趙俊英，趙俊明

(1.隴東學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院，甘肅 慶陽 745000；.山東華宇工學(xué)院，山東 德州 253000)

分析與測試

分光光度法測定番茄中維生素C的含量

趙俊英1，趙俊明2

(1.隴東學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院，甘肅 慶陽 745000；.山東華宇工學(xué)院，山東 德州 253000)

本文采用分光光度法測定番茄中的維生素C含量，此方法原理為：利用維生素C的還原性，將Fe3+轉(zhuǎn)化為Fe2+，F(xiàn)e2+可以與K3[Fe(CN)6]反應(yīng)生成可溶性普魯士藍。通過測定普魯士藍在750 nm處的吸光度間接測定番茄中維生素C的含量。結(jié)果表明三氯化鐵用量為6mL，鐵氰化鉀用量為4mL，反應(yīng)時間為50min，番茄中的維生素C含量為16.64 mg/100 g。

維生素C；分光光度法；番茄

維生素C是所有具有抗壞血酸生物活性的化合物的統(tǒng)稱[1]，在空氣中較穩(wěn)定，但水溶液中易被空氣和其他氧化劑氧化，生成脫氫抗壞血酸；在堿性條件下易分解，見光加速分解；在弱酸條件中較穩(wěn)定[2-3]。維生素C具有廣泛的生理功能，能防止壞血病，關(guān)節(jié)腫，促進外傷愈合，使機體增強抵抗能力。在食品工業(yè)上常用作抗氧化劑、酸味劑及強化劑。因此，測定食品中維生素C的含量以評價食品品質(zhì)及食品加工過程中維生素C的變化情況具有重要的意義。

目前，我國研究維生素C的市場景氣度高，測定維生素C含量的方法主要有碘量法[4]、2,4-二硝基苯肼法[5]、高效液相色譜法[6]、2,6-二氯酚靛酚法[7]、磷鉬酸法[8]、熒光法[9]、紫外可見分光光度法[10]等，它們具有各自的優(yōu)缺點，具體見表1。在具體的實際情況下，依據(jù)不同的實驗條件和要求選擇不同的測定方法。

表1 測定維生素C的方法比較

在食品維生素 C 的定量分析方法中，常規(guī)滴定法方法簡單，但操作費時費力，滴定有色物質(zhì)時終點難以判斷[4]。高效液相色譜法由于選擇性好、測定迅速，與其他檢測技術(shù)聯(lián)用靈敏度較高，是近年來發(fā)展快速的一種方法，但儀器設(shè)備價格高昂，推廣和普及有一定的困難[6]。電化學(xué)法應(yīng)用于維生素 C 的定量檢測是近幾年來研究應(yīng)用最活躍的一個領(lǐng)域，因其所需儀器結(jié)構(gòu)簡單、操作方便、便于攜帶且準(zhǔn)確度高，在現(xiàn)場快速檢測方面具有較好的應(yīng)用前景[11]?；瘜W(xué)發(fā)光法具有儀器簡單、操作方便、靈敏度高等特點。目前在測定維生素 C 含量中也應(yīng)用得較多。光度分析法目前所需的儀器設(shè)備比較成熟，且準(zhǔn)確度較高，因而成為實驗室定量分析維生素 C的主要方法。因此，本文利用維生素C的還原性，將Fe3+轉(zhuǎn)化為Fe2+，F(xiàn)e2+可以與K3[Fe(CN)6]反應(yīng)生成可溶性普魯士藍，采用分光光度法測定普魯士藍在一定波長處的吸光度間接測定番茄中維生素C的含量。

1 實驗部分

1.1 實驗儀器與試劑

紫外可見分光光度計(SPECOPD50型)；電子天平(BS110S)；循環(huán)水式多用真空泵(鞏義市科瑞儀器有限公司)。維生素C(AR，天津市致遠化學(xué)試劑有限公司)；三氯化鐵(AR，天津市百世化工有限公司)；鐵氰化鉀(AR，天津市天泰精細化學(xué)品有限公司)；乙酸(36%，天津市天力試劑有限公司)。

樣品：番茄。

1.2 實驗樣品處理

稱取一定量新鮮、經(jīng)初步處理的番茄肉，加入適量2 %的乙酸，搗碎。用定量濾紙抽濾，進一步用0.45 μm濾膜抽濾直至濾液呈無色透明，以除去色素的影響。

2 結(jié)果與討論

2.1 吸收波長的選擇

準(zhǔn)確移取1.500 mmol/L 三氯化鐵溶液7 mL，放入比色皿中，加入維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品提取液適量，加入1.500 mmol/L鐵氰化鉀溶液4 mL，用2次蒸餾水稀釋至 12.5 mL。室溫放置 50min。參比溶液選擇試劑空白，在500～900 nm范圍內(nèi)，掃描了維生素C與三氯化鐵及鐵氰化鉀反應(yīng)生成可溶性普魯士藍的吸收光譜曲線，如圖1。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)樣品反應(yīng)生成的普魯士藍吸光度與波長的關(guān)系

由圖1可以看出，波長從400 nm開始到750 nm，吸光度一直在增加，而750 nm以后，吸光度開始減小，因此本文選擇750 nm作為檢測波長。

2.2 三氯化鐵用量的選擇

三氯化鐵要把蔬菜中的維生素C氧化完全，故三氯化鐵要過量，而三氯化鐵本身也有一定的吸光度，因此不得無限過量。本文分別測定了三氯化鐵用量從2～9 mL變化的吸光度，得到一系列吸光度的數(shù)值，以三氯化鐵的體積為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，見圖2。

圖2 普魯士藍吸光度與三氯化鐵用量的關(guān)系

從圖2中可以看出，隨著三氯化鐵體積的增加，吸光度先增加后稍有減少，當(dāng)三氯化鐵溶液用量為6 mL時，生成的普魯士藍吸光度達到最大，增加三氯化鐵用量，溶液的吸光度幾乎保持不變，說明三氯化鐵已與維生素C反應(yīng)完全，故本試驗選擇三氯化鐵的用量為6.0 mL。

2.3 鐵氰化鉀用量的選擇

本文改變鐵氰化鉀用量，從 1～5 mL的吸光度，得到一系列吸光度數(shù)值，以鐵氰化鉀用量為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，作圖，見圖3。從圖3可以看出看出，當(dāng)鐵氰化鉀用量為4 mL時，溶液吸光度達到最大，繼續(xù)增加鐵氰化鉀用量，溶液的吸光度幾乎保持不變，說明鐵氰化鉀已經(jīng)與還原生成的Fe2+反應(yīng)完全，故本文選擇鐵氰化鉀的用量為4 mL。

圖3 普魯士藍吸光度與鐵氰化鉀用量的關(guān)系

2.4 反應(yīng)時間的選擇

維生素C易被氧化，與三氯化鐵在常溫下就能反應(yīng)，反應(yīng)生成的Fe2+與鐵氰化鉀生成可溶性普魯士藍的反應(yīng)也在常溫下就能進行，本試驗選擇在常溫下進行反應(yīng)，研究實驗反應(yīng)時間對溶液吸光度的影響，反應(yīng)時間從10min到60min，測得一系列數(shù)據(jù)，以時間為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，見圖4。

圖4 普魯士藍吸光度與反應(yīng)時間的關(guān)系

由圖4可以看出當(dāng)反應(yīng)時間為50min時，溶液吸光度達到最大，續(xù)延長反應(yīng)時間，吸光度幾乎不變，表明反應(yīng)已經(jīng)完全，故本文選擇反應(yīng)時間為50min。

2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線

配制維生素C含量分別為0.4、0.8、1.6、2.4、3.2、4.0、4.8、5.6 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照最優(yōu)試驗方法進行吸光度的測定，并做標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖5。當(dāng)維生素C含量在0.12～5.6 mg/mL之間符合線性關(guān)系。線性回歸方程為D=0.1298C(mg/mL)+0.6164。相關(guān)系數(shù)R=0.9882。

圖5 普魯士藍吸光度與維生素C標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度的關(guān)系

2.6 樣品測定

按樣品處理方法對番茄進行處理，按上述最優(yōu)方法進行測定，并進行了回收率試驗，實驗結(jié)果見表2。

表2 樣品測定結(jié)果

結(jié)果表明100 g番茄中維生素C的含量為16.64 mg，回收率為98.20 %。

3 結(jié)論

本文利用維生素C的還原性將Fe3+還原生成Fe2+，F(xiàn)e2+能與鐵氰化鉀反應(yīng)生成可溶性普魯士藍，采用分光光度法測定該物質(zhì)的吸光度，從而間接測定維生素C的含量。最佳條件為測定波長為750 nm，三氯化鐵的用量為6 mL，鐵氰化鉀的用量為4 mL，反應(yīng)時間為50min。當(dāng)維生素C含量在0.12～5.6 mg/mL之間符合線性關(guān)系。線性回歸方程為D=0.1298C(mg/mL)+0.6164。測得番茄中的維生素C含量為16.64 mg/100 g。本方法具有儀器簡單、靈敏度高、線性范圍較寬、測定速度快等特點。

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(本文文獻格式：趙俊英，趙俊明.分光光度法測定番茄中維生素C的含量[J].山東化工,2017,46(15):93-94,96.)

Determination of Vitamin C in Tomato

ZhaoJunying1,ZhaoJunming2

(1.College of Chemistry and Engineering,Longdong University,Qingyang 745000,China;2.Shandong Huayu University of Technology,Dezhou 253000,China)

In this paper,the content of vitamin C in tomato was determined by spectrophotometry. the principle of this method: the reduction of vitamin C can be trivalent iron into divalent iron,divalent iron and potassium ferricyanide reaction to generate soluble prussian blue. determination of vitamin C content in tomatoes by measuring the absorbance of the blue at 750nm. the results showed that the content of vitamin C in tomato was 16.64 mg/100 g.

vitamin C;spectrophotometry;tomato

2017-05-31

趙俊英(1981—)，女，山東德州人，講師，碩士學(xué)位，主要從事無機分析測試。

O657.3

A

1008-021X(2017)15-0093-02