許孟軍

（江蘇省鹽城市婦幼保健院 江蘇 鹽城 224001）

淺論臨床上不同來源的金黃色葡萄球菌的耐消毒劑抗力及耐消毒劑基因

許孟軍

（江蘇省鹽城市婦幼保健院 江蘇 鹽城 224001）

目的：探討臨床上不同來源的金黃色葡萄球菌的耐消毒劑抗力及耐消毒劑基因。方法：采集我院醫(yī)護人員、患者、醫(yī)用物品表面的金黃色葡萄球菌共204株，其中有耐甲氧西林金黃色葡萄球菌46株。將這204株金黃色葡萄球菌隨機分成A、B兩組，每組各有102株金黃色葡萄球菌。我們對這兩組金黃色葡萄菌的耐消毒劑抗力進行檢測，并對204株金黃色葡萄球菌和46株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的耐消毒劑基因進行檢測，然后對檢測的結(jié)果進行觀察和分析。結(jié)果：（1） A組金黃色葡萄球菌在濃度為20%的含氯消毒液中的存活率為61.76%（63/102），B組金黃色葡萄球菌在濃度為30%的含氯消毒液中的存活率為32.35%（33/102）。兩組金黃色葡萄球菌在不同濃度消毒劑中的存活率相比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（2）在這204株金黃色葡萄球菌中，耐消毒劑qacA基因的檢出率為10.08%，耐消毒劑PVL基因的檢出率為20.35%。其中，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐消毒劑qacA基因的檢出率為34.69%，耐消毒劑PVL基因的檢出率為45.28%。結(jié)論：醫(yī)護人員、患者、醫(yī)用物品表面的金黃色葡萄球菌均存在一定程度的耐消毒劑抗力，且耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐消毒劑qacA基因與耐消毒劑PVL基因的檢出率較高。因此，醫(yī)院應嚴格執(zhí)行院內(nèi)感染的控制制度，做好醫(yī)院的消毒工作，適當?shù)靥岣呦疽旱臐舛?，以降低院?nèi)感染的發(fā)生率。

不同來源；金黃色葡萄球菌；耐消毒劑抗力；耐消毒劑基因

金黃色葡萄球菌是人類化膿感染中最常見的病原菌，屬于葡萄球菌屬，它可引發(fā)多種嚴重的感染，有“嗜肉菌”的別稱。金黃色葡萄球菌可引起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎、敗血癥、膿毒癥等嚴重的感染性疾病。有研究指出，金黃色葡萄球菌致病力的強弱主要取決于其自身產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌是金黃色葡萄球菌中的一種，臨床研究表明，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌是引發(fā)院內(nèi)感染的主要病原菌。金黃色葡萄球菌對消毒劑耐藥基因的命名來源于其對季胺類化合物（quaternary ammonium compounds，qac）的耐藥性，其耐藥基因的編碼主要為qacA、qacB和qacC。為了研究臨床上不同來源的金黃色葡萄球菌的耐消毒劑抗力及耐消毒劑基因，本研究采集了我院不同來源的金黃色葡萄球菌204株，對其進行耐消毒劑抗力和耐消毒劑基因檢測?，F(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 菌種來源 采集我院醫(yī)護人員、患者、醫(yī)用物品表面的金黃色葡萄球菌共204株，其中有耐甲氧西林金黃色葡萄球菌46株。這204株金黃色葡萄球菌主要來自于患者的痰液、血液、膿液、胸腹水、分泌物以及醫(yī)護人員的手、鼻腔和醫(yī)用物品的表面。我們將這204株金黃色葡萄球菌隨機分成A、B兩組，每組各有102株金黃色葡萄球菌。

1.2 方法

1.2.1 進行菌種鑒定 將采集到的204株金黃色葡萄球菌進行分離培養(yǎng)，并用ATB全自動細菌分析儀對其進行菌種鑒定。

1.2.2 進行耐消毒劑抗力檢測的方法 取兩支試管，將這兩支試管分別標記為A試管和B試管。取A組金黃色葡萄球菌培養(yǎng)液1mL注入A試管中，并在其中注入濃度為20%的含氯消毒液。取B組金黃色葡萄球菌培養(yǎng)液1mL注入B試管中，并在其中注入濃度為30%的含氯消毒液。將A試管和B試管中的液體搖勻后置于37℃的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，培養(yǎng)的時間為48h。48h后，分別取A試管和B試管中的上層菌液0.5ml進行檢測，計算出兩組金黃色葡萄球菌的存活率。

1.2.3 進行耐消毒劑基因檢測的方法 采用無錫克隆遺傳技術(shù)研究所生產(chǎn)的試劑對這204株金黃色葡萄球菌與其中的46株耐甲氧西林金黃色葡萄球的耐消毒劑基因進行檢測，其中靶基因的引物序列為：qacA 基 因：P1:5—AAAATCGATGGTAAAGGTTGGC—3；P 2:5—A G T T C T G C A G T C C G G A T T T G C—3；PVL基 因：P1:GTGCCAGACAATGAATTACCC；P2:TTCATGAGTTTTCCAGTTCACTTC。反應條件為：在93℃的條件下反應2min。再于93℃的條件下反應20s，于55℃的條件下反應30s，于72℃的條件下反應60s，這樣持續(xù)循環(huán)35個周期。然后再于72℃的條件下反應 5min?？偡磻捏w積為50μl。

1.3 觀察指標 （1）比較兩組金黃色葡萄球菌在不同濃度消毒液中的存活率。（2）計算204株金黃色葡萄球菌與46株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐消毒劑qacA基因和耐消毒劑PVL基因的檢出率。

1.4 統(tǒng)計學方法 用SPSS20.0軟件對本研究中的所有數(shù)據(jù)進行處理，計量資料采用均數(shù)±標準差（±s）表示，用t檢驗，計數(shù)資料采用（%）表示，用χ2檢驗。P＜0.05時，表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組金黃色葡萄球菌在不同濃度的消毒液中存活率的比較 A組金黃色葡萄球菌在濃度為20%的含氯消毒液中的存活率為61.76%（63/102），B組金黃色葡萄球菌在濃度為30%的含氯消毒液中的存活率為32.35%（33/102）。兩組金黃色葡萄球菌在不同濃度消毒劑中的存活率相比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1 兩組金黃色葡萄球菌在不同濃度的消毒液中存活率的比較[ n（%）]

2.2 204株金黃色葡萄球菌與46株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐消毒劑qacA基因和耐消毒劑PVL基因的檢出率 在204株金黃色葡萄球菌中，耐消毒劑qacA基因的檢出率為10.08%，耐消毒劑PVL基因的檢出率為20.35%。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐消毒劑qacA基因的檢出率為34.69%，耐消毒劑PVL基因的檢出率為45.28%。詳見表2。

表2 204株金黃色葡萄球菌與46株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐消毒劑qacA基因和耐消毒劑PVL基因的檢出率

3 討論

在醫(yī)學領(lǐng)域中，消毒劑被廣泛應用于醫(yī)院的各項消毒工作中。有研究指出，消毒劑的廣泛使用與病菌消毒劑抗力的提高存在著一定的關(guān)系。消毒劑的濫用提高了金黃色葡萄球菌等病原菌的耐藥性，加速了病菌的傳播和感染，且在一定程度上還會導致其發(fā)生基因變異。

本次研究的結(jié)果顯示，A組金黃色葡萄球菌在濃度為20%的含氯消毒液中的存活率為61.76%，B組金黃色葡萄球菌在濃度為30%的含氯消毒液中的存活率為32.35%，兩組金黃色葡萄球菌在不同濃度消毒劑中的存活率相比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。在這204株金黃色葡萄球菌中，耐消毒劑qacA基因的檢出率為10.08%，耐消毒劑PVL基因的檢出率為20.35%。其中，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐消毒劑qacA基因的檢出率為34.69%，耐消毒劑PVL基因的檢出率為45.28%。

綜上所述，醫(yī)護人員、患者、醫(yī)用物品表面的金黃色葡萄球菌均存在一定程度的耐消毒劑抗力，且耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐消毒劑qacA基因與耐消毒劑PVL基因的檢出率較高。因此，醫(yī)院應嚴格執(zhí)行院內(nèi)感染的控制制度，做好醫(yī)院的消毒工作，適當?shù)靥岣呦疽旱臐舛?，以降低院?nèi)感染的發(fā)生率。

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