楊 洋，季昌華，楊京彥，王海濤，于 潔，潘成然，周成軍

邁新·技術(shù)交流

連續(xù)超長(zhǎng)切片在胃腸活檢病理標(biāo)本制片中的應(yīng)用

楊 洋，季昌華，楊京彥，王海濤，于 潔，潘成然，周成軍

病理技術(shù)；連續(xù)超長(zhǎng)切片；小標(biāo)本制片

胃腸鏡檢查是目前發(fā)現(xiàn)胃腸道腫瘤及癌前病變最簡(jiǎn)便、最安全、最有效的方法，胃腸活檢病理是診斷該類疾病的金標(biāo)準(zhǔn)。工作中，活體胃腸活檢標(biāo)本較小，在石蠟包埋中，一般采用6～8張切面鋪片僅有限覆蓋病變，造成小標(biāo)本診斷信息丟失，影響診斷醫(yī)師準(zhǔn)確而全面的病理診斷；為呈現(xiàn)最大限度覆蓋病變，避免造成小標(biāo)本表淺病變?cè)\斷信息丟失。胃腸活檢病理采用三段連續(xù)超長(zhǎng)切片，行全切片鋪片，最大限度覆蓋病變，避免造成小標(biāo)本診斷信息丟失?，F(xiàn)將具體方法總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本外檢胃、腸鏡下活檢病理標(biāo)本(總體積大小0.4 cm×0.3 cm×0.3 cm)。

1.2方法(1)修刮蠟塊：將包埋好的蠟塊脫水盒邊緣多于蠟邊修掉；利用美工刀沿組織周圍2 mm外石蠟四面邊緣90°垂直修邊，蠟塊待切面呈矩形(各個(gè)邊長(zhǎng)不小于3 mm)，修邊深度超過(guò)組織厚度即可。(2)第1次修片切片(圖1)：緩緩修切蠟塊，去除表面多余石蠟暴露組織即停，取下蠟塊放入冰水中水化5 min后，連續(xù)切片7～9片(根據(jù)組織大小為一排數(shù)量)，40 ℃溫水漂片，待組織展平后，左手持載玻片磨砂面，磨砂邊略高于載玻片底端，略豎直放入溫水中待撈片位置即可(不可全部浸入水中)，撈片從磨砂面向載玻片底端撈取組織并依次緩緩上提離開溫水，將組織撈入載玻片上側(cè)緣處。(3)第2次修片切片：將組織大部分修出，同“第1次修片切片”步驟，切第2排組織撈入載玻片長(zhǎng)軸中間位置(圖2)。(4)第3次修片切片：此時(shí)應(yīng)將所有組織最大面修出，同“第1次修片切片”步驟，即最大面切一排，撈入載玻片長(zhǎng)軸下側(cè)緣。(5)晾凈拷片染色：待載玻片水分晾干后移至拷片儀，65 ℃烤15 min后待組織和載玻片充分黏牢后行常規(guī)HE染色。

①②圖1 第1次修片后切片 圖2 第2次修片后撈片

2 結(jié)果

規(guī)范化取材、脫水、浸蠟、包埋、制片后，活體胃腸鏡夾取下的標(biāo)本較小，一般采用6～8張切面鋪片僅有限覆蓋病變；應(yīng)用連續(xù)超長(zhǎng)切片，行全切片鋪片(圖3、4)，最大限度覆蓋病變，避免造成小標(biāo)本診斷信息丟失。同時(shí)，有的部位會(huì)夾取多塊組織，每個(gè)蠟塊放≤4塊組織，包埋后的組織利于在同一平面上，便于連續(xù)長(zhǎng)切片、行全切片鋪片。

③④圖3 三段連續(xù)超長(zhǎng)切片法所制切片 圖4 三段連續(xù)超長(zhǎng)切片法數(shù)字切片

3 討論

胃腸鏡檢查的診斷依賴于病理診斷。胃腸鏡活檢取材組織較小，用擦鏡紙包裹組織放入脫水盒內(nèi)，在側(cè)壁標(biāo)注放入的塊數(shù)，防止標(biāo)本丟失遺落；同一標(biāo)本若夾取多塊組織，每個(gè)脫水盒放≤4塊組織，包埋時(shí)所有組織包于同一平面便于制出3段連續(xù)超長(zhǎng)切片。

取材時(shí)使用裁剪合適的擦鏡紙包裹待檢組織，防止組織遺失。單獨(dú)脫水機(jī)處理程序時(shí)，可在第1缸95%乙醇中加入1/100體積的1%醇溶性伊紅溶液，以使組織著色便于識(shí)別組織利于后續(xù)包埋、切片；若為各種組織混合脫水時(shí)在取材時(shí)用1%水溶性伊紅將組織染色[1]。

胃腸鏡活檢若夾取到黏膜肌層，夾取下的組織因黏膜肌經(jīng)固定液收縮呈“馬蹄形”或“U形”，該類標(biāo)本包埋面應(yīng)按“馬蹄形”或“U形”立埋；若為菲薄組織應(yīng)按薄面立埋[2]。以便呈現(xiàn)組織全層結(jié)構(gòu)，利于診斷醫(yī)師做出準(zhǔn)確全面的病理診斷。

蠟塊修邊時(shí)，應(yīng)把脫水盒邊緣石蠟用美工刀掛掉。組織四周2 mm外的石蠟用美工刀沿表面垂直按壓，修出“矩形”，深度為組織厚度即可，太深時(shí)易造成組織太“凸”、與脫水盒粘連牢實(shí)度不足，過(guò)淺會(huì)造成切片逐步增大，增加制片難度。“矩形”便于連續(xù)切片，在漂片時(shí)連續(xù)成排便于3次切片即可完成該法制片，制片效率高。

載玻片進(jìn)水過(guò)深，造成帶水過(guò)多，導(dǎo)致組織移位，增加后續(xù)撈片難度。撈片完畢后，放于漂片儀前端豎直瀝干載玻片與組織間多于水分，已減少因拷片時(shí)水的張力導(dǎo)致組織位移變形，組織形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，影響組織正確診斷。

運(yùn)用連續(xù)超長(zhǎng)切片，行全切片鋪片，在胃腸等活檢病理中最大限度覆蓋病變，避免造成小標(biāo)本表淺診斷信息丟失。

[1] 王德田, 董建強(qiáng). 實(shí)用現(xiàn)代病理學(xué)技術(shù)[M]. 北京: 中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社, 2012:244-245.

[2] 丁 偉, 王德田. 簡(jiǎn)明病理學(xué)技術(shù)[M]. 杭州: 浙江科學(xué)技術(shù)出版社, 2014:16-18.

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接受日期：2017-04-16

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