經肌酶組織染色法對甲肥大進行性肌營養(yǎng)不良癥肌纖維分型的類比實驗研究

馬歷兵

（吉林省吉林市中心醫(yī)院神經內科，吉林 吉林 132011）

經肌酶組織染色法對甲肥大進行性肌營養(yǎng)不良癥肌纖維分型的類比實驗研究

馬歷兵*

（吉林省吉林市中心醫(yī)院神經內科，吉林 吉林 132011）

目的 評價甲肥大進行性肌營養(yǎng)不良癥肌纖維分型。方法 選取2010年1月至2016年12月吉林市中心醫(yī)院隨機抽取的甲肥大進行性肌營養(yǎng)不良癥患者16例作為研究對象，對照7例正?；颊呋顧z組織臨床材料，進行對照比較。實驗試圖通過肌酶組織染色的辦法發(fā)現(xiàn)假肥大型進行性肌營養(yǎng)不良癥患者肌纖維結構進行性性狀改變。結果 觀察組各項數(shù)值明顯高于對照組，其數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學意義，且P＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義。結論 對照組與觀察組的肌纖維四種參數(shù)均存在差異顯著，是實驗進行中的較大特點，并可區(qū)別于其它型肌病。

甲肥大進行性；肌營養(yǎng)不良癥；纖維分型；類比實驗

假肥大性肌營養(yǎng)不良癥是以骨骼肌的進行性變性、壞死為主要病理特征的隱形遺傳病。呈現(xiàn)為骨骼肌近端無力，逐步喪失行走能力，最終導致心衰死亡。本次實驗就是試圖通過對肌纖維組織進行化學染色和形態(tài)計量后，對其數(shù)據(jù)加以測量，并與正常數(shù)值進行對比，從生物化學數(shù)據(jù)的角度進行分析，進而就其呈現(xiàn)情態(tài)的不同逐步探索診斷技術的革新?，F(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2010年1月至2016年12月吉林市中心醫(yī)院隨機抽取的甲肥大進行性肌營養(yǎng)不良癥患者16例作為研究對象，對照7例正常兒童活檢組織的臨床材料，進行生物化學與顯微鏡下的對照比較。將其分成對照組7例，觀察組16例，23例樣本均采集于男性患者，年齡在5-10歲之間，平均年齡7.5歲，病程在5個月至6年之間，所有患者均因肌肉無力就診，除7例正?；颊撸?例為明顯家族史外，其他樣本均為散發(fā)病例。17例患者由初步診斷，再經生物化學檢驗，化學染色、肌電圖等程序，各項數(shù)據(jù)指標均符合甲肥大進行性肌營養(yǎng)不良癥診斷標準，與正常組在同等生化條件下進行參照類比，具有可比性，所取得數(shù)據(jù)符合統(tǒng)計學標準。

1.2 研究方法

對照組患者取活檢組織用黃芪膠包埋，置于液氮容器，再將組織投入異戊烷10秒后取出切片。進行常規(guī)組織化學染色，染色片由樹脂封固，進行顯微鏡下觀察，對肌纖維形態(tài)變化情況做時時記錄，其形態(tài)、周長、直徑、分布等數(shù)據(jù)。經ATP酶染色加以分型，呈現(xiàn)四類五型，在顯微鏡下就不同PH值染色片進行顯微鏡下照相。經注意辨認、標記后進行CIAS圖像分析，測定邊緣完整標本直徑。測量后，所得數(shù)據(jù)均符合統(tǒng)計學標準。

1.3 統(tǒng)計學處理

本試驗數(shù)據(jù)均采用統(tǒng)計學數(shù)據(jù)處理，經SPSS 15.0軟件進行統(tǒng)計學分析，計量資料采用平均數(shù)±標準差表示，經統(tǒng)計學t檢驗，計數(shù)資料以百分率（%）表示，具有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

16例假肥大性肌營養(yǎng)不良癥患者與7例對照組肌纖維參數(shù)類比。16例患者取樣總計3855條顯微組織，從匯總結果上可見，患假肥大性肌營養(yǎng)不良癥的患者可見組織中出現(xiàn)大量二型C纖維，可見二型B纖維數(shù)量明顯改變，數(shù)目顯著減少。患者肌纖維參數(shù)從樣本單位面積、周長、直徑等與對照組類比后發(fā)現(xiàn)均有增加情況產生。經統(tǒng)計學t檢驗，存在差異具有統(tǒng)計學意義。見表1。

表1 16例假肥大性肌營養(yǎng)不良癥患者與7例對照組肌纖維各項參數(shù)對比數(shù)據(jù)（±s）

表1 16例假肥大性肌營養(yǎng)不良癥患者與7例對照組肌纖維各項參數(shù)對比數(shù)據(jù)（±s）

組別 面積 周長 最大直徑 最小直徑 等效圓直徑對照組 998±234 141±26 50±12 34±6 36±6觀察組 1279±926 151±50 54±24 29±14 54±13 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

可見肌纖維大小與疾病嚴重程度間的關系顯示不明顯，就各項參數(shù)測定以及其臨床改變程度，未見典型意義。

3 討 論

實驗試圖通過肌酶組織染色的辦法發(fā)現(xiàn)假肥大型進行性肌營養(yǎng)不良癥患者肌纖維結構進行性性狀改變，呈變性、壞死等形態(tài)，個別肌纖維嗜堿性狀發(fā)生改變，提示為肌纖維再生，樣本中的結締組織和脂肪組織改變異常，呈大量增加狀態(tài)，最終被纖維結締組織所取代。研究結果表明，觀察組患者體現(xiàn)改變值明顯區(qū)別于對照組，其數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。

實驗試圖通過形態(tài)計量學分析，發(fā)現(xiàn)假肥大型進行性肌營養(yǎng)不良癥患者肌纖維大小發(fā)生顯著改變，對照組與觀察組的肌纖維四種參數(shù)均存在差異顯著，一類與二類纖維有較大程度受損，且受損均勻。 二類 C型纖維顯著增加，并呈現(xiàn)改變異常。二類 B型纖維各項數(shù)值呈現(xiàn)明顯減少。這是假肥大型進行性肌營養(yǎng)不良癥患者實驗進行中的較大特點，并可區(qū)別于其它型肌病。

[1] 張 成.杜興氏肌營養(yǎng)不良基因結構與膜缺陷[J].廣東科技出版社.2003:410-427.

[2] 張 平.青年單側上肢遠端肌萎縮癥-肌活檢及與運動神經元病的鑒別診斷[J].臨床神經病學雜志,2013:304-312.

[3] 王秀艷.98例神經肌肉病的臨床、肌電圖與病理研究[J].中風與神經疾病雜志,2013,20(1):25-28.

本文編輯：王雨辰

Objective To evaluate a hypertrophy of muscular dystrophy muscle fiber types. Methods randomly selected from January 2010 to December 2016 in Jilin Central Hospital of muscle biopsy material.we muscular dystrophy patients with muscle fiber structure properties change. Results The value of the observation group was signifcantly higher than that of the control group, the data difference was statistically signifcant, and P ＜ 0.05, the difference was statistically signifcant. Conclusion There are signifcant differences in the four parameters of the muscle fber between the control group and the observation group, which is a great feature in the experiment and can be distinguished from other myopathy.

hypertrophic; Muscular dystrophy; Fiber type; Analogy experiment

R746.2

B

ISSN.2095-8242.2017.028.5430.02

馬歷兵（1974-），男，吉林省吉林市，副高級職稱，碩士學位，研究方向：神經病學方向；E-mail：897880521@qq.com