王保有周雙海

（1天津寧河原種豬場，天津寧河 301504；2北京農學院，北京 102206）

兩種豬圓環(huán)病毒2型疫苗臨床免疫效果的比較

王保有1周雙海2*

（1天津寧河原種豬場，天津寧河 301504；2北京農學院，北京 102206）

選取國內商業(yè)PCV2疫苗A和B，在一個大型豬場進行小型田間試驗。將36頭母豬隨機平均分成3組，每組母豬所產仔豬在14日齡分別接種疫苗A（A組）、疫苗B（B組）、生理鹽水 （C組，對照）。采集免疫后不同時間的仔豬血清，檢測PCV2抗體，比較各組的發(fā)病率、死亡率與增重。結果顯示，接種疫苗組與對照組的仔豬發(fā)病率與死亡率都低、且無差異；但接種PCV2疫苗的兩組都顯著 （＜0.05）提高了增重，并改善了血清中PCV2抗體變化趨勢。另外，A組的臨床數(shù)據稍優(yōu)于B組。檢測結果表明，仔豬免疫PCV2疫苗的臨床效果明顯優(yōu)于未免疫組，PCV2疫苗A的臨床免疫效果稍好于疫苗B，為試驗豬場今后進行PCV2疫苗免疫提供了實驗依據。

PCV2；PCV2疫苗；仔豬；臨床免疫效果

豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）是引起豬的斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS），繁殖障礙、皮炎與腎炎綜合征（PDNS），豬呼吸道病綜合征（PRDC）等多種豬圓環(huán)病毒?。≒CVD）的病原。其中以PMWS的危害最為嚴重，給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大經濟損失[1,2]。目前，以PMWS為主的PCVD仍在不少國家發(fā)生和流行[3]，是當前國內養(yǎng)豬生產需要重點注意和防控的一種主要傳染病。

疫苗免疫已成為控制PMWS的重要措施。目前國外有5種商業(yè)PCV2疫苗投入臨床使用，包括2種全病毒滅活疫苗和3種亞單位疫苗，這些疫苗都可用于仔豬免疫，其中1種還可用于母豬免疫[4,5]。臨床試驗資料顯示，這些商業(yè)疫苗都顯示出較好的免疫保護效力，能夠有效地降低免疫仔豬的死亡率與淘汰率、增加平均增重、提高生產性能和經濟效益[6-11]。但是，這些國外的商業(yè)化PCV2疫苗的價格比較昂貴，難以被中國養(yǎng)豬企業(yè)廣泛接受。

目前，一些國內疫苗企業(yè)也有商業(yè)化PCV2疫苗，多是全病毒滅活疫苗，主要有江蘇南農高科技股份有限公司和普萊柯生物工程股份有限公司（SH株）及上海海利生物技術股份有限公司和中國農業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所（LG株）等。這些疫苗應用于斷奶仔豬已經顯示出一定臨床效果，但仍需進行進一步的試驗。因此，本試驗旨在基于國內PCV2 LG株和SH株兩種毒株來源的商業(yè)PCV2滅活疫苗進行小型臨床免疫效果的比較試驗，以期為一些規(guī)?；i場選用國內商業(yè)PCV2疫苗提供試驗依據。

1 材料與方法

1.1 試驗用豬

試驗豬為長白仔豬。從50頭懷孕母豬中選擇年齡、胎次、營養(yǎng)狀況、抗體水平、飼養(yǎng)條件相近的36頭經產母豬，每12頭母豬產下的仔豬作為一組，共分成三組。第一組仔豬在14日齡肌肉注射1頭份PCV2疫苗A（A組）；第二組仔豬在14日齡注射1頭份PCV2疫苗B（B組）；第三組仔豬在14日齡注射2 mL滅菌生理鹽水（C組，作為對照組）。仔豬均于28日齡斷奶、30日齡轉入保育豬舍，每組占用一個單元豬舍。試驗全程對仔豬的飼養(yǎng)管理按照相關規(guī)程進行。在試驗期間每天觀察仔豬的健康狀況，并統(tǒng)計死淘情況。在仔豬注射PCV2疫苗或生理鹽水后0天、14天、28天、42天、56天，從每組仔豬中隨機挑選20頭分別從前腔靜脈采血5 mL，室溫靜置6小時，4 000轉/分離心6分鐘，分離出血清注入1.5 mL的EP錐形管中，做好標記，于-80℃保存，用于ELISA抗體檢測。

1.2 抗體檢測

對采集分離的懷孕母豬和試驗組、對照組待檢血清按照試劑盒的說明書進行PCV2抗體檢測。在使用前，試劑盒的各個組分都必須恢復到室溫，試劑應充分混勻。

分別統(tǒng)計不同處理組數(shù)據，用方差分析對相關數(shù)據進行統(tǒng)計學分析。

2 結果與分析

2.1 仔豬的增重

數(shù)據顯示，A組與B組之間的平均增重沒有顯著差異（＞0.05），但A組與B組的平均增重均顯著高于C組（ ＜0.05）。由此可見，接種PCV2疫苗沒有對仔豬的生長發(fā)育造成不良影響，并且A、B組豬群的增重情況高于C組。

表1 PCV2疫苗接種豬的增重

2.2 豬血清中PCV2抗體變化

圖1 仔豬血清中PCV2抗體水平變化

表2 不同時間段仔豬血清中PCV2抗體的OD值及陽性率

抗體檢測結果見表2、圖1。在14日齡（免疫后0天）時，不同組仔豬血清中PCV2抗體水平接近，抗體陽性率都為100%。A、B兩組在14日齡注射PCV2疫苗，到28日齡（免疫后14天）時PCV2抗體水平輕微下降，抗體陽性率也不到100%；C組抗體水平明顯下降，顯著（＜0.05）低于A組與B組，抗體陽性率明顯低于100%。之后，三個組的PCV2抗體水平都上升，A組與B組的抗體水平與抗體陽性率都高于C組，其中A組抗體水平顯著（＜0.05）高于C組；同時，A組抗體水平整體高于B組，其中在42日齡達到顯著水平。

2.3 豬的臨床變化與死淘情況

在試驗期間，個別瘦弱仔豬有腹瀉癥狀，其他仔豬臨床表現(xiàn)正常，采食量正常。在試驗階段，A組有3頭瘦弱仔豬出現(xiàn)腹瀉、氣喘后死亡，B組死亡5頭，C組死亡5頭?？偟膩砜?，各組之間仔豬的發(fā)病率、死亡率與淘汰率等都小，且無明顯差異。

3 討論

由PCV2引起的豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）等多種豬圓環(huán)病毒?。≒CVD）是當前中外養(yǎng)豬業(yè)面臨的、需要著重防控的一種主要的病毒性疾病，控制該病的一種重要措施就是進行疫苗免疫。目前國外有5種可用于仔豬免疫的商業(yè)PCV2疫苗，其臨床免疫保護效果雖好，但價格較高。國內疫苗廠商自2010年也陸續(xù)推出了國產商業(yè)PCV2疫苗，價格相對低廉，但不同廠商PCV2疫苗的選用毒株、生產工藝及佐劑等不盡相同，臨床使用效果反映不一，故本研究選取了2種國內廠家生產的商業(yè)PCV2疫苗在一家PCV2陽性豬場進行了仔豬的臨床免疫比較試驗。

臨床生產數(shù)據顯示，疫苗A免疫組135頭，死亡5頭，死亡率3.7%；疫苗B免疫組131頭，死亡5頭，死亡率3.8%；對照組128頭，死亡5頭，死亡率3.9%。各組之間基本接近，說明在本次試驗環(huán)境下，是否接種PCV2疫苗對仔豬的發(fā)病率與死亡、淘汰率沒有明顯影響。增重數(shù)據顯示，疫苗A組與疫苗B組之間的平均增重基本接近，兩個疫苗免疫組的平均增重均顯著高于對照組。很多臨床研究報道，進行PCV2疫苗免疫后明顯降低了仔豬死亡率、提高了仔豬增重[12]，但本研究中僅提高了仔豬增重。出現(xiàn)這種差異的原因很可能主要與豬場的健康狀況有關，這些試驗研究都是在發(fā)生嚴重PMWS的豬場進行的[13]，但本研究的試驗豬場在試驗期及其前后3個月內的所有疾病的發(fā)病率與死亡率都很低，可以說是處于一個相對穩(wěn)定、健康的狀態(tài)，因此未能觀察到疫苗免疫降低仔豬死亡率的明顯效果。由于豬圓環(huán)病毒病是一種多因子疾病，單獨的PCV2感染很難引起臨床疾病，往往需要與豬細小病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬肺炎支原體等病原共同感染才能引起明顯發(fā)病[14-16]，這也間接說明該試驗豬場在試驗期前后一段時間內與PCV2具有協(xié)同致病作用的病原的感染數(shù)量少或無。另外一個可能原因是本試驗的樣本數(shù)不太大。但即使這樣，仍然觀察到仔豬增重明顯提高的現(xiàn)象，這說明即使在健康狀況良好的豬場進行PCV疫苗免疫，仍然可以促進仔豬生長，提高仔豬生產性能，從而增加經濟效益。章紅兵等[17]的試驗研究也有類似報道。

4 小結

對2種國產商業(yè)PCV2疫苗進行了一次小型田間試驗，結果顯示：2個PCV2疫苗免疫組都顯著提高了仔豬增重，明顯改善了抗體水平及其整齊度；另外，接種疫苗A的數(shù)據稍優(yōu)于接種疫苗B。田間試驗表明，仔豬免疫PCV2疫苗的臨床效果優(yōu)于未免疫組，PCV2疫苗A的臨床免疫效果稍好于疫苗B。

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S852.65

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：1673-4645(2017)08-0067-04

2017-05-23

王保有（1981-），男，天津市寧河人，主要從事豬場疾病防控，E-mail：djtliuyujie@126.com

*通訊作者：周雙海（1972-），男，博士，副教授，主要從事動物分子病毒學與免疫學研究、動物傳染病診斷與防治，E-mail：shhaizhou@bac.edu.cn