文/陳超然 孟長明 陳昌福

用藥指導(dǎo)

用穩(wěn)定性粉狀二氧化氯防治魚類水霉病的實(shí)驗(yàn)研究

文/陳超然1孟長明2陳昌福1

二氧化氯（ClO2）是對病毒、細(xì)菌、真菌等各種微生物具有極強(qiáng)殺滅能力的鹵素類制劑。與其他鹵素類制劑相比，ClO2不僅對各種微生物的殺滅力更強(qiáng)，而且通過氧化分解完成其殺滅微生物過程后的生成物是水、氯化鈉、微量CO2和有機(jī)物，無有害殘留物和致癌物質(zhì)。所以，自從ClO2問世以來，已經(jīng)被廣泛地用于醫(yī)療衛(wèi)生防疫、食品加工業(yè)、油井解堵和畜、禽活動場所等的消毒。

魚類的水霉病(Saprolegnisis)是由多種水生真菌引起的一種常見繼發(fā)性疾病。過去用于防治該病的主要藥物是孔雀石綠和甲醛等。然而，已經(jīng)有研究結(jié)果表明，孔雀石綠和甲醛對動物的細(xì)胞均具有致畸變作用。因此，尋求既安全又能有效地防治水產(chǎn)動物水霉病的藥物，是一個(gè)具有現(xiàn)實(shí)意義的課題。盧次勇等（2000）的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，ClO2對須發(fā)癬菌和紅色毛癬菌等皮膚真菌有很好的殺滅效果。為了證實(shí)ClO2是否對由水生真菌引起的魚類真菌病具有防治效果，特進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)。

一、材料與方法

1.供試藥物及其原液的配制

用于本實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性粉狀ClO2由河南省新鄉(xiāng)市康大消毒劑有限公司生產(chǎn)。生產(chǎn)批號為001208，含量為6.6%。臨用前打開包裝袋并準(zhǔn)確稱取10.0g穩(wěn)定性粉狀ClO2溶解于100.0 mL蒸餾水中，搖勻，即為穩(wěn)定性ClO2的供試原液。

2.供試魚及其處理

本實(shí)驗(yàn)的供試魚為取自華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)站飼養(yǎng)池的鯽（Carassius auratus）魚種和泥鰍（Misgurnus a n g u i l l i c a n d a t u s），在每個(gè)86cm×53cm×50cm的塑料水族箱中盛裝30.0L經(jīng)充分嚗氣去氯后的自來水，于每個(gè)水族箱內(nèi)放養(yǎng)10尾鯽或者20尾泥鰍。馴養(yǎng)7天后，逐尾檢查供試魚，淘汰活動異常和有外傷的魚體，將活動正常而無外傷鯽的尾柄兩側(cè)用解剖刀刮去部分鱗片和用紗布擦拭泥鰍尾部數(shù)次，即人為制造創(chuàng)傷后，放回水族箱中充氣飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)期間不投喂餌料，控制水溫（20±1）℃。

3.水霉菌來源及人工感染的方式

從華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)站飼養(yǎng)池中收集1 0尾寄生有大量多子水霉（Saprolegnia ferax）的鰱（Hypophthalmichthys molitrix），置于盛有20.0L養(yǎng)殖池水的塑料水族箱中，待其死亡后繼續(xù)放置2天，以使水霉菌進(jìn)一步生長。用解剖刀刮下體表的外菌絲并切下水霉菌寄生處的部分肌肉，磨碎后連同刮下的水霉菌絲一起倒回盛有養(yǎng)殖池水的水族箱中，作為人工感染用的水霉菌液。向上述每個(gè)飼養(yǎng)有供試魚的水族箱中加入4.0L水霉菌液，對供試魚進(jìn)行水霉病的人工感染。

4.用藥量及用藥程序

對不同的水族箱，分別于加入水霉菌液后的0h，24h和48h時(shí)，定量加入穩(wěn)定性ClO2原液，使飼養(yǎng)水中穩(wěn)定性ClO2的終濃度分別達(dá)到20mg/L,30mg/L，40mg/L和50mg/L。攪動水體，使藥液均勻地分布在水中。另外設(shè)置不添加藥液的水族箱作對照組。

5.防治效果的判定

在人工感染水霉菌結(jié)束后14天內(nèi)，每天觀察記錄水族箱中魚體的活動和創(chuàng)傷部位的水霉菌的著生狀況。根據(jù)供試魚體上水霉菌絲的寄生狀況，并結(jié)合供試魚的死亡數(shù)量，判斷穩(wěn)定性ClO2防治魚類水霉病的效果。

二、結(jié)果

1.對鯽人工感染水霉菌后穩(wěn)定性ClO2的防治效果

以不同的用藥量和用藥程序施用穩(wěn)定性ClO2時(shí)，在14天的實(shí)驗(yàn)觀察期內(nèi)，實(shí)驗(yàn)和對照供試鯽體表水霉菌的著生狀況和死魚數(shù)量如表1所示。由表1可以看出，在供試魚接觸水霉菌之前就用藥的實(shí)驗(yàn)組感染率和死亡率均比較低，而當(dāng)魚體接觸水霉菌24h和48h后再用藥時(shí)，其感染率和死亡率均有明顯上升。

2.對泥鰍人工感染水霉菌后穩(wěn)定性ClO2的防治效果

以泥鰍作實(shí)驗(yàn)魚的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。由表2可以看出，以不同的用藥量和用藥程序施用穩(wěn)定性ClO2時(shí)，在14天的實(shí)驗(yàn)觀察期內(nèi)，實(shí)驗(yàn)和對照組供試泥鰍的感染率和死亡率趨勢與用鯽進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本相同。即供試魚未接觸水霉菌之前的用藥組，穩(wěn)定性ClO2對魚類水霉病的防治效果最好，隨著感染時(shí)間的延長，防治效果雖然有下降的趨勢。但是，與對照組相比，仍然顯示出了明顯的防治效果。

表1.穩(wěn)定性ClO2對人工感染水霉菌在鯽體表著生的防治效果

表2.穩(wěn)定性ClO2對人工感染水霉菌在泥鰍體表著生的防治效果

水霉病

三、討論

1.穩(wěn)定性ClO2對魚類水霉病的預(yù)防效果

向水族箱中加入水霉菌液后，立即添加穩(wěn)定性ClO2藥液的試驗(yàn)組（即0h試驗(yàn)組），由于水霉菌的孢子尚未萌發(fā)菌絲而寄生在供試魚體上，因此，可視為穩(wěn)定性ClO2對水霉病的預(yù)防效果。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，表明穩(wěn)定性ClO2對水霉菌的孢子有較好的殺滅作用，將其用于養(yǎng)殖水體消毒，可以有效地降低受傷魚體感染水霉菌的比例和減少因水霉菌的寄生而引起的死亡數(shù)量。但是，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果也同時(shí)表明了在供試鯽和泥鰍中，還是有一部分魚體感染了水霉甚至出現(xiàn)了死亡，這是否因?yàn)樘幱诓煌劝l(fā)階段的水霉菌孢子對穩(wěn)定性ClO2存在不同的感受性或者是本實(shí)驗(yàn)中使用的藥物濃度偏低的緣故，尚有待進(jìn)一步研究。

2.穩(wěn)定性ClO2對魚類水霉病的治療效果

使供試魚與水霉菌液接觸48h和96h后，再添加穩(wěn)定性ClO2藥液的試驗(yàn)組（即48h和96h試驗(yàn)組），因?yàn)樵谟盟幥八咕咦佑锌赡芤呀?jīng)寄生到魚體受傷部位，因此，可視為穩(wěn)定性ClO2對水霉病的治療效果。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，已經(jīng)初步證明了穩(wěn)定性ClO2對魚類的水霉病有一定的治療作用。對感染水霉菌24h后用藥的治療效果優(yōu)于48h后用藥的實(shí)驗(yàn)組，這一實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明采用穩(wěn)定性ClO2治療魚類早期的水霉病是可行的。

本實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證明了穩(wěn)定性ClO2對水體中和寄生在魚體上的水霉菌孢子和菌絲有殺滅作用，而關(guān)于最佳用藥濃度與程序以及穩(wěn)定性ClO2殺滅水霉菌的機(jī)理等，則需要深入研究。

四、結(jié)論

孔雀石綠作為一種化工常用原料、試劑，現(xiàn)在不可能禁止其生產(chǎn)。因?yàn)槠鋬r(jià)格低廉、對某些水產(chǎn)病害如水霉病等的確具有特效的特點(diǎn)，現(xiàn)實(shí)中尚有少數(shù)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者在使用這種藥物。但是，孔雀石綠潛在的毒副作用是不容忽視的，管理部門除加大宣傳力度、加強(qiáng)監(jiān)管、建議養(yǎng)殖從業(yè)者自覺使用較為安全的漁場殺蟲和殺菌劑外，還需要鼓勵(lì)漁藥生產(chǎn)企業(yè)盡快研究出替代孔雀石綠的藥物。

根據(jù)我們采用穩(wěn)定性二氧化氯做的試驗(yàn)，預(yù)防水霉病具有比較好的效果，而治療疾病尚有一定的困難。

作者單位：1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)教育部農(nóng)業(yè)微生物重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室2.河南省新鄉(xiāng)市康大消毒劑有限公司