,停止飼喂中藥。
1.2 回乳方式
本試驗(yàn)采用逐漸干奶法回乳[10-11],方法為:停喂多汁飼料,減少精料喂量,以青干草為主,控制飲水,適當(dāng)加強(qiáng)運(yùn)動(dòng)。在回乳第1天,擠奶次數(shù)由3次改為2次,第2天改為1次,逐漸減少擠奶頻率,當(dāng)奶牛日產(chǎn)奶量為3~5 kg時(shí),停止擠奶。
1.3 試驗(yàn)藥物和試劑
中藥組方“回乳康”由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院奶牛疾病研究中心研發(fā)。由麥芽、樸硝、升麻、柴胡、香附、薏仁、蠶蛻、白術(shù)、黃芩、知母、蘇梗、芡實(shí)、五味子、蒲公英和甘草等組成。
牛E、P4和TGF-β1雙抗體夾心ELISA試劑盒,均由美國(guó)RD公司提供。
1.4 試驗(yàn)方法
1.4.1 血清收集 試驗(yàn)?zāi)膛;厝殚_(kāi)始當(dāng)天記為第0天,依次采集第0、1、3、5、7、9和11天尾靜脈血10 mL,置于未加抗凝劑的離心管中,室溫下靜置1 h,1 800 r·min-1離心10 min,轉(zhuǎn)移上層血清于EP管中,-20 ℃凍存,待檢。
1.4.2 ELISA檢測(cè) 采用雙抗體夾心ELISA測(cè)定牛E、P4和TGF-β1的含量,步驟按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
1.5 統(tǒng)計(jì)分析
利用SPSS 9.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,K-S檢驗(yàn)計(jì)量資料是否服從正態(tài)分布,數(shù)據(jù)結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,2組間采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),多組間比較采用LSD單因素方差分析,相關(guān)性分析采用雙變量Pearson相關(guān)分析。
2.1 “回乳康”對(duì)回乳期奶牛日產(chǎn)奶量的影響
如表1所示,各組奶牛日產(chǎn)奶量在回乳期均呈下降趨勢(shì),回乳期分別為11、7、5和5 d,回乳第0天,各組間奶牛日產(chǎn)奶量差異均不顯著(P>0.05);第1天,400 g中藥組奶牛日產(chǎn)奶量極顯著高于600 g中藥組(P<0.01);第3~5天,對(duì)照組、400 g中藥組奶牛日產(chǎn)奶量均極顯著高于600 g中藥組,且對(duì)照組奶牛日產(chǎn)奶量極顯著高于400 g中藥組;第7天,對(duì)照組奶牛日產(chǎn)奶量極顯著高于400 g中藥組;500、600 g中藥組奶牛日產(chǎn)奶量在整個(gè)回乳期差異均不顯著。結(jié)果表明中藥組方“回乳康”具有較好回乳效果。
表1 中藥組方“回乳康”對(duì)回乳期奶牛日產(chǎn)奶量的影響1)
Tab.1 The effects of Chinese herbal formula “Huirukang” on milk production of dairy cows during the milk withdrawal period kg
1)同行數(shù)據(jù)后凡具有一個(gè)相同小寫(xiě)、大寫(xiě)字母者,表示不同處理間差異未達(dá)到0.05、0.01的顯著水平(LSD法,n=20)。
2.2 “回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清E含量的影響
如表2所示,各組奶牛血清E含量在回乳期均呈下降趨勢(shì)?;厝榈?至1天,各組奶牛血清E含量差異均不顯著;第3—11天,對(duì)照組奶牛血清E含量極顯著高于其他3組,其中第3—7天,400 g中藥組奶牛血清E含量極顯著高于500、600 g中藥組;500、600 g中藥組奶牛血清E含量在整個(gè)回乳期差異均不顯著。結(jié)果表明中藥組方“回乳康”可促使回乳期奶牛血清E含量降低。
表2 中藥組方“回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清E含量的影響1)
Tab.2 The effects of Chinese herbal formula "Huirukang" on serum estrogen levels of dairy cows during the milk withdrawal period pg·mL-1
1)同行數(shù)據(jù)后凡具有一個(gè)相同小寫(xiě)、大寫(xiě)字母者,表示不同處理間差異未達(dá)到0.05、0.01的顯著水平(LSD法,n=20)。
2.3 “回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清P4含量的影響
如表3所示,對(duì)照組奶牛血清P4含量在回乳期無(wú)明顯變化,400、500、600 g中藥組均呈先上升后下降的趨勢(shì)?;厝榈?—1天,各組奶牛血清P4含量差異均不顯著;從第3天開(kāi)始, 對(duì)照組奶牛血清P4含量較其他組低,于第3天顯著低于500、600 g中藥組,第5—11天則顯著低于其他3組。500、600 g中藥組P4含量在整個(gè)回乳期差異均不顯著。結(jié)果表明中藥組方“回乳康”可促使回乳期奶牛血清P4含量上升。
表3 中藥組方“回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清P4含量的影響1)
Tab.3 The effects of Chinese herbal formula "Huirukang" on serum progesterone levels of dairy cows during the milk with-drawal period ng·mL-1
1)同行數(shù)據(jù)后凡具有一個(gè)相同小寫(xiě)、大寫(xiě)字母者,表示不同處理間差異未達(dá)到0.05、0.01的顯著水平(LSD法,n=20)。
2.4 “回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清TGF-β1含量的影響
如表4所示,各組奶牛血清TGF-β1含量在回乳期均呈上升趨勢(shì),并在回乳期后下降?;厝榈?—3天,各組間TGF-β1含量差異均不顯著;第7天,對(duì)照組、400 g中藥組TGF-β1含量極顯著高于500、600 g中藥組;第9—11天,400 g中藥組TGF-β1含量極顯著高于其他3組;500、600 g中藥組TGF-β1含量在整個(gè)回乳期差異均不顯著。結(jié)果表明中藥組方“回乳康”可促使回乳期奶牛血清TGF-β1含量上升。
表4 中藥組方“回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清TGF-β1含量的影響1)
Tab.4 The effects of Chinese herbal formula "Huirukang" on serum TGF-β1 levels of dairy cows during the milk with-drawal period ng·mL-1
1)同行數(shù)據(jù)后凡具有一個(gè)相同小寫(xiě)、大寫(xiě)字母者,表示不同處理間差異未達(dá)到0.05、0.01的顯著水平(LSD法,n=20)。
2.5 回乳期奶牛血清E、P4、TGF-β1含量與日產(chǎn)奶量的相關(guān)性
如表5所示,在整個(gè)回乳期,奶牛血清E、TGF-β1含量和日產(chǎn)奶量?jī)蓛砷g均呈極顯著相關(guān),血清P4含量與E、TGF-β1含量、日產(chǎn)奶量相關(guān)性不顯著。
表5 回乳期奶牛血清PRL、P4、TGF-β1含量與日產(chǎn)奶量的相關(guān)性1)
Tab.5 Correlation between serum estrogen, progesterone and TGF-β1 levels and daily milk yield during the milk with-drawal period
指標(biāo)日產(chǎn)奶量E含量P4含量TGF-β1含量rPrPrPrP日產(chǎn)奶量0.908**<0.001-0.1330.3610.657**<0.001E含量-0.1550.287-0.767**<0.001P4含量0.2440.091TGF-β1含量
1) **代表相關(guān)性達(dá)到0.01的顯著水平。
3.1 “回乳康”對(duì)回乳期奶牛日產(chǎn)奶量的影響
目前,口服麥芽,外敷芒硝等方式促進(jìn)哺乳期婦女回乳的研究已報(bào)道較多[12-13]。葉琳[14]使用麥芽、蒲公英和神曲等使婦女乳汁減少至無(wú)乳,王雄[4]使用“回乳抑增一號(hào)”(麥芽、牡蠣、浙川貝等)使婦女溢乳改善,郝振華等[5]使用麥芽治療婦女產(chǎn)后溢乳有明顯療效。現(xiàn)有回乳中藥組方中多有麥芽,且已人工合成麥角衍生物——卡麥角林,其明顯抑制PRL生成,控制泌乳的進(jìn)行[15]。然而,中藥組方運(yùn)用于奶?;厝轷r見(jiàn)報(bào)道,本試驗(yàn)結(jié)果顯示,中藥組方“回乳康”具有較好回乳效果,縮短了奶?;厝槠?,且有效減少了日產(chǎn)奶量,推測(cè)其機(jī)理可能是“回乳康”中炒麥芽消食、回乳[4,13];升麻、柴胡、香附、白術(shù)疏肝理氣;黃芩、知母、蘇梗安胎;五味子、蒲公英固精斂陰,清熱解毒,統(tǒng)籌全局,斷其生化之源,使肝氣調(diào)達(dá)四運(yùn),有效抑制乳汁分泌而回乳。500、600 g中藥組奶牛日產(chǎn)奶量在整個(gè)回乳期差異均不顯著,表明“回乳康”劑量達(dá)到500 g·d-1時(shí),效果即可達(dá)到最佳。
3.2 “回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清E含量的影響
E是卵巢和胎盤(pán)合成和分泌的一種類固醇激素,是乳腺發(fā)育、泌乳啟動(dòng)與維持必不可少的激素之一[16]。乳腺發(fā)育早期,E和各類生長(zhǎng)因子協(xié)同調(diào)控導(dǎo)管上皮末端終芽增生,乳腺發(fā)育中、后期,E促進(jìn)乳腺導(dǎo)管生長(zhǎng),誘導(dǎo)P4受體表達(dá),促進(jìn)乳腺發(fā)育,提高乳腺上皮組織PRL水平,并與E受體(Estrogen receptor,ER)結(jié)合直接發(fā)揮促乳功能,提高泌乳量[17]。同時(shí),E可誘導(dǎo)GH活性,影響INS敏感性,間接調(diào)控乳腺泌乳[18]。郝振榮等[19]和Cools等[20]均發(fā)現(xiàn)大豆異黃酮(植物雌激素)可顯著提高奶牛泌乳量,說(shuō)明了血清E含量與泌乳量呈正相關(guān)。然而,Berryhill等[21]研究表明E可促進(jìn)產(chǎn)后婦女回乳。本研究結(jié)果顯示,在奶?;厝檫^(guò)程中,隨泌乳量逐漸下降,血清E含量呈階梯式下降趨勢(shì),結(jié)果與郝振榮等[19]和Cools等[20]對(duì)E與泌乳量呈正相關(guān)的研究報(bào)道一致,可能是由于奶牛回乳期泌乳量下降,PRL降低,使得乳腺ER表達(dá)減少[22],反饋調(diào)節(jié)E降低。
李萍萍等[23]利用柴胡、丹皮、紫草等組成的中藥組方降低了小鼠血清E含量,Tiosano等[24]研究發(fā)現(xiàn)18種中藥復(fù)合物可改變兒童E含量及活性,王丹等[25]利用“參芪解郁顆粒”增加了婦女產(chǎn)后E含量,王小云等[26]利用熟地、白術(shù)、澤瀉等組成的中藥組方顯著降低婦女E表達(dá)。本研究結(jié)果顯示,中藥組方“回乳康”使回乳期奶牛血清E含量明顯降低每天飼喂500 g即可達(dá)到最佳效果,且中藥組E含量在回乳期后無(wú)明顯變化,可能是由于奶牛停止泌乳引起。
3.3 “回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清P4含量的影響
P4是介于內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)交互作用的重要因子,具有促進(jìn)乳腺小葉及腺泡發(fā)育,維持妊娠等作用[27]。陳建暉等[28]研究表明,在E刺激乳腺導(dǎo)管發(fā)育的基礎(chǔ)上,P4能使乳腺發(fā)育更充分,黃利等[29]也指出P4可明顯刺激豚鼠乳腺增生,王瑞瓊等[30]發(fā)現(xiàn)乳腺生長(zhǎng)不良孕鼠乳腺組織P4及其受體表達(dá)量較低。雖然P4可刺激乳腺發(fā)育,但不會(huì)刺激乳腺泌乳[31],夏成等[32]指出奶牛泌乳量與P4含量無(wú)明顯相關(guān)性。本研究結(jié)果顯示,在奶?;厝檫^(guò)程中,對(duì)照組P4含量在回乳期差異不顯著,可能是由于P4主要是妊娠黃體產(chǎn)生,其在奶牛懷孕后期主要功能是抑制子宮肌蠕動(dòng),以維持胎犢宮內(nèi)生長(zhǎng),而對(duì)回乳期奶牛泌乳無(wú)明顯影響。
王丹等[25]利用“參芪解郁顆?!憋@著降低婦女血清P4含量,張劍鋒等[33]使用黃芩、蘇梗、白術(shù)等組成的中藥組方提升了懷孕婦女P4表達(dá)量,保胎效果良好。本研究使用的中藥組方“回乳康”能夠極顯著提高回乳期奶牛血清P4含量,500 g和600 g的“回乳康”飼喂量對(duì)奶?;厝槠谘錚4含量影響一致,在回乳期結(jié)束后,P4含量有一定程度的下降,但各中藥組仍極顯著高于對(duì)照組,表明奶?;厝槠陲曃怪兴幗M方“回乳康”能夠提高其血清P4含量,且以每天500 g為佳,可能是中藥組方“回乳康”中黃芩、蘇梗、白術(shù)等中藥提高了妊娠奶牛血清P4含量,P4含量的升高使子宮內(nèi)膜和子宮肌松弛,從而保證胎犢宮內(nèi)正常生長(zhǎng)發(fā)育。
3.4 “回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清TGF-β1含量的影響
TGF-β1是一種多效細(xì)胞因子,可影響上皮細(xì)胞增殖、凋亡并維持細(xì)胞外基質(zhì)穩(wěn)態(tài),對(duì)乳腺形態(tài)發(fā)生及分泌功能有重要作用。已有研究表明,TGF-β1可誘導(dǎo)乳腺上皮干細(xì)胞群衰老,抑制乳腺發(fā)育,并與乳腺泌乳的終止信號(hào)密切相關(guān)[34]。另外,TGF-β1可減少乳腺上皮細(xì)胞中由PRL誘導(dǎo)的β-酪蛋白mRNA和蛋白表達(dá)水平,且對(duì)蛋白表達(dá)水平的抑制更明顯[35]。說(shuō)明TGF-β1在動(dòng)物乳腺退化過(guò)程中對(duì)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)起重要調(diào)控作用[36],Vries等[37]指出TGF-β1含量表達(dá)在奶?;厝楹?周內(nèi)達(dá)到最高,本研究發(fā)現(xiàn),在奶?;厝檫^(guò)程中,隨泌乳量逐漸下降,血清TGF-β1含量呈上升趨勢(shì),與上述研究結(jié)果趨勢(shì)一致,可能是由于回乳期奶牛機(jī)體缺少擠奶刺激,促使乳腺表達(dá)TGF-β1,減少β-酪蛋白mRNA和蛋白表達(dá)水平,降低奶牛泌乳量。
張臻等[38]使用黃芩、太子參等組成的中藥組方提升了大鼠TGF-β1表達(dá)量,葛明曉等[39]利用熟地、山藥和白術(shù)等組成的中藥組方增加了婦女血清TGF-β1含量。本研究使用的中藥組方“回乳康”可使奶??焖倩厝?,回乳期結(jié)束后,各中藥組TGF-β1含量均有一定程度的下降,縮短了TGF-β1高含量水平及回乳期持續(xù)時(shí)間,從而降低對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用,間接促進(jìn)胎犢生長(zhǎng)發(fā)育。而對(duì)照組變化不明顯,可能是由于對(duì)照組奶牛回乳持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),致使TGF-β1還未達(dá)到降低期。
3.5 回乳期奶牛血清E、P4、TGF-β1含量和日產(chǎn)奶量的相關(guān)性
在奶牛乳腺生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,E可促進(jìn)乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞和小葉周圍結(jié)締組織生長(zhǎng),誘導(dǎo)P4受體表達(dá),促進(jìn)P4與E協(xié)同刺激乳腺上皮細(xì)胞DNA合成和腺泡發(fā)育[27]。懷孕后期奶牛E和P4含量均升高,乳腺組織發(fā)育迅速,但血液中P4含量過(guò)高,抑制了泌乳作用,從而使乳腺雖具備泌乳能力而不泌乳[31],分娩后,血液中P4濃度降低,PRL才正常發(fā)揮泌乳功能。有研究指出,在乳腺退化過(guò)程中,TGF-β1在轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平上均有所增加[40],抑制ER表達(dá),誘導(dǎo)乳腺導(dǎo)管快速退化[41]。本研究表明,在奶?;厝槠?,E是奶牛回乳的負(fù)調(diào)控激素,而TGF-β1是奶?;厝榈恼{(diào)控因子。然而回乳期奶牛血清P4含量與血清E、TGF-β1含量及日產(chǎn)奶量相關(guān)性均不顯著,可能是由于P4只促進(jìn)青春期奶牛乳腺發(fā)育,而對(duì)泌乳期和回乳期奶牛乳腺無(wú)明顯影響,此時(shí),P4主要是由妊娠黃體分泌,維持妊娠。
[1] OGATA Y, YU G M, HIDAKA T, et al. Effective embryo production from Holstein cows treated with gonadotropin-releasing hormone during early lactation[J]. Theriogenology, 2016, 86(6):1421-1426.
[2] 文靜,卜登攀,王建發(fā),等. 激素調(diào)控乳蛋白合成的作用及其分子機(jī)制[J].華北農(nóng)學(xué)報(bào), 2012, 27(S1): 111-115.
[3] BACH L A. Insulin-like growth factor binding proteins: An update[J]. Pediatr Endocrinol Rev, 2015, 13(2):521-530.
[4] 王雄. 回乳抑增一號(hào)治療高泌乳素血癥與乳腺增生藥效學(xué)研究[D]. 武漢: 湖北中醫(yī)藥大學(xué), 2012.
[5] 郝振華,郭震兵. 重用生麥芽治療高泌乳素血癥性不孕的臨床觀察[J].新疆中醫(yī)藥, 2016, 34(1): 13-14.
[6] MACRINA A L, KAUF A C, KENSINGER R S. Effect of bovine somatotropin administration during induction of lactation in 15-month-old heifers on production and health[J]. J Dairy Sci, 2011, 94(9): 4566-4573.
[7] WANG J F, FU S P, LI S N, et al. Short-chain fatty acids inhibit growth hormone and prolactin gene transcription via camp/pka/creb signaling pathway in dairy cow anterior pituitary cells[J]. Int J Mol Sci, 2013, 14(11): 21474-21488.
[8] HENDERSON A C, HUDSON C D, BRADLEY A J, et al. Prediction of intramammary infection status across the dry period from lifetime cow records[J]. J Dairy Sci, 2016, 99(7): 5586-5595.
[9] ZHAO F R, MAO H P, ZHANG H, et al. Antagonistic effects of two herbs in zuojin wan, a traditional chinese medicine formula, on catecholamine secretion in bovine adrenal medullary cells[J]. Phytomedicine, 2010, 17(8/9): 659-668.
[10]ZOBEL G, LESLIE K, WEARY D M, et al. Gradual cessation of milking reduces milk leakage and motivation to be milked in dairy cows at dry-off[J]. J Dairy Sci, 2013, 96(8): 5064-5071.
[11]TUCKER C B, LACY-HULBERT S J, WEBSTER J R. Effect of milking frequency and feeding level before and after dry off on dairy cattle behavior and udder characteristics[J]. J Dairy Sci, 2009, 92(7): 3194-3203.
[12]吳文英,周惠歡,吳秀娥. 芒硝外敷治療產(chǎn)后回奶的觀察及護(hù)理[J].醫(yī)學(xué)信息, 2013, 26(8): 375.
[13]鐘慧萍. 炒麥芽泡茶飲用聯(lián)合芒硝外敷雙乳回奶的效果觀察[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2015,13 (34): 157-159.
[14]葉琳. 少澤穴點(diǎn)刺放血配合蒲公英神曲麥芽煎回乳45例[J].陜西中醫(yī), 2008, 29(3): 341.
[15]楊強(qiáng),陳晉,劉軍. 卡麥角林治療泌乳素型垂體瘤的研究進(jìn)展[J].中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志, 2016, 42(5):311-314.
[16]DESSAUGE F, FINOT L, WIART S, et al. Effects of ovariectomy in prepubertal goats[J]. J Physiol Pharmacol, 2009, 60(S3): 127-133.
[17]AGARWAL S K, KIM J, KORST L M, et al. Application of the estrogen threshold hypothesis to the physiologic hypoestrogenemia of lactation[J]. Breastfeed Med, 2015, 10(2):77-83.
[18]張貴鋒,吳曉玲,溫鴻源,等. 針?biāo)幗Y(jié)合對(duì)圍絕經(jīng)期綜合征大鼠血清E2、FSH、LH及IGF表達(dá)水平的影響[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2016, 37(17):2143-2145.
[19]郝振榮,朱志寧,郭玉琴,等. 大豆黃酮對(duì)產(chǎn)奶量和牛奶品質(zhì)的影響[J].北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào), 2009, 24(4): 26-27.
[20]COOLS S, BROECK W V D, VANHAECKE L, et al. Feeding soybean meal increases the blood level of isoflavones and reduces the steroidogenic capacity in bovine corpora lutea, without affecting peripheral progesterone concentrations[J]. Anim Reprod Sci, 2014, 144(3): 79-89.
[21]BERRYHILL G E, TROTT J F, HOVEY R C. Mammary gland development:It’s not just about estrogen 1[J]. J Dairy Sci, 2016, 99(1): 875-883.
[22]CONNER E E, WOOD D L, SONSTEGARD T S, et al. Chromosomal mapping and quantitative analysis of estrogen-related receptor alpha-1, estrogen receptors alpha and beta and progesterone receptor in the bovine mammary gland[J]. J Endocrinol, 2005, 185(3): 593-603.
[23]李萍萍,王薇,謝玉泉. 舒肝涼血方對(duì)體內(nèi)雌激素影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華腫瘤雜志, 2003, 25(5): 445-447.
[24]TIOSANO D, PARIS F, GRIMALDI M, et al. Evidence of ERalpha and ERbeta selectivity and partial estrogen agonism in traditional chinese medicine[J]. Reprod Biol Endocrinol, 2014, 12(1): 1-14.
[25]王丹,趙瑞珍,李小黎,等. 補(bǔ)益心脾法對(duì)產(chǎn)后抑郁癥患者中醫(yī)證候積分以及雌、孕激素的影響[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2015, 38(11): 772-776.
[26]王小云,張春玲,莫莉莉,等. 補(bǔ)腎健脾中藥對(duì)圍絕經(jīng)期婦女骨代謝和雌激素的影響[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2000, 17(3): 230-232.
[27]HILTON H N, GRAHAM J D, CLARKE C L. Minireview: Progesterone regulation of proliferation in the normal human breast and in breast cancer: A tale of two scenarios?[J]. Mol Endocrinol, 2015, 29(9): 1230-1242.
[28]陳建暉,佟慧麗,李慶章,等. 胰島素、催乳素和孕酮對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞泌乳功能的影響[J].中國(guó)奶牛, 2008(8): 9-13.
[29]黃利,李利民,劉之恒,等. 乳癖2號(hào)湯對(duì)乳腺增生豚鼠雌孕激素水平及病理形態(tài)的影響[J].四川中醫(yī), 2013, 31(1): 61-63.
[30]王瑞瓊,吳國(guó)泰,劉峰林,等. 心理應(yīng)激致孕鼠乳腺發(fā)育不良及雌/孕激素和受體水平異常[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào), 2015, 23(3): 272-277.
[31]丁威,邢軍,魏全偉,等. 二花臉豬卵巢卵泡形成和早期發(fā)育過(guò)程中雌二醇和孕酮含量變化及其受體定位[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 2016, 32(2): 383-389.
[32]夏成,朱玉哲,徐鵬,等. 過(guò)瘤胃脂肪對(duì)泌乳奶牛生殖機(jī)能的影響[J].中國(guó)奶牛, 2010(10): 35-38.
[33]張劍峰,歸綏琪. 中藥治療對(duì)反復(fù)自然流產(chǎn)患者抗CD抗原封閉效率和血清泌乳素及孕酮的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2004, 24(4): 303-305.
[34]YANG G, ZHOU J, TENG Y, et al. Mesenchymal TGF-β signaling orchestrates dental epithelial stem cell homeostasis through Wnt signaling[J]. Stem Cells, 2014, 32(11): 2939-2948.
[35]KLEINBERG D L, FELDMAN M, RUAN W. IGF-I: An essential factor in terminal end bud formation and ductal morphogenesis[J]. J Mammary Gland Biol Neoplasia, 2000, 5(1): 7-17.
[36]ZARZYNSKA J, GAJKOWSKA B, WOJEWODZKA U, et al. Apoptosis and autophagy in involuting bovine mammary gland is accompanied by up-regulation of TGF-beta1 and suppression of somatotropic pathway[J]. Pol J Vet Sci, 2007, 10(1): 1-9.
[37]VRIES L D, CASEY T, DOVER H, et al. Effects of transforming growth factor-β on mammary remodeling during the dry period of dairy cows[J]. J Dairy Sci, 2011, 94(12): 6036-6046.
[38]張臻,闕華發(fā),朱元穎,等. 益氣化瘀中藥對(duì)糖尿病皮膚潰瘍大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1的影響[J]. 結(jié)合醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào), 2007, 5(4): 416-420.
[39]葛明曉,張金玉,趙彥鵬,等. 益氣血補(bǔ)肝腎中藥對(duì)體外受精-胚胎移植周期中卵泡液轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1和性激素水平的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2011, 31(3): 327-330.
[40]WU W J, LEE C F, HSIN C H, et al. TGF-β inhibits prolactin-induced expression of β-casein by a Smad3-dependent mechanism[J]. J Cell Biochem, 2008, 104(5): 1647- 1659.
[41]SERRA R, CROWLEY M R. Mouse models of transforming growth factor β impact in breast development and cancer[J]. Endocr Relat Cancer, 2005, 12(4): 749-760.
【責(zé)任編輯 莊 延】
Effects of Chinese herbal formula “Huirukang” on serum E, P4 and TGF-β1 levels of dairy cows during the milk withdrawal period
WU Xiaofeng1?, XIAO Jinbang1?, SHEN Liuhong1, JIANG Sixun1, QIAN Bolin1, DENG Junliang1, FU Hongqing2, ZUO Zhicai1, CAO Suizhong1, YU Shumin1, JIANG Tao1
(1 Medical Research Center for Cow Disease, College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University/Key Laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province, Chengdu 611130, China; 2 Jiangsu Agri-animal Husbandry Vocational College, Taizhou 225300, China)
【Objective】 To explore the impact of Chinese herbal formula “Huirukang” on serum estrogen(E), progesterone(P4) and transforming growth factor β1(TGF-β1) levels in dairy cows during the milk withdrawal period.【Method】Eighty healthy cows in late pregnancy with (15.42±0.71) kg daily milk yield were randomly divided into four groups: control group and Chinese medicine groups(fed 400, 500 and 600 g “Huirukang” daily). The method of gradual milk cessation was used. We collected venous blood from the cow tail on day 0, 1, 3, 5, 7, 9 and 11, and recorded the daily milk yield. ELISA was used to determine the expression levels of serum E, P4 and TGF-β1.【Result】Control group and Chinese medicine groups (400, 500, 600 g) dried off on day 11, 7, 5 and 5 respectively. Serum E levels declined in all four groups, and the decline in control group was slower compared to Chinese medicine groups. P4 level did not change significantly during the milk withdrawal period for control group. P4 levels increased first in Chinese medicine groups, then declined after the milk withdrawal period, and by the end of the test period were still significantly higher compared to control group. TGF-β1 levels increased in all four groups during the milk withdrawal period, and declined after the milk withdrawal period in Chinese medicine groups. The levels of E, TGF-β1 and daily milk yield showed significant correlation between each other during the milk withdrawal period, while P4 had no significant correlation with E, TGF-β1 or daily milk yield.【Conclusion】During the milk withdrawal period, Chinese herbal formula “Huirukang” can significantly promote cows to dry off. E is a negative regulation factor for milk withdrawal, while TGF-β1 is a positive regulation factor. P4 has no significant effect on milk withdrawal.
cow; milk withdrawal period; Chinese herbal formula; estrogen; progesterone; TGF-β1
2016- 11- 04 優(yōu)先出版時(shí)間:2017- 06-21
巫曉峰(1992—),男,碩士研究生,E-mail: 1041542947@qq.com;肖勁邦(1994—),男,碩士研究生,E-mail:811031312@qq.com;?對(duì)本文貢獻(xiàn)相同;通信作者:沈留紅(1979—),男,副教授,E-mail: shenlh@sicau.edu.cn
四川省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目(15ZA0024);江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院產(chǎn)業(yè)發(fā)展關(guān)鍵技術(shù)創(chuàng)新項(xiàng)目(NSF201604); 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)雙支計(jì)劃項(xiàng)目(03571303);四川農(nóng)業(yè)大學(xué)本科科研興趣培養(yǎng)計(jì)劃項(xiàng)目(KY2016062)
S828
A
1001- 411X(2017)04- 0069- 07
優(yōu)先出版網(wǎng)址:http://kns.cnki.net/kcms/detail/44.1110.s.20170621.1924.024.html
巫曉峰, 肖勁邦, 沈留紅, 等.中藥組方“回乳康”對(duì)回乳期奶牛血清E、P4和TGF-β1含量的影響[J].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2017,38(4):69- 75.