徐竟一+江金永+李?yuàn)櫳?/p>
摘 要:本文將超聲波技術(shù)應(yīng)用于傳統(tǒng)預(yù)發(fā)酵-酸水解法提取薯蕷皂素的工藝中,通過選取對(duì)薯蕷皂素得率有顯著影響的預(yù)發(fā)酵時(shí)間、鹽酸濃度和超聲時(shí)間為因素,以薯蕷皂素的得率為指標(biāo),進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明最優(yōu)工藝條件為鹽酸的濃度為3moL/L,預(yù)發(fā)酵時(shí)間24h,超聲提取時(shí)間45min。
關(guān)鍵詞:黃姜 薯蕷皂素 超聲波 預(yù)發(fā)酵
黃姜皂素(Diosgenin),又稱薯蕷皂苷元,有“藥用黃金”的美稱,可作為多種甾體類激素藥物的基礎(chǔ)物,其主要成分是從黃姜的根狀莖中提取出來的,是一種具有開發(fā)潛力的生物資源。黃姜學(xué)名盾葉薯蕷,又稱火頭根,被子植物門,單子葉植物綱,薯蕷科薯蕷屬草質(zhì)纏繞性藤本植物,是世界上薯蕷皂苷(元)含量最高的物種,也是目前最好的激素類藥源植物。黃姜皂苷在黃姜根狀莖中的含量大多集中在1%~4%之間,其它成分包括 40%淀粉、50%纖維素、還有少許色素等[1,2]。
目前,工業(yè)上黃姜皂素的傳統(tǒng)提取思路主要為預(yù)發(fā)酵-酸水解法:先將黃姜粉碎后進(jìn)行預(yù)發(fā)酵,再把含有皂苷的混合物進(jìn)行酸水解,最后用有機(jī)溶劑將皂素從水解物中提取出來。該種工藝操作簡便,成本低廉,但其工藝主要存在以下問題是原料直接水解不徹底,皂素得率低。如何提高其水解效果成為該種生產(chǎn)工藝的瓶頸所在。
超聲波是物質(zhì)介質(zhì)中的一種彈性機(jī)械波。植物高分子存在的無定形區(qū)、孔隙和空洞在超聲波的作用下,其表面會(huì)發(fā)生微觀滑移,形成疲勞源,導(dǎo)致彈性模量下降,增強(qiáng)了化學(xué)活性。近年來,超聲波技術(shù)已廣泛應(yīng)用于中草藥的提取,并且用于黃姜中薯蕷皂素的提取亦有相關(guān)文獻(xiàn)與報(bào)道。筆者參照企業(yè)工藝現(xiàn)狀,將超聲與預(yù)發(fā)酵結(jié)合,共同作用于黃姜中薯蕷皂素的提取,以期獲得更高提取率,為實(shí)際生產(chǎn)提供參考[3]。
1 材料與方法
1.1 材料
實(shí)驗(yàn)材料:黃姜(盾葉薯蕷根莖),河南南陽產(chǎn),市售。
儀器設(shè)備:KJ-1340AL超聲發(fā)生器;恒溫箱;電子天平;可控溫加熱套;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器;真空泵。
試劑:鹽酸(AR),乙醇(AR)。
1.2 工藝流程
主要操作條件:(1)預(yù)發(fā)酵:準(zhǔn)確秤取20g黃姜,粉碎,按照1:2的料液比加水,攪勻,恒溫發(fā)酵48h;(2)酸水解:將發(fā)酵完的料液加濃鹽酸至50ml,置于1000ml的圓底燒瓶中,水解4h;(3)超聲提?。捍_定超聲功率400W,超聲溫度65℃進(jìn)行超聲提?。唬?)中和、干燥:用新制蒸餾水洗滌濾渣至中性,置于烘箱中干燥;(5)提?。簩⒔?jīng)過前處理的固體樣品用乙醇回流提取4h;(6)濃縮,恒溫箱內(nèi)烘干濃縮,即得到黃姜皂素??筛鶕?jù)所的固體計(jì)算得率。
2 結(jié)果與分析
2.1 單因素實(shí)驗(yàn)
2.1.1 單一預(yù)發(fā)酵條件的選擇
影響薯蕷皂素的得率的預(yù)發(fā)酵因素包括預(yù)發(fā)酵溫度和預(yù)發(fā)酵時(shí)間,這里我們固定預(yù)發(fā)酵溫度,只改變時(shí)間條件,設(shè)定3個(gè)預(yù)發(fā)酵時(shí)間條件24h、36h、48,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖2。
由圖2可知,薯蕷皂素的得率隨著發(fā)酵時(shí)間的延長而降低,其中以發(fā)酵24h為最好。這主要是由于,黃姜在預(yù)發(fā)酵期間,如果發(fā)酵時(shí)間過長,生成其他雜質(zhì),反而會(huì)造成薯蕷皂素的得率降低[4,5]。
2.1.2 單一水解條件的選擇
影響薯蕷皂素的得率的水解因素包括鹽酸的濃度和水解時(shí)間,這里我們固定水解時(shí)間,只改變濃度條件,設(shè)定1mol/L、2mol/L、3mol/L三個(gè)濃度,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖3。
由圖3可知,薯蕷皂素的得率隨著水解酸濃度的升高而升高,酸濃度越高,其得率越高[6,7]。
2.1.3 單一超聲提取條件的選擇
影響影響薯蕷皂素的得率的超聲提取因素包括超聲時(shí)間、超聲功率、和超聲溫度,這里我們固定超聲功率和超聲溫度,只改變超聲時(shí)間,設(shè)定30min、45min、60min,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖4。
由圖4可知,薯蕷皂素的得率隨著超聲時(shí)間的升高而升高,超聲提取時(shí)間越長,其得率越高[8,9]。
2.2 正交實(shí)驗(yàn)
根據(jù)上述單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,綜合考慮預(yù)發(fā)酵時(shí)間(A)、水解鹽酸濃度(B)、超聲提取時(shí)間(C)的影響,進(jìn)行薯蕷皂素提取的正交實(shí)驗(yàn)。正交實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)及結(jié)果和數(shù)據(jù)分析如表1.
有表1正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果的直觀分析可得出:實(shí)驗(yàn)因素的主次順序?yàn)辂}酸的濃度〉預(yù)發(fā)酵時(shí)間〉超聲提取時(shí)間。因此一定要控制水解酸的濃度在最優(yōu)水平上,正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析的出的最優(yōu)水平為A1B3C2,要使的薯蕷皂素得率高,應(yīng)選擇鹽酸的濃度為3mol/L,預(yù)發(fā)酵時(shí)間24h,超聲提取時(shí)間45min。
3 結(jié)論
用超聲提取優(yōu)化了傳統(tǒng)的預(yù)發(fā)酵提取薯蕷皂素工藝,得到了薯蕷皂素提取最優(yōu)工藝條件,即鹽酸的濃度為3mol/L,預(yù)發(fā)酵時(shí)間24h,超聲提取時(shí)間45min。在此條件下薯蕷皂素的得率最好。
基金項(xiàng)目:本文系南陽市科技攻關(guān)項(xiàng)目“黃姜中提取薯蕷皂素的工藝條件研究”(項(xiàng)目編號(hào):KJGG-56)研究成果之一。
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