姚金勇，聶愛(ài)婷，李佳玨，王貴義，龐敬博，聶勝潔

·法醫(yī)學(xué)·

云南漢族、彝族男性人群MAOA-μVNTR基因多態(tài)性

姚金勇1，聶愛(ài)婷2，李佳玨2，王貴義2，龐敬博2，聶勝潔2

目的 探討云南漢族、彝族人群MAOA-μVNTR基因的多態(tài)性。方法 以云南地區(qū)1 022名男性個(gè)體為研究對(duì)象（漢族681例和彝族341例），應(yīng)用熒光標(biāo)記引物結(jié)合毛細(xì)管電泳分型技術(shù)基因分型檢測(cè)。結(jié)果MAOA-μVNTR基因在云南漢族和彝族中均只觀察到基因分型3R和4R，其中云南漢族3R基因頻率為0.548，4R為0.452；云南彝族3R基因頻率為0.478，4R為0.522。云南漢族和彝族人群中的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。云南漢族與中國(guó)北方漢族人群、高加索人群之間分布均有差異（P＜0.012 5），而與日本人群之間分布沒(méi)有差異（P＞0.012 5）；云南彝族與中國(guó)北方漢族人群、高加索人群之間分布均有差異（P＜0.012 5），而與日本人群之間分布沒(méi)有差異（P＞0.012 5）。結(jié)論 云南漢族、彝族人群MAOA-μVNTR基因具有多態(tài)性。

MAOA-μVNTR；基因；多態(tài)性；云南；漢族；彝族

Abstract：Objective To study the genetic polymorphism of MAOA-μVNTR in Chinese Han and Yi Population in Yunnan province. Methods A total of 1022 male subjects were from Yunnan province，including 681 cases of Han and 341 cases of Yi people.All the samples were detected using automatic typing method of fluorescent labeled primers combined with capillary electrophoresis. Results The genotypes had 3R and 4R in Yunnan Han and Yi people，and the allele gene frequency of MAOA-μVNTR gene of 3R were 0.548，and that of 4R were 0.452 in Yunnan Han people.Meanwhile，that of 3R were 0.478，and 4R were 0.522 in Yunnan Yi people.The distributions of genotypes in MAOA-μVNTR locus had significant ethnic differences（P＜0.05）.The MAOA-μVNTR gene and allele distribution in Yunnan Han Population are significantly different from North Chinese Han Population and Caucasian（P＜0.012 5），but it was similar Japanese（P＞0.012 5）.Yunnan Yi Population are significantly different from North Chinese Han Population，Caucasian（P＜0.012 5），but similar to Japanese（P＞0.012 5）. Conclusion MAOA-μVNTR gene show polymorphisms in among Han and Yi population of Yunnan province.

Key words：MAOA-μVNTR；Gene；Polymorphism；Yunnan；Han Population；Yi Population

單胺氧化酶（monoamine oxidase，MAO）全名為單胺氧化還原酶，為含硫氨基的黃素蛋白，是一種位于線粒體外膜及突觸前膜的酶類(lèi)，具有催化單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)降解的作用。根據(jù)底物選擇性和對(duì)抑制劑的靈敏度及在不同物種、不同細(xì)胞、核團(tuán)或器官的分布，將MAO分為 A和 B兩種類(lèi)型［1］。MAO-A主要作用于去甲腎上腺素（norepinephrine，NE）、5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、多 巴 胺 （dopamine，DA）；MAO-B主要作用于苯乙胺。MAOA基因位于染色體的短臂上，Xp11.23～11.4區(qū)域，全長(zhǎng)約 60 kb，由15個(gè)外顯子組成［2］。MAOA基因的起始密碼子上游1.2 kb處一段30 bp的可變數(shù)目重復(fù)序列（variable number tandem repeat，VNTR），即 MAOA-μVNTR多態(tài)性［3］。該重復(fù)序列會(huì)影響MAOA基因的轉(zhuǎn)錄活性［4］。在人群中分別有 2、3、3.5、4和 5次重復(fù)，且重復(fù)序列主要以3次和4次重復(fù)為主，3.5或4個(gè)重復(fù)單位的等位基因?yàn)楦弑磉_(dá)，MAOA酶活性高，2、3或 5個(gè)重復(fù)單位的等位基因?yàn)榈捅磉_(dá)，MAOA活性低［5-6］。本文將探討MAOA基因多態(tài)性在云南漢族、彝族人群中的分布，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 MAOA基因位于X染色體上，為了方便觀察，所有研究對(duì)象均為男性。隨機(jī)選取來(lái)自云南地區(qū)三代內(nèi)無(wú)血緣關(guān)系的男性個(gè)體，其中漢族681例，彝族341例，所有入選者入組前均獲得充分的知情同意，并簽署知情同意書(shū)。

1.2 研究方法

1.2.1 DNA的提取 用 Chelex-100法提取 DNA，在0.2 mL Eppendorf管中加入5%Chelex-100溶液100μL，混勻，37℃水浴過(guò)夜，100℃加熱 10 min，混勻，12 000 r·min-1離心5 min，取上清液進(jìn)行檢測(cè)擴(kuò)增。

1.2.2 PCR擴(kuò)增 ①用 Primer Premier 5.0軟件設(shè)計(jì)引物，確定引物序列并由上海天昊公司合成。PCR引 物：正 向 引 物：5’-ACAGCCTGACCGTGGAGAAG-3′，反 向 引 物：5′-GAACGGACGCTCCATTCGGA-3’。②PCR反應(yīng)體系：總體積10μL，DNA模板 1μL，引物 0.8μL，PCR引物混合物 5μL，ddH2O 3.2μL。③PCR反應(yīng)條件：預(yù)變性 95℃ 5 min，94℃變性 30 s，60℃退火 30 s，72℃延伸 30 s，共30個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5 min。

1.2.3 電泳及基因分型 應(yīng)用3130遺傳分析儀進(jìn)行毛細(xì)管電泳：取甲酰胺與 GS-500LIZ分子量標(biāo)記混合物9 mL，PCR產(chǎn)物1 mL進(jìn)行電泳。用 Gene-Mapper Idv3.2軟件進(jìn)行VNTR分型。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用 SPSS 22.0軟件進(jìn)行資料分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 云南漢族、彝族MAOA-μVNTR基因多態(tài)性MAOA基因位于X染色體上，本研究入組的被試者均為男性，因此沒(méi)有相應(yīng)的等位基因，基因型頻率和等位基因頻率一致，基因多態(tài)性結(jié)果為：云南漢族和彝族兩個(gè)群體的 MAOA-μVNTR基因均只觀察到3R和4R等位基因，其中漢族 MAOA-μVNTR的基因頻率為3R（0.548）、4R（0.452）；彝族 MAOA-μVNTR的基因頻率為 3R（0.478）、4R（0.522）。用 SPSS22.0軟件對(duì)漢族和彝族MAOA-μVNTR的基因型頻率進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，漢族和彝族 MAOA-μVNTR位點(diǎn)的基因型分布在兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 漢族、彝族MAOA-μVNTR多態(tài)性位點(diǎn)分布

2.2 與不同地區(qū)人群基因型比較 云南漢族、彝族人群與中國(guó)北方漢族人群、高加索人群、中國(guó)臺(tái)灣漢族人群及日本人群［7-10］進(jìn)行比較，結(jié)果顯示：中國(guó)北方漢族人群、高加索人群比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.012 5），與日本人群比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.012 5）；云南彝族與中國(guó)北方漢族人群、中國(guó)臺(tái)灣漢族人群、高加索人群比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.012 5），與日本人群比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.012 5）；見(jiàn)表 2。

表2 與不同地區(qū)人群MAOA-μVNTR位點(diǎn)基因型頻率分布

3 討論

MAOA基因在體內(nèi)廣泛表達(dá)，調(diào)節(jié)腦內(nèi)眾多的神經(jīng)遞質(zhì)，如參與5-HT、NE和DA代謝，而這些神經(jīng)遞質(zhì)與暴力攻擊行為有關(guān)［11］。研究表明，個(gè)體的MAOA的合成減少，影響單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的代謝分解，造成體內(nèi)5-HT、NE和DA等濃度升高，個(gè)體對(duì)緊張的反應(yīng)增強(qiáng)，表現(xiàn)為沖動(dòng)、攻擊等暴力行為［12-13］。郭建雄等［9］研究認(rèn)為MAOA基因可能與攻擊行為有關(guān)［14］。Stetler等的研究也表明MAOA基因是暴力犯罪的重要遺傳因素［15］。

本文對(duì)云南漢族、彝族人群血樣進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)MAOA-μVNTR的基因分型以3R和4R的等位基因?yàn)橹?，未觀察到 2R、3.5R和 5R。MAOA-μVNTR的基因型分布在這兩個(gè)群體之間分布具有顯著差異（P＜0.05），這可能與二者的遺傳背景不同有關(guān)。與其他地區(qū)的人群進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)云南漢族、云南彝族與中國(guó)北方漢族人群、高加索人群之間均有差異（P＜0.012 5）。與中國(guó)北方漢族人群的差異可能是由于二者有著相對(duì)獨(dú)立的遺傳背景和文化差異。與高加索人群的差異可能與人種不同有關(guān)。彝族人群與中國(guó)臺(tái)灣漢族人群之間有差異（P＜0.012 5），可能是由于遺傳背景不同所致。云南漢族人群與中國(guó)臺(tái)灣漢族人群之間沒(méi)有差異（P＞0.012 5），可能是由于二者同為漢族，有著相同的遺傳背景。云南漢族、彝族人群與日本人群之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.012 5），可能是在遺傳分類(lèi)上同屬東亞人群，變異較保守的緣故［16-17］。這些仍需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量研究以證實(shí)。

云南漢族、彝族人群 MAOA-μVNTR基因存在一定的種族和地區(qū)差異，研究MAOA-μVNTR基因多態(tài)性的分布情況，有助于從基因水平了解某些疾病和行為特征在不同種族、不同地區(qū)間存在的不同遺傳背景差異。

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Genetic Polymorphism of MAOA-μVNTR in Chinese Han and Yi Population in Yunnan Province

YAO Jin-yong2，NIE Ai-ting1，LI Jia-jue1，WANG Gui-yi1，PANG Jing-bo1，NIE Sheng-jie1
（1.Honghe Public Security Bureau，Honghe 661100，China；2.Kunming Medical University，Kunming 650500，China）

R394.5

A

1672-688X（2017）03-0219-03

10.15926／j.cnki.issn1672-688x.2017.03.017

1.國(guó)家自然科學(xué)基金（31660310）

2.云南省教育廳科學(xué)研究基金（2015J052）

2017-06-22

1.云南省紅河州公安局刑偵支隊(duì)，云南紅河661100

2.昆明醫(yī)科大學(xué)，云南昆明650500

姚金勇（1972—），男，云南文山人，副主任法醫(yī)師，從事法醫(yī)物證DNA檢驗(yàn)工作。

聶勝潔，女，博士，教授，E-mail：879456764＠qq.com