趙薇　冼小敏

[摘要]目的 探討黃芪不同炮制品對脾虛小鼠胃腸功能的影響與多糖含量的相關(guān)性。方法 選取體重接近的健康小鼠60只，隨機分成對照組、模型組、黃芪生品試驗組、蜜黃芪試驗組、米黃芪試驗組、麩黃芪試驗組。每組10只小鼠。采用苯酚一濃硫酸比色法測定黃芪不同炮制品多糖的含量，采用炭末標(biāo)記法研究黃芪不同炮制品對大黃致瀉的脾虛小鼠的胃排空率及小腸推進率的影響，分析兩者的相關(guān)性。結(jié)果 黃芪不同炮制品對脾虛小鼠的胃排空率及小腸推進率的影響：蜜黃芪>米黃芪>麩黃芪>生黃芪。相對于模型組來說，黃芪不同的炮制品對胃排空率及小腸推進率均有一定的抑制。相對于生黃芪而言，經(jīng)輔料炮制的黃芪對胃排空率及小腸推進率抑制較高。不同的黃芪炮制品對于脾虛小鼠胃排空率及小腸推進率的影響不同。蜜黃芪>米黃芪>麩黃芪>生黃芪。經(jīng)輔料炮制后的黃芪的胃排空率與小腸推進率與對照組無顯著性差異，表明經(jīng)治療后胃腸功能已接近正常水平。結(jié)論 黃芪不同炮制品抑制脾虛小鼠胃排空率及小腸推進率與多糖的含量成一定的正相關(guān)性。

[關(guān)鍵詞]黃芪；炮制品；脾虛小鼠；胃腸功能；多糖含量；相關(guān)性

[中圖分類號] R283.1 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）07（b）-0145-03

[Abstract]Objective To investigate correlation of effects of different processed products of Astrsgalus membranaceus on gastrointestinal function of spleen deficiency mice and polysaccharides content.Methods 60 healthy mice were selected and randomly divided into the control group，the model group，the Astragalus quality test group，the honey Astragalus test group，the rice Astragalus test group and the Astragalus membranaceus experimental group.There were 10 mice in each group.Determination of content of Astragalus Polysaccharides of different processed products of colorimetric method using phenol sulfuric acid，and the gastric emptying rate of carbon powder in small intestine of mice with spleen deficiency of Huangqi markers of different processed products of rhubarb lapactic advance rate and compare correlation between.Results Different processed products of spleen deficiency mice gastric emptying rate and intestinal propulsive rate： the influence of honey Astragalus Astragalus，astragalus，rice bran，astragalus.Compared with the model group，the different processed products of Astragalus had some inhibition on the rate of gastric emptying and the rate of small bowel propulsion.Compared with the Astragalus membranaceus，the Astragalus membranaceus prepared by the adjuvant inhibited the gastric emptying rate and the intestinal propulsive rate.The effects of different Astragalus processed products on gastric emptying rate and intestinal propulsive rate of spleen deficiency mice were different.Honey astragalus root > rice astragalus root > Astragalus membranaceus > Astragalus membranaceus.There was no significant difference in the gastric emptying rate and the small intestinal propulsive rate between the processed Astragalus and the control group，indicating that the gastrointestinal function was close to the normal level after treatment.Conclusion The gastric emptying rate and intestinal propulsive rare of spleen deficiency mice controlled by different processed products of Astragalus membranaceus have positive correlation with polysaccharides content.

[Key words]Astragalus membranaceus；Drug Processing；Spleen deficiency mice；Gastrointestinal function；Polysaccharides content；Correlation

《中國藥典》規(guī)定，黃芪是豆科植物蒙古黃芪、膜莢黃芪的干燥根。黃芪最先記載在《神農(nóng)本草經(jīng)》，味甘微溫，入肺脾經(jīng)，具有補氣固表的作用[1-2]。現(xiàn)代藥學(xué)研究提示，黃芪多糖是黃芪有效成分含量最高的一種，也是其主要的活性成分[3-4]。黃芪經(jīng)過蜜、米、麥麩炮制后，可增強補脾益氣的功效。中藥的成分復(fù)雜，不同的炮制方法會使其有效成分發(fā)生變化，因而了解其藥性隨著炮制的不同而出現(xiàn)化學(xué)成分的變化至關(guān)重要[5]。本文探討黃芪不同炮制品對脾虛小鼠胃腸功能的影響與多糖含量的相關(guān)性，為近一步闡明黃芪的炮制機理提供一定的依據(jù)。

1試驗材料

1.1動物

ICR小鼠，18～22 g，60只，雌性各半，購于遼寧省實驗動物資源中心，許可證號：SCXK（遼）2016-0004。

1.2試藥

Heλios γ紫外分光光度計（Thermo Electron Corporation），BP211D電子天平（賽多利斯），葡萄糖對照品（批號：110833-201205，中國食品藥品檢定研究院提供）；所用試劑（AR）：大黃、黃芪購于廣州市藥材公司中藥飲片廠。

2方法

2.1黃芪的炮制

蜜黃芪：取凈黃芪片，加25%煉蜜（1/3開水稀釋），拌勻，悶潤至蜜被吸盡，文火炒至深黃色且不粘手時，取出并放涼；米黃芪：將20%米置于鍋內(nèi)翻炒至冒煙，加入黃芪片炒至深黃色取出，篩去米并放涼；麩黃芪：將15%麥麩置于鍋內(nèi)翻炒至冒煙，加入黃芪片炒至深黃色取出，篩去麥麩并放涼。

2.2黃芪及其炮制品水煎液的制備

取生黃芪及各黃芪炮制品各100 g，分別加石油醚500 ml，回流脫脂2次，1 h/次，再用80%乙醇回流提取2次，2 h/次，棄去乙醇提取液，將藥渣分別加8倍量的水，于90℃水浴提取2次，2 h/次，合并濾液，濃縮成含2 g /ml黃芪水煎液，密封，放冰箱冷藏以備用[6]。

2.3黃芪及其炮制品水煎液多糖含量的測定

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：分別量取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.05 mg/ml）2、4、6、8、10、12、14、16 ml于25 ml容量瓶中加蒸餾水定容，取標(biāo)準(zhǔn)液1 ml于 10 ml具塞試管中，加入5%的苯酚溶液1.0 ml，搖勻后迅速加入5 ml濃硫酸顯色，振蕩5 min。置于沸水浴中加熱30 min，取出后冷卻至室溫。另取1 ml蒸餾水同法做成空白參比溶液，測定吸光度（A），以A為縱坐標(biāo)，葡萄糖濃度（C）為橫坐標(biāo)，求出標(biāo)準(zhǔn)回歸方程。

樣品含量測定：精密吸取黃芪炮制品水煎液各1 ml，于100 ml 容量瓶中加蒸餾水定容，移取2 ml于10 ml具塞試管中，以下同標(biāo)準(zhǔn)曲線制備方法。采用蒸餾水同法做空白參比溶液，分別測定A，代入回歸方程計算樣品濃度，然后計算黃芪不同炮制品中多糖含量[7]。

2.4大黃水煎液的制備

將生大黃在8倍水中浸泡0.5 h，煮沸40 min。用紗布過濾，再加入6倍水煮沸20 min，用紗布過濾，將2次濾液合并，在60℃水浴中濃縮成大黃水煎劑（濃度為1 g/ml），高壓滅菌后，冷藏保存。

2.5胃排空及小腸推進試驗

選取體重均等小鼠60只，隨機分成對照組、模型組、黃芪生品試驗組、蜜黃芪試驗組、米黃芪試驗組、麩黃芪試驗組，每組10只小鼠。對照組小鼠給予口服生理鹽水，每只20 ml/kg，1次/d，一直給予至試驗結(jié)束。模型組、試驗組給予口服大黃水煎劑，每只20 ml/kg，1次/d，在給予這些小鼠大黃水灌服后，每天觀察小鼠的精神、食欲、糞便等情況。觀察一直到小鼠的脾虛模型已經(jīng)建立成功后為止[8]。當(dāng)小鼠的脾虛模型經(jīng)建立后，建模組給予生理鹽水，每只20 ml/kg。試驗組分別給予生黃芪、蜜黃芪、米黃芪、麩黃芪水煎液，每只20 ml/kg，1次/d，一直連續(xù)14 d。于末次灌胃60 min后，按30 ml/kg灌胃半固體黑色糊（取羧甲基纖維素鈉10 g，置于250 ml水中，待完全溶解后，加入奶粉16 g，淀粉8 g，蔗糖8 g和活性炭粉末2 g，攪拌均勻，即得），20 min后脫頸椎處死小鼠，開腹，結(jié)扎胃賁門和幽門，取胃，用濾紙拭干后稱全重，剪開胃體，洗去胃內(nèi)容物后拭干，稱凈重。以胃全重和胃凈重的差值為胃內(nèi)殘留物重，半固體糊重量與胃內(nèi)殘留物的差值為胃排空量，計算胃排空量占所灌半固體糊重量的百分比為胃內(nèi)殘留率。同時取出小腸，將小腸拉成直線，測量小腸的全長及幽門至黑色半固體糊前沿的距離。計算胃排空率和小腸推進率[9]。小腸推進率=炭末推進距離/小腸全長×100%；胃排空率=（半固體糊重量-胃內(nèi)殘留量）/半固體糊重量×100%。

2.6統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3結(jié)果

3.1黃芪不同炮制品多糖含量

不同炮制品中多糖類成分含量存在差異，蜜黃芪（9.68%）>米黃芪（7.57%）>麩黃芪（6.81%）>生黃芪（5.24%），其中蜜黃芪最高，生黃芪最低，與黃芪比較，其余3種炮制品多糖含量均較高（P<0.05）。

3.2黃芪不同炮制品對脾虛小鼠胃排空率與小腸推進率的影響

與對照組比較，模型組的胃排空率、小腸推進率顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），說明造模成功。相對于模型組來說，黃芪不同的炮制品對胃排空率及小腸推進率均有一定的抑制。相對于生黃芪而言，經(jīng)輔料炮制的黃芪對胃排空率及小腸推進率抑制較高。不同的黃芪炮制品對于脾虛小鼠胃排空率及小腸推進率的影響不同。蜜黃芪>米黃芪>麩黃芪>生黃芪。經(jīng)輔料炮制后的黃芪的胃排空率與小腸推進率與對照組無顯著性差異（P>0.05），提示經(jīng)治療后胃腸功能已接近正常水平（表1）。

4討論

中醫(yī)認(rèn)為，“脾為后天之本”，具有統(tǒng)率機體防御能力的功能。大量實驗與臨床研究提示，“脾虛”時消化系統(tǒng)功能處于紊亂狀態(tài)，機體的細胞免疫和體液免疫狀態(tài)均有不同程度的降低，以細胞免疫功能最為明顯[10]。黃芪具有促進小腸蠕動，改善機體胃腸功能的作用[11]。黃芪多糖的主要生物活性是調(diào)節(jié)機體免疫力，并且其他的生物活性很大程度上都基于其對機體免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用[12-13]。

由于黃芪的成分較為復(fù)雜[14]，本文多糖的提取是采用石油醚，乙醇處理藥材，除去了單糖，再用水提取；多糖的含量測定則采用的是苯酚-濃硫酸比色法[15]。

本試驗結(jié)果顯示黃芪不同炮制品對脾虛小鼠消化道機能下降導(dǎo)致胃排空率與小腸推進率升高均都有明顯抑制作用，而且抑制作用的強弱與多糖含量成現(xiàn)一定的正相關(guān)性。

綜上所述，黃芪補脾益氣作用可能與黃芪多糖提高小鼠免疫力有關(guān)，也為如何近一步完善黃芪的炮制工藝有一定借鑒作用。

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（收稿日期：2017-06-01 本文編輯：馬 越）