姚素花，麥李明，石俊婷

百令膠囊對(duì)尿毒癥腹膜透析患者腹透液中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1、纖維連接蛋白表達(dá)的影響

姚素花，麥李明，石俊婷

目的研究百令膠囊對(duì)尿毒癥腹膜透析患者腹透液中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)、纖維連接蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)水平的影響。方法 將腹膜透析患者60例隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組(各30例)，均應(yīng)用1.5%腹膜透析液、6 000 mL/d，試驗(yàn)組加用百令膠囊5粒、3/d、口服，觀察1、3、6個(gè)月后2組腹透液中TGF-β1、FN水平的變化。結(jié)果 對(duì)照組TGF-β1、FN水平隨透析時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高；試驗(yàn)組TGF-β1、FN水平無(wú)明顯變化，與對(duì)照組比較明顯降低(P＜0.05)。結(jié)論 百令膠囊可以降低腹透液中TGF-β1、FN水平，能起到抑制腹膜纖維化的作用。

百令膠囊；腹膜透析；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1；纖維連接蛋白；腹膜纖維化

腹膜透析是目前終末期腎臟病患者較為有效、經(jīng)濟(jì)的替代療法之一，而腹膜纖維化是導(dǎo)致腹膜透析患者技術(shù)存活率偏低的主要原因[1]。其中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)過(guò)度表達(dá)、纖維連接蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)的表達(dá)增多都是導(dǎo)致腹膜纖維化的可能機(jī)制。研究表明，冬蟲夏草可通過(guò)抑制纖維細(xì)胞的增殖，減少細(xì)胞基質(zhì)合成作用，延緩纖維化的發(fā)生，具有良好的抗纖維化作用[2]。百令膠囊為人工冬蟲夏草，是由蝙蝠蛾多毛孢真菌經(jīng)深層液體培養(yǎng)而成的發(fā)酵蟲草菌絲體制劑，含蟲草酸、蟲草素、蟲草多糖及多種維生素、微量元素、19種氨基酸多種化合物，作用效果與天然蟲草類似[3]。作者以規(guī)律腹膜透析患者中TGF-β1及FN作為腹膜纖維化的標(biāo)志，探討百令膠囊在腹膜纖維化中的防治作用及可能機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2014年1月—2015年6月在中國(guó)石油天然氣集團(tuán)公司中心醫(yī)院新行腹膜透析患者60例，年齡29～78歲。入選標(biāo)準(zhǔn):①符合尿毒癥診斷標(biāo)準(zhǔn)[內(nèi)生肌酐清除率(endogenous creatinine clearancerate，Ccr)＜15 mL/min]，并行規(guī)律腹膜透析(1.5%腹膜透析液2 000 mL、3/d)；②之前未服用過(guò)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑和(或)血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑類降壓藥物。入選者隨機(jī)分成試驗(yàn)組和對(duì)照組(各30例)，均是應(yīng)用1.5%腹膜透析液，6 000 mL/d[廣州百特醫(yī)療用品有限公司、規(guī)格1.5%葡萄糖(含乳酸鹽)每袋2 000 mL、批號(hào)G1038055]，其中試驗(yàn)組加用蟲草制劑(百令膠囊)5粒、3/d、餐后口服(杭州中美華東制藥有限公司、規(guī)格每粒0.5 g、批號(hào)140111)，對(duì)照組未服用任何蟲草制劑。退出標(biāo)準(zhǔn):①并發(fā)腹膜透析腹膜炎；②加用血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑和(或)血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑類降壓藥物。觀察過(guò)程中共退出研究8例，其中試驗(yàn)組5例、對(duì)照組3例。對(duì)照組共納入27例，男性11例、女性 16例，年齡(60.19±11.77)歲，血肌酐(786.42±146.54)μmol/L。 試驗(yàn)組納入25例，男性11例、女性 14例，年齡(61.96±9.44)歲，血肌酐(777.26±161.25)μmol/L。2組一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，透析1個(gè)月后檢測(cè)透析充分性均提示透析充分(表1)，具有可比性。

表1 透析1個(gè)月時(shí)2組透析充分性

1.2 方法 研究對(duì)象均在腹膜透析1個(gè)月時(shí)取24 h腹透液、24 h尿量測(cè)定透析充分性。于入選時(shí)及腹膜透析1、3、6個(gè)月后取腹透液樣本置－20℃冰箱內(nèi)凍存待測(cè)，統(tǒng)一用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定方法檢測(cè)腹透液中 TGF-β1、FN 水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 17.0軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率來(lái)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；TGF-β1與FN之間的關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TGF-β1、FN 水平 透析 1、3、6 個(gè)月后，對(duì)照組腹透液中TGF-β1、FN水平均逐漸升高，而試驗(yàn)組TGF-β1、FN水平無(wú)明顯變化，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，表 2)。

2.2 FN與TGF-β1相關(guān)性 患者FN與TGF-β1呈正相關(guān)(r＝0.499，P＜0.05)。

表 2 TGF-β1、FN 水平(ng/mL)

3 討論

腹膜透析因其操作簡(jiǎn)單、對(duì)血流動(dòng)力學(xué)影響小、有效保護(hù)殘余腎功能等優(yōu)點(diǎn)，是目前終末期患者長(zhǎng)期腎臟替代治療的主要方法之一[4]；而腹膜纖維化是導(dǎo)致腹膜功能喪失的主要原因之一[5]。目前，國(guó)內(nèi)的腹膜透析液因其生物不相容性，長(zhǎng)期應(yīng)用可導(dǎo)致腹膜間皮細(xì)胞受損后分泌大量的致纖維化因子，是腹膜纖維化的誘因[6]。因此，如何減少致纖維化因子表達(dá)，延緩腹膜纖維化極為重要。本研究主要通過(guò)觀察百令膠囊對(duì)長(zhǎng)期規(guī)律腹膜透析患者腹透液中TGF-β1、FN的表達(dá)變化，從而了解其對(duì)腹膜纖維化的防治作用。

本研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期應(yīng)用非生理性腹膜透析液可使腹透液的TGF-β1、FN表達(dá)水平升高，且FN與TGF-β1呈正相關(guān)。長(zhǎng)期應(yīng)用非生理性腹膜透析液可增加腹膜細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrixc，ECM)中的TGF-β1表達(dá)水平，刺激ECM成分FN合成增加，減少降解，并產(chǎn)生大量纖維溶解抑制因子，使得纖維素在腹膜大量沉積，最終導(dǎo)致腹膜纖維化[7-11]。

冬蟲夏草是我國(guó)名貴的中藥，含有蟲草素及其衍生物、蟲草酸、多糖、核苷等多種化合物，其中蟲草多糖約占菌絲體總量的3%～5%，是含量最高的藥理活性物質(zhì)，具有廣泛的生理生化性質(zhì)，其主要藥理作用表現(xiàn)為抑制成纖維細(xì)胞的增殖生長(zhǎng)及合成ECM，具有多種藥效，其中對(duì)肝、肺、腎等器官的抗纖維化作用尤為明顯，近年來(lái)被廣泛研究[12-14]。然而，目前國(guó)內(nèi)僅有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究其對(duì)腹膜透析中抗腹膜纖維化的作用[15]。本研究發(fā)現(xiàn)對(duì)長(zhǎng)期腹膜透析患者應(yīng)用百令膠囊干預(yù)1、3、6個(gè)月時(shí)，其腹透液中TGF-β1、FN表達(dá)水平均無(wú)明顯升高，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示百令膠囊具有抑制腹膜纖維化形成的作用。

冬蟲夏草抗纖維化的作用機(jī)制尚不明確。有研究報(bào)道，冬蟲夏草抗肝纖維化可能與抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)、減少細(xì)胞因子及生長(zhǎng)因子表達(dá)有關(guān)[12]。通過(guò)抑制TGF-β1表達(dá)，調(diào)整Ⅰ型/Ⅱ型細(xì)胞因子平衡起到抗肺纖維化作用[13]。抑制TGF-β1表達(dá)，減少細(xì)胞增殖及ECM聚集，減輕炎癥反應(yīng)可能是其發(fā)揮抗腎間質(zhì)纖維化的重要機(jī)制[14]。而其抗腹膜纖維化研究鮮見報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，抗腹膜纖維化可能與百令膠囊下調(diào)腹膜透析患者中TGF-β1表達(dá)、抑制FN合成、減少ECM的沉積有關(guān)。

本研究通過(guò)應(yīng)用百令膠囊對(duì)長(zhǎng)期腹膜透析患者的干預(yù)降低腹透液中TGF-β1的表達(dá)水平、抑制FN合成、減少ECM的沉積，改善腹膜組織中毛細(xì)血管的形成和腹膜滲透性，從而起到抑制腹膜纖維化的作用。目前，臨床上對(duì)尿毒癥已無(wú)殘余腎功能的患者，應(yīng)用蟲草制劑保腎意義不大；但通過(guò)本研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)于規(guī)律腹膜透析患者繼續(xù)應(yīng)用蟲草制劑可延緩腹膜纖維化進(jìn)展，為臨床治療提供一定的參考。但本研究樣本量較少，觀察時(shí)間相對(duì)較短，后續(xù)研究需增加樣本量，延長(zhǎng)觀察時(shí)間，有待更為廣泛、全面的研究予以證實(shí)。

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The influence of Bailing capsule on the expression of transforming growth factor-β1 and fibronectin in the peritoneal dialysissolution in uremia peritoneal dialysis patients

YAO Suhua， MAI Liming， SHI Junting
(Department of Nephrology， China National Petroleum Corporation Central Hospital，Langfang Hebei 065000，China)

ObjectiveTo investigate the influence of Bailing capsule on the expression of transforming growth factor-β1(TGF-β1)and fibronectin(FN)in peritoneal dialysis solution in uremia peritoneal dialysis patients.Methods Sixty patients treated with peritoneal dialysis were divided into two groups randomly(30 cases in control group and 30 cases in experimental group)，all patients were treated with peritoneal dialysis by 1.5%peritoneal dialysis solution(6 000 mL everyday)， and patients in experimental group taken five Bailing capsules each time， three times a day.We observed the changes of the expression of TGF-β1 and FN in the peritoneal dialysis solution in 1， 3 and 6 months.Results The expression of TGF-β1， FN in peritoneal dialysis solution in control group increased gradually as dialysis time went on.In experimental group，the expression of TGF-β1， FN in peritoneal dialysis solution was no obvious changes， but lower than control group(P＜0.05).Conclusion Bailing capsule can decrease the expression of TGF-β1， FN in the peritoneal dialysis solution，and may inhibit peritoneal fibrosis.

Bailing capsule； Peritoneal dialysis； Transforming growth factor-β1(TGF-β1)；Fibronectin(FN)；Peritoneal fibrosis

R692.5

B

2095-3097(2017)05-0266-03

10.3969/j.issn.2095-3097.2017.05.003

河北省廊坊市科技支撐項(xiàng)目(2014013005)

065000河北廊坊，中國(guó)石油天然氣集團(tuán)公司中心醫(yī)院腎內(nèi)科(姚素花，麥李明，石俊婷)

2017-03-21 本文編輯:張?jiān)谖?