鄒燕娣，包李林，熊巍林，金 瑚，李敏利，張謙益，萬 聰

(道道全糧油股份有限公司，國家油菜籽加工技術(shù)研發(fā)分中心，湖南 岳陽 414000)

菜籽油中蠟含量快速測定方法的研究

鄒燕娣，包李林，熊巍林，金 瑚，李敏利，張謙益，萬 聰

(道道全糧油股份有限公司，國家油菜籽加工技術(shù)研發(fā)分中心，湖南 岳陽 414000)

建立了一種菜籽油中蠟含量的快速檢測方法。根據(jù)蠟質(zhì)在冰水混合浴中結(jié)晶析出的特性，利用高靈敏度的濁度儀測其渾濁度來確定蠟含量。結(jié)果表明：該方法測定的蠟含量在0～250 mg/kg范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系；10、20、30 mg/kg和60 mg/kg的加標(biāo)回收率分別為75.0%～89.0%，71.5%～88.5%，83.3%～102.3%和90.0%～103.3%；對同一未脫蠟菜籽油和脫蠟菜籽油中的蠟含量測定結(jié)果分別為30.0～33.9 mg/kg和12.7～13.3 mg/kg。說明該法結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)性較好，且操作簡便、耗時短，可應(yīng)用于菜籽油中微量蠟質(zhì)的快速測定。

菜籽油；濁度儀；蠟質(zhì)；微量

植物油中含有一些天然蠟質(zhì)，當(dāng)溫度大于等于40℃時，蠟質(zhì)表現(xiàn)為親脂性，沒有極性；當(dāng)溫度小于 40℃ 時，蠟質(zhì)表現(xiàn)為結(jié)晶性和弱親水性[1-4]。蠟質(zhì)不但降低了油的吸收消化率，影響油脂的風(fēng)味，而且在儲存過程中容易結(jié)晶析出，引起植物油的渾濁。因此，在油脂精煉過程中常采用脫蠟工序?qū)⑵淙コ?/p>

目前國內(nèi)外測定植物油中蠟含量的方法，主要有不溶物法[5]、濁度法[6]和氣相色譜法[7-10]，這些方法都主要用于葵花籽油、米糠油、棉籽油、橄欖油等高蠟含量的測定。而關(guān)于菜籽油、大豆油、玉米油等低蠟含量測定的研究相對較少，給植物油品質(zhì)監(jiān)控和科研帶來諸多不便。本文采用高靈敏度的濁度儀，根據(jù)渾濁度的大小與蠟含量成增減比例的關(guān)系，建立一種簡便、快速、準(zhǔn)確測定菜籽油中蠟含量的方法，為脫蠟工序和測定蠟含量提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

未脫蠟菜籽油和脫蠟菜籽油、硅藻土脫蠟餅，本公司脫蠟車間自給。丁酮、石油醚為分析純，2100N型濁度儀(美國哈希)；95-2型磁力攪拌器。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 菜籽油蠟質(zhì)的提取

向硅藻土脫蠟餅中加入適量的石油醚，放置4 h后，用濾布將萃取物和硅藻土分離出來，將分離出來的萃取物置于加熱攪拌器中加熱攪拌，使油脂中的石油醚和水分完全揮發(fā)掉，趁熱真空減壓過濾掉少量的硅藻土，冷卻至室溫后，向萃取物中加入適量的丁酮，混勻，放入冰水浴中冷卻0.5 h，趁冷過濾，如果濾紙上的濾餅顏色不是白色，即還含有油脂，則需要用藥勺輕輕刮下置于燒杯中并加入適量的丁酮混勻，重新過濾，直到濾紙上的濾餅為白色，即為菜籽油蠟質(zhì)。

1.2.2 蠟質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

將1.2.1中提取出來的蠟質(zhì)0.1 g(精確至0.000 1 g)加入到200 g脫蠟菜籽油中(此脫蠟菜籽油為在冰箱中冷藏72 h后經(jīng)減壓抽濾得到)，加熱至130℃，使蠟質(zhì)完全溶解，形成透明均一的溶液，此菜籽油蠟含量為500 mg/kg，并逐級稀釋成0、50、100、150、200、250 mg/kg的蠟質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2.3 蠟質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

室溫控制20～25℃下，將0～250 mg/kg系列蠟質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液先加熱至130℃使蠟質(zhì)完全溶解后，冷卻到室溫后倒入比色瓶中，測定此時的渾濁度，記為N0，之后放置在冰水浴冷凍30 min(在此期間需保持冰水浴中的溫度在5℃以下)，將待測標(biāo)樣取出, 用濾紙輕輕快速擦拭比色瓶表面的水霧，當(dāng)比色瓶表面不起霧時，迅速放在濁度儀上測其渾濁度，記錄10 s內(nèi)穩(wěn)定的渾濁度，記為N1。樣品的渾濁度=N1-N0。以標(biāo)準(zhǔn)樣品的蠟含量(x)為橫坐標(biāo)，渾濁度(y)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.4 油樣中蠟含量的測定方法

按1.2.3測定油樣的渾濁度，按1.2.3所得標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算油樣中的蠟含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 蠟質(zhì)提取方法的選取

(1)將菜籽油置于冰箱中0℃冷藏24 h，趁冷減壓抽濾，結(jié)果提取的蠟質(zhì)極少甚至沒有。主要原因是菜籽油中蠟含量較低(50 mg/kg以下)，因此該方法不可取。

(2)按1.2.1 中菜籽油蠟質(zhì)提取方法可得到較多蠟質(zhì)，關(guān)鍵步驟為必須將浸泡在石油醚中的硅藻土脫蠟餅用濾布進(jìn)行過濾，再進(jìn)行后面的步驟。

2.2 試驗(yàn)過程影響因素分析

2.2.1 室溫差別對渾濁度的影響

由于試驗(yàn)條件限制，試驗(yàn)又是在夏天完成的，控制室溫低于20℃較難，因此我們選擇容易控制的室溫20℃±2℃、25℃±2℃、28℃±2℃作為研究對象，按1.2.3進(jìn)行操作，測定樣品的渾濁度，室溫對渾濁度的影響見表1。

表1 室溫對渾濁度的影響

由表1可知，渾濁度的變化基本是同蠟含量的增減成比例的，且表中的3 個室溫對植物油中的渾濁度影響不大。利用標(biāo)樣中的蠟含量與渾濁度的關(guān)系繪制20℃±2℃、25℃±2℃、28℃±2℃下的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性方程分別為：y=0.021x+0.03，R2=0.996；y=0.022x-0.077，R2=0.991；y=0.022x-0.067，R2=0.992。由此可見，這3種室溫下的線性關(guān)系均良好，其中在室溫20℃±2℃下測試的線性最好。由于較難準(zhǔn)確地控制室溫，因此試驗(yàn)選擇在室溫20～25℃下進(jìn)行。

2.2.2 冷凍時間對渾濁度的影響

按1.2.3方法，將質(zhì)量濃度為250 mg/kg的標(biāo)樣放置在冰水浴中分別冷凍10、20、30、40、60 min，測其渾濁度，結(jié)果見圖1。

圖1 冷凍時間對渾濁度的影響

由圖1可知，冷凍30 min之前，標(biāo)樣的渾濁度隨冷凍時間的延長而增大；當(dāng)冷凍30 min之后，標(biāo)樣的渾濁度不再變化。所以認(rèn)為冷凍時間為30 min時，標(biāo)樣的蠟質(zhì)能完全析出，故而選擇冷凍時間為30 min。

2.2.3 放置時間對渾濁度的影響

按1.2.3方法，將質(zhì)量濃度為250 mg/kg的標(biāo)樣冷凍30 min后取出，輕輕擦拭表面水霧后，分別放置0.3、1、2、4、10、20、60 min，測其渾濁度，結(jié)果見表2。

表2 放置時間對渾濁度的影響

由表2可知，待測樣冷凍后取出，在1 min內(nèi)測定，油脂的渾濁度較穩(wěn)定。但隨著放置時間延長，渾濁度一直在降低。為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，選擇冷凍取出擦拭水霧后10 s內(nèi)測定。

2.3 重復(fù)性試驗(yàn)

在不同時間進(jìn)行3次重復(fù)性試驗(yàn)。每次重復(fù)性試驗(yàn)前用0、50、100、150、200、250 mg/kg的蠟質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液確定標(biāo)準(zhǔn)曲線。在每次重復(fù)性試驗(yàn)中都對同一脫蠟菜籽油和未脫蠟菜籽油進(jìn)行蠟含量的測定。因菜籽油中的蠟含量通常在50 mg/kg以下，因此配制質(zhì)量濃度分別為10、20、30 mg/kg和60 mg/kg的蠟質(zhì)溶液作為加標(biāo)樣，以驗(yàn)證該方法是否適合菜籽油中蠟含量的測定。重復(fù)性試驗(yàn)1得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.021x+0.036，R2=0.996，測定的未脫蠟菜籽油和脫蠟菜籽油的蠟含量分別為30.7、12.7 mg/kg，加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果見表3。重復(fù)性試驗(yàn)2得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.022x+0.974，R2=0.990，測定的未脫蠟菜籽油和脫蠟菜籽油的蠟含量分別為33.9、13.3 mg/kg，加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果見表4。重復(fù)性試驗(yàn)3得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.022x-0.084，R2=0.991，測定的未脫蠟菜籽油和脫蠟菜籽油的蠟含量分別為30.0、13.3 mg/kg，加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果見表5。

表3 加標(biāo)回收試驗(yàn)1

表4 加標(biāo)回收試驗(yàn)2

表5 加標(biāo)回收試驗(yàn)3

從上述3組重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果可知：蠟含量在0～250 mg/kg范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。由表3～表5可知，10、20、30 mg/kg和60 mg/kg的加標(biāo)量的回收率分別為75.0%～89.0%、71.5%～88.5%、83.3%～102.3%和90.0%～103.3%；同時對同一未脫蠟菜籽油和脫蠟菜籽油中的蠟含量測定結(jié)果分別為30.0～33.9 mg/kg和12.7～13.3 mg/kg。證明該方法能較準(zhǔn)確地應(yīng)用于菜籽油中蠟含量測定。

3 結(jié) 論

利用高靈敏度的濁度儀測定菜籽油中蠟含量，建立的方法不但操作簡便、耗時短，且設(shè)備費(fèi)用小、易購置。利用該方法所測得的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好。在3組重復(fù)性試驗(yàn)中，對低蠟含量的加標(biāo)和同一樣品測得結(jié)果接近，結(jié)果較準(zhǔn)確，重現(xiàn)性較好，有利于快速準(zhǔn)確地判斷脫蠟效果。

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Rapiddeterminationmethodofwaxcontentinrapeseedoil

ZOU Yandi，BAO Lilin，XIONG Weilin，JIN Hu，LI Minli， ZHANG Qianyi，WAN Cong

(National R&D Center for Rapeseed Processing, Daodaoquan Grain & Oil Shares Co., Ltd.,Yueyang 414000，Hunan，China )

A rapid determination method of wax content in rapeseed oil was established. According to the crystallization characteristics of wax in ice-water mixing bath, the wax content was determined through measuring the turbidity value by turbidity instrument with high sensitivity. The results showed that a good linear relationship was obtained when the content of wax was in the range of 0-250 mg/kg by the method. The recoveries of the standard addition of 10, 20, 30 mg/kg and 60 mg/kg were 75.0%-89.0%，71.5%-88.5%，83.3%-102.3% and 90.0%-103.3% respectively. The wax contents in rapeseed oils before and after dewaxing were determined and the results were 30.0-33.9 mg/kg and 12.7-13.3 mg/kg respectively. It indicated that the method had the items of accurate result, good reproducibility, simple operation and shorter time consuming, which could be applied to rapidly determine trace wax in rapeseed oil.

rapeseed oil；turbidity instrument；wax；trace

2016-09-26；

：2017-02-09

國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2016YFD0401401)

鄒燕娣(1985)，女，工程師，碩士研究生，主要從事植物油脂工藝研究和檢測技術(shù)研究工作(E-mail)527488691@qq.com。

TS225.1；TQ64

：A

：1003-7969(2017)07-0144-03